王新衛(wèi)，秦黃旋， 邱小萍

(1.武漢大學(xué)a.基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院； b.病毒研究所； 2.武漢市黃陂區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，武漢 430300)

母嬰途徑是15歲以下兒童感染人類免疫缺陷病毒(HIV)的最主要途徑，約90%的兒童通過(guò)此途徑感染艾滋病[1]。另?yè)?jù)統(tǒng)計(jì)[2]，經(jīng)母嬰傳播感染艾滋病的人數(shù)占艾滋病總?cè)藬?shù)的1.1%，且經(jīng)母嬰傳播造成艾滋病流行的潛在危險(xiǎn)日漸增大。研究[3]表明，新近感染HIV的人的傳染性比已感染HIV的人更強(qiáng)。因此，艾滋病的早期發(fā)現(xiàn)和早期診斷對(duì)預(yù)防嬰兒HIV的傳播、控制艾滋病的流行至關(guān)重要。2014年2月黃陂區(qū)人民醫(yī)院引進(jìn)的雅培i2000化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，是化學(xué)發(fā)光法第四代HIV抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)儀，它能同時(shí)檢測(cè)HIV-1/2抗體和p24抗原[4]，較第三代縮短8～10 d[5]。本研究分析8例孕婦HIV初篩陽(yáng)性標(biāo)本的復(fù)核和確認(rèn)情況，探討其出現(xiàn)假陽(yáng)性的原因，旨在為孕婦艾滋病的早期診斷提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

選取黃陂區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科自2016年1月至2017年10月HIV初篩的孕產(chǎn)婦樣本1562例，其中陰性1554例，陽(yáng)性8例；將8例初篩陽(yáng)性孕產(chǎn)婦血液樣本納入研究對(duì)象；i2000化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(美國(guó)雅培)及配套HIV抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑盒。

1.2 方法

按照《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》(2015年版)[6]的要求對(duì)8例初篩試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)的孕產(chǎn)婦抽血進(jìn)行復(fù)檢，1份血樣為肝素鋰抗凝血漿標(biāo)本，1份血樣為促分離膠血清標(biāo)本；使用美國(guó)雅培i2000化學(xué)發(fā)光免疫分析儀采用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析法(CMIA)檢測(cè)化學(xué)發(fā)光信號(hào)/臨界化學(xué)發(fā)光信號(hào)(S/CO)值；復(fù)檢1次后仍為陽(yáng)性的標(biāo)本通過(guò)免疫金標(biāo)記技術(shù)再?gòu)?fù)檢，將2次復(fù)檢至少1次呈陽(yáng)性反應(yīng)的標(biāo)本送武漢市疾病控制中心采用western blot實(shí)驗(yàn)進(jìn)行最后確認(rèn)[7]。

2 結(jié)果

CMIA儀器按內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)判讀結(jié)果，測(cè)得的樣本S/CO值≥1.0視為HIV抗體陽(yáng)性；S/CO值<1.0則為HIV抗體陰性。S/CO值為1.0～10.0時(shí)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為0%，假陽(yáng)性為100%；在S/CO值10.1～200.0時(shí)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為50%，假陽(yáng)性為50%；在S/CO值>200時(shí)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為100%，假陽(yáng)性為0%。初篩陽(yáng)性的8例孕婦血液標(biāo)本中2例復(fù)檢為陰性，其他6例復(fù)檢和western blot結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 8例孕產(chǎn)婦血液HIV初篩、復(fù)檢與western blot結(jié)果比較 例

3 討論

由本研究表1可以看出，在CMIA S/CO值1.0～10.0時(shí)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為0%；在S/CO值10.1～200.0時(shí)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為50%；在S/CO值>200時(shí)陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為100%。韓國(guó)Kim等[8]的研究結(jié)果也表明，假陽(yáng)性標(biāo)本的S/CO值平均為2.94(1.00～34.59)，HIV感染的標(biāo)本S/CO值平均為385.97(7.28～739.98)。故推測(cè)隨著CMIA S/CO值的增加，HIV感染的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值越高，假陽(yáng)性率越低。

化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)的高靈敏度與HIV四代試劑高敏感性的疊加，使HIV抗體檢測(cè)的假陽(yáng)性率大大增加[9]，本研究中假陽(yáng)性率為50%,與Jensen等[10]報(bào)道的31.39%以及Wang等[3]報(bào)道的22.01%有明顯區(qū)別，可能與本研究中的人群比較特殊和本研究的樣本例數(shù)過(guò)少有關(guān)。孕婦HIV假陽(yáng)性可能與以下因素有關(guān)：1)標(biāo)本自身性狀，纖維蛋白原等，如工作碰到的2次血清標(biāo)本初篩陽(yáng)性，標(biāo)本重新抽取采用肝素鋰復(fù)檢則為陰性，考慮是標(biāo)本處理不好，導(dǎo)致纖維蛋白原聚集引起假陽(yáng)性。孕婦妊娠后期纖維蛋白原的波動(dòng)范圍可由非孕時(shí)的平均約2～4 g·L-1增加至4～6 g·L-1[11]，其纖維蛋白原水平明顯高于其他人群[12]，故更容易導(dǎo)致其出現(xiàn)HIV假陽(yáng)性。2)孕婦體內(nèi)存在其他抗體的干擾如類風(fēng)濕系列：抗鏈球菌、類風(fēng)濕因子、抗核抗體等[13]，導(dǎo)致抗HIV假陽(yáng)性。3)由于第4代HIV檢測(cè)試劑的固相載體上同時(shí)包被抗P24的單克隆抗體和HIV抗原P24，而載體的表面積是固定的，在檢測(cè)過(guò)程中，吸附到載體上的抗體和抗原的量均會(huì)受到限制，導(dǎo)致抗原和抗體檢測(cè)之間的干擾現(xiàn)象，這可能是造成檢測(cè)假陽(yáng)性的重要原因之一[14]。4)由于固相載體上包被的是抗HIV P24抗體是鼠抗體，所以部分假陽(yáng)性反應(yīng)是由于人對(duì)鼠抗體反應(yīng)HAMA(人抗鼠抗體效應(yīng))[15]，這說(shuō)明HIV抗體檢測(cè)的假陽(yáng)性與P24抗原的非特異性相關(guān)。

總之，孕婦HIV初篩對(duì)于預(yù)防母嬰垂直傳播至關(guān)重要，HIV檢測(cè)的假陽(yáng)性結(jié)果給HIV初篩實(shí)驗(yàn)室的工作帶來(lái)諸多不便，也造成了巨大醫(yī)療資源浪費(fèi)，同時(shí)給受檢者帶來(lái)沉重的心理負(fù)擔(dān)，尤其是第四代試劑的出現(xiàn)，假陽(yáng)性現(xiàn)象更為突出。雅培化學(xué)發(fā)光免疫分析儀雖然靈敏性高、特異性強(qiáng)，但也出現(xiàn)較多的假陽(yáng)性。因此，孕婦HIV初篩極易產(chǎn)生假陽(yáng)性，當(dāng)結(jié)果存疑時(shí)，應(yīng)行復(fù)檢和western blot確認(rèn)實(shí)驗(yàn)等進(jìn)行綜合判斷。