戴 一，朱向群，吳靈剛

（安徽新華學(xué)院藥學(xué)院，安徽合肥 230088）

烏靈參為炭角菌科黑柄炭角菌Xylaria nigripes (KI.) Sacc的菌核，據(jù)《四川中藥志》記載，該藥材主產(chǎn)于四川、云南等地，性溫，味微苦，能益氣補(bǔ)血，民間主要用于鎮(zhèn)靜、安眠、補(bǔ)腎等[1]。烏靈參所含化學(xué)成分豐富，主要包括多糖、酚類、萜類及生物堿等[2]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，烏靈參除具有鎮(zhèn)靜催眠作用外，還具有抗氧化[3]、降血糖[4]及抗炎保肝等作用[5]。但目前對(duì)烏靈參產(chǎn)生鎮(zhèn)靜催眠作用的具體成分研究較少，其鎮(zhèn)靜催眠有效部位的研究亦未見報(bào)道。為揭示烏靈參鎮(zhèn)靜催眠作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，本研究采用不同濃度乙醇對(duì)烏靈參進(jìn)行超聲提取，并將提取物給予小鼠灌胃，觀察小鼠外觀行為及與戊巴比妥的協(xié)同作用，以期為確定烏靈參鎮(zhèn)靜催眠的有效部位提供依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器 PT-10435s型電子天平（天津市順諾儀器科技有限公司），CB3201數(shù)字描記式小動(dòng)物測(cè)定儀(中國川北電子工業(yè)公司設(shè)計(jì)制造)，CJ-060S超聲清洗儀（深圳市超潔科技實(shí)業(yè)有限公司），IKA RV8 V旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(艾卡(廣州)儀器設(shè)備有限公司)，DZF-6050A型真空干燥箱（上海坤天儀器有限公司）。

1.2 藥材與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 烏靈參，購于亳州藥材市場(chǎng)，產(chǎn)地四川，經(jīng)安徽新華學(xué)院陸松霞老師鑒定為Xylaria nigripes(KI.)Sacc的菌核。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：昆明種小鼠，18g～22g，雌雄各半，由安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供(合格證號(hào)：皖醫(yī)實(shí)動(dòng)準(zhǔn)字第01號(hào)) 。

2 方法與結(jié)果

2.1 各極性部位樣品溶液的制備 稱取烏靈參粉末（過4號(hào)篩）5份，每份50.0g，分別用不同濃度乙醇（100%乙醇、75%乙醇、50%乙醇、25%乙醇、水）超聲提取，固液比為1g：10ml，每份用同種濃度乙醇提取3次，每次30min，提取液合并濃縮成浸膏狀在60℃真空干燥48h，得不同濃度乙醇提取物，計(jì)算得膏率。結(jié)果：各組得膏率均在10%以上，且隨著乙醇濃度的增加，得膏率逐漸降低；乙醇濃度達(dá)到50%以后，得膏率降低并不明顯。見表1：

表1 烏靈參醇提物得膏率

2.2 小鼠自主活動(dòng)實(shí)驗(yàn)[6]昆明種小鼠60只，隨機(jī)分成6 組，每組10只，即空白對(duì)照組、100%乙醇提取物組、75%乙醇提取物組、50%乙醇提取物組、25%乙醇提取物組、水提取物組。各組小鼠灌胃給藥(稱取適量浸膏以生理鹽水溶解，給藥容積0.5ml/20g，給藥劑量5.0g提取物/kg)，空白對(duì)照組給予生理鹽水，其余各組給予受試藥物。給藥30min后測(cè)定10min內(nèi)小鼠自主活動(dòng)次數(shù)。結(jié)果：與其它各組比較，烏靈參100%乙醇提取物組能明顯減少小鼠自主活動(dòng)次數(shù)，說明該劑量下烏靈參100%乙醇提取物對(duì)小鼠具有明顯鎮(zhèn)靜作用，為烏靈參鎮(zhèn)靜作用的有效部位。見表2：

表2 烏靈參不同濃度乙醇提取組對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響(±s , n=10)

組別 劑量(提取物 g/kg) 10min內(nèi)活動(dòng)次數(shù)空白對(duì)照組 -- 164.6±18.3水提取物組 5.0g 155.3±17.1 25%乙醇提取物組 5.0g 150.4±23.7 50%乙醇提取物組 5.0g 138.1±19.8 75%乙醇提取物組 5.0g 113.9±21.3無水乙醇提取物組 5.0g 100.8±24.1

2.3 對(duì)戊巴比妥鈉閾下催眠劑量下小鼠的催眠作用[7]另取小鼠40只，隨機(jī)分組為2組，空白對(duì)照組和100%乙醇提取物組，每組20只。小鼠灌胃（劑量、容積同2.2）給藥30min后，分別腹腔注射30mg/kg戊巴比妥鈉，觀察30min各組小鼠入睡率(以翻正反射消失達(dá)1min以上為入睡)。結(jié)果：烏靈參100%乙醇提取物可明顯增加閾下劑量戊巴比妥鈉引起的小鼠入睡率。見表3：

表3 烏靈參100%乙醇提取組對(duì)小鼠入睡的影響(n=20)

3 討論

烏靈參作為一種名貴藥材，主要用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療，但其藥理作用物質(zhì)基礎(chǔ)的研究較少。本研究采用不同濃度乙醇提取烏靈參，發(fā)現(xiàn)各組得膏率在均在10%以上，且隨著乙醇濃度的增加，得膏率逐漸降低。有文獻(xiàn)報(bào)道，烏靈參中含多糖、酚類、萜類及生物堿等化學(xué)成分[2]。同時(shí)，烏靈參中還含有一些初級(jí)代謝產(chǎn)物，這些成分大多極性較大，在水中有較好的溶解度，因此，低濃度乙醇有較好的得膏率。本研究發(fā)現(xiàn)，烏靈參100%乙醇提取物對(duì)小鼠的自主活動(dòng)次數(shù)具有明顯的抑制作用，且與戊巴比妥具有協(xié)同作用，能增加閾下劑量戊巴比妥鈉引起的小鼠入睡率，提示烏靈參100%乙醇提取物具有明顯的鎮(zhèn)靜催眠作用，為烏靈參鎮(zhèn)靜催眠的有效部位。