姜美燕

【中圖分類號】R446.61 【文獻標識碼】A 【文章編號】2095-6851（2018）06--01

乙型肝炎（乙肝）是一種臨床常見的慢性傳染病，最近的流行病學(xué)調(diào)查研究顯示，我國乙肝的發(fā)病率一直居高不下，且有一定的上升趨勢，因此加強對乙肝的診治和預(yù)防意義重大，其中檢測乙肝病毒是一個重要環(huán)節(jié)[1]。磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法是臨床上檢測乙肝五項指標的常用方法，其可以直接反映人體對乙肝病毒的免疫反應(yīng)狀態(tài)，但無法直接反映乙肝病毒在人體內(nèi)的復(fù)制情況[2]，實時PCR能檢測患者血清中乙肝病毒DNA的含量，從而直接反映患者血液中乙肝病毒載量[3]。本研究旨在探討實時PCR檢測乙肝DNA與磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法檢測乙肝五項的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選擇2015年10月至2017年10月到我院就診的192例乙肝患者作為研究對象，其中男118例，女74例，年齡19-67 歲，平均年齡（40.4±11.2）歲，病程為 4個月-23 年，平均病程（8.9±2.3）年。

1.2 研究方法

1.2.1 樣本采集 采集患者晨空腹靜脈血2mL，3000rpm離心10min，分離血清，將其平均分為兩份，-80℃保存待測，一份用于磁微粒化學(xué)發(fā)光法檢測乙肝五項，一份用于實時PCR檢測乙肝病毒DNA 含量。

1.2.2 磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法 嚴格按照鄭州安圖生物工程有限公司生產(chǎn)的乙肝五項檢測試劑盒操作步驟檢測患乙肝者血清中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb水平。

1.2.3 實時PCR法 采用磁珠法提取患者血清中乙肝病毒DNA，使用羅氏Cobas z 480全自動熒光PCR分析儀擴增乙肝病毒DNA，PCR反應(yīng)條件：93℃ 2min→1個循環(huán)，93℃ 45s→55℃60s→10個循環(huán)，93℃ 30s→55℃ 45 s→30個循環(huán)，40℃ 20s→1個循環(huán)，乙肝DNA檢測試劑盒購自中山大學(xué)達安基因有限公司。在反應(yīng)結(jié)束后，采用實時PCR專用自動分析軟件統(tǒng)計乙肝病毒DNA含量。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

所有實驗數(shù)據(jù)采用SPSS18.0軟件進行分析，計數(shù)資料組間差異用x2檢驗，計量資料采用（）表示，組間比較采用t檢驗，當P<0.05時認為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

按照所有患者血清樣本肝五項指標的檢測結(jié)果可分為五組，其中第1組[HBsAg（+）、HBeAg（+）、HBcAb（+）]和第4組[HBsAg（+）、HBeAg（+）]患者的乙肝病毒DNA陽性率顯著高于其他四組（P<0.05）；第1組的乙肝五項模式[HBsAg（+）、HBeAg（+）、HBcAb（+）]臨床上稱之為“大三陽”，該組患者血清乙肝病毒DNA 拷貝數(shù)顯著高于其他四組（P<0.05）；第2 組的乙肝五項模式[HBsAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）]臨床上稱之為“小三陽”，該組患者的血清乙肝病毒DNA 檢出陽性率顯著低于要遠低于第1組，而乙肝病毒DNA拷貝數(shù)與第1組相比無顯著性差異（P>0.05）；第5 組[HBsAg（+）]患者均未檢出乙肝病毒DNA。

3 討論

在我國傳染病發(fā)病率中，乙型肝炎的感染率一直較高，最近的流行病學(xué)報道顯示，我國HBsAg陽性率在8.1-12.3%之間，一般乙肝病毒感染者易發(fā)展成慢性肝炎，嚴重者甚至會發(fā)展為肝硬化、肝癌等疾病，而嚴重影響患者的生活質(zhì)量[4]，因此，選擇準確有效的檢測方法對乙肝患者的早期診斷、及時治療，以及減少乙肝的傳播意義重大。

磁微粒化學(xué)發(fā)光法是將磁性分離技術(shù)、化學(xué)發(fā)光技術(shù)、免疫分析技術(shù)三者結(jié)合起來的一種新興分析方法，臨床上可用于檢測乙肝五項指標，該方法具有靈敏度高、特異性強、操作快捷等優(yōu)點，其可以直接反映人體對乙肝病毒的免疫反應(yīng)狀態(tài)，然而，這種方法無法直接反映乙肝病毒在人體內(nèi)的復(fù)制情況[5]。實時PCR可以直接檢測出患者血清中乙肝病毒DNA的含量，及時、動態(tài)的反映患者血液中乙肝病毒載量，并為乙肝病毒的傳染性評價提供參考依據(jù)[6]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，第1組 [HBsAg（+）、HBeAg（+）、HBcAb（+），“大三陽”]患者血清乙肝病毒DNA陽性率和乙肝病毒DNA拷貝數(shù)均較高（P<0.05）；第2 組 [HBsAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+），“小三陽”]患者的血清乙肝病毒DNA 檢出陽性率顯著低于要遠低于第1組，但乙肝病毒DNA拷貝數(shù)與第1組相比無顯著性差異（P>0.05），這提示實時PCR檢測乙肝DNA含量聯(lián)合磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法檢測乙肝五項對提高乙型肝炎的準確診斷具有重要的應(yīng)用價值。

參考文獻

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