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        桔梗最優(yōu)提取工藝研究

        2018-11-01 09:13:00王船英
        關(guān)鍵詞:膏率桔梗浸膏

        王船英

        (安徽醫(yī)學(xué)高等??茖W(xué)校 安徽合肥 230601)

        為了更好地開發(fā)利用桔梗的藥用價值,國內(nèi)外大批專家學(xué)者對其提取工藝進行了大量的研究[1]。該課題通過設(shè)計單因素實驗和三因素三水平正交試驗對桔梗提取工藝進行考察分析,為桔梗的進一步開發(fā)和利用提供參考。

        1單因素實驗設(shè)計

        1.1加水量的研究

        選取加水量為6倍、8倍和10倍時,稱取5g粉末,提取溫度為80℃,提取次數(shù)為1次,提取時間為1h時,研究加水量對浸膏率的影響,詳見表1和圖2。

        表1 加水量對浸膏率的影響

        圖1 加水量對出膏率的關(guān)系圖

        由圖1可以看出,隨著加水量依次升高,浸膏提取率依次增加,在加水量為6倍水時,提取率較低,加水量為12倍水時,提取率最高。綜合考慮,選取8倍、10倍、12倍三個水平進行正交試驗。

        1.2提取時間的研究

        選取提取時間為0.5h、1h、1.5h和2h時,提取溫度為80℃,提取次數(shù)為1次,加水量為8倍水時,研究提取時間對浸膏率的影響,見表2和圖2。

        表2 提取時間對浸膏率的影響

        圖2提取時間對出膏率的關(guān)系圖

        根據(jù)表2和圖2可以看出,隨著提取時間依次增加,從0.5h到1.5h浸膏率顯著增加,1.5h到2h出膏率增速減緩,提取時間為2h時,浸膏率達到最高。從工廠生產(chǎn)的經(jīng)濟效益考慮,選取1.5h為最佳提取時間。綜合考慮,選取0.5h、1h、1.5h三個水平進行正交試驗。

        1.3提取次數(shù)的研究

        選取提取次數(shù)為1次、2次、3次時,提取溫度為80℃,提取時間為1h,加水量為8倍水時,研究提取次數(shù)對浸膏率的影響,見表3和圖3。

        表3 提取時間對浸膏率的影響

        圖3提取次數(shù)對出膏率的關(guān)系圖

        根據(jù)實驗結(jié)果可知,當(dāng)提取次數(shù)依次增加時,從1次到3次,浸膏率呈明顯上升趨勢。第3次時,浸膏率最高,故選取3次為最佳提取次數(shù)。綜合考慮,選取1次、2次、3次進行正交實驗設(shè)計。結(jié)論:根據(jù)單因素實驗的結(jié)果,得出最優(yōu)提取條件應(yīng)該是:加水量為10倍,提取時間為1.5h,提取次數(shù)為3次。

        2正交實驗設(shè)計

        依據(jù)單因素實驗結(jié)果設(shè)計正交實驗,以出膏率為考察指標(biāo),優(yōu)化出桔梗提取物的最佳提取工藝。

        經(jīng)過單因素實驗,得出提取時間為1.5h,提取次數(shù)為3h,加水量為10倍水的最優(yōu)提取條件,由于實驗條件的設(shè)置不精確,實驗變量的設(shè)置不具體,故有必要做一次正交試驗設(shè)計,此正交試驗設(shè)計以三因素四水平正交表(見表4),圍繞單因素實驗得出的最優(yōu)條件,上下波動取值。因正交表中有空列以計算實驗誤差項,故每次實驗均重復(fù)3次,取其平均值計算。

        表4 正交試驗結(jié)果

        2.1正交試驗出膏率檢查

        表5 正交試驗出膏率情況

        2.2正交試驗中桔梗皂苷D含量測定

        2.2.1色譜條件 ①高效液相色譜儀:Waters1525二元高壓泵和Waters2489紫外檢測器。②色譜柱:大連依利特C18色譜柱(4.6mm×250mm,10μm)。③流動相:乙腈-水(28:72)[2]。④檢測波長:210nm。⑤流速:1ml/min。⑥柱溫:30℃ 。⑦進樣量:20μL。

        2.2.2 對照溶液的制備 精密稱取桔梗皂苷D對照品2mg,至10mL量瓶中,加甲醇到刻度,再精密吸取1mL,置于10mL量瓶中,加甲醇到刻度,即得濃度為0.02mg/ml的對照品溶液。

        2.2.3 供試品的制備

        精密稱定1g浸膏,加水5mL將其超聲溶解,過0.22μm微孔濾膜,即得。

        2.2.4桔梗皂苷D含量測定

        取9批供試品溶液進行HPLC分析。結(jié)果見下表所示。經(jīng)計算,9批供試品中桔梗皂苷D含量在0.01%-0.05%之間,見表6。

        表6 供試品溶液HPLC測定結(jié)果

        2.3評價指標(biāo)

        對提取得到的干浸膏中的桔梗皂苷D含量及浸膏率進行測定,以此為指標(biāo)優(yōu)選桔梗皂苷D的最佳提取工藝,根據(jù)綜合評分法(綜合評分=桔梗皂苷含量*70%+出膏率*30%),計算綜合評分,并以該綜合評分為評價指標(biāo)。結(jié)果見表7所示。

        表7 桔梗皂苷D提取工藝的綜合評分

        根據(jù)正交實驗結(jié)果可知,提取次數(shù)和提取時間對實驗結(jié)果影響最大,加水量對實驗結(jié)果影響最小。故可以得出結(jié)論,以桔梗出膏率和桔梗皂苷D含量為考察指標(biāo)的最佳提取工藝為A1B3C3,即加水量為8倍、提取1.5h、提取3次為最優(yōu)提取方案。

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