杜曉霞，丁孟松，吳光興，王俊珍，范文東，解紅梅，姜八一*

（1.山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院寵物科技系，山東濰坊 261061；2.山東省濰坊市動物疫病預(yù)防與控制中心，山東濰坊 261041；3.山東省泰安市東平縣畜牧獸醫(yī)局，山東東平 271500；4.山東省無棣縣畜牧獸醫(yī)局畜禽遺傳資源工程中心，山東濱州 251900）

近年來，多酚在動物上的應(yīng)用引起了研究人員的廣泛關(guān)注，對動物具有潛在功能。多酚類化合物具有抗氧化功能，同時對人的一些疾病如慢性炎癥、心血管疾病、癌癥和糖尿病等具有抑制作用（Acosta-Estrada等，2014）。此外，多酚還具有提供葡萄糖耐受性、降低血脂水平和控制肥胖等功能（Nichols等，2011）。黃酮類化合物是多酚中數(shù)量最多的一種，被認(rèn)為是天然的抗氧化劑（Balasundram等，2006）。黃酮類化合物的抗氧化活性可歸因于一種或多種，其分子中含有芳香族羥基，可以清除自由基；同時在植物中廣泛分布，本身及其次生代謝產(chǎn)物具有抵御感染和應(yīng)激的影響，如紫外線、病原體和物理損傷等（Robbins，2003）。槲皮黃酮是一種植物性化合物，屬于黃酮醇的子類，在蘋果、洋蔥及其副產(chǎn)品等多種水果和蔬菜中普遍存在。槲皮黃酮已被證明是一種極好的體外抗氧化劑（Boots等，2008）。在肉雞方面的研究已經(jīng)表明，槲皮黃酮及其代謝產(chǎn)物糖苷可提高肌肉氧化穩(wěn)定性（Goliomytis等，2014）。目前，關(guān)于槲皮黃酮對蛋雞蛋黃抗氧化性能的研究報道較少，本試驗以蛋雞為試驗動物，考察日糧中添加不同水平的槲皮黃酮對蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)及蛋黃氧化穩(wěn)定性的影響，為槲皮黃酮在蛋禽中的應(yīng)用及適宜添加水平提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 槲皮黃酮（96%純度）購自上海甄準(zhǔn)生物科技有限公司。

1.2 試驗日糧與分組 選取健康、產(chǎn)蛋率相近的70周齡羅曼褐殼蛋雞720只，隨機分成4組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)30只。試驗日糧參考NRC（1994）及《中國雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn) NY/T33-2004》配制，基礎(chǔ)日糧為玉米-豆粕型日糧，試驗日糧分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.1、0.2和0.4 g/kg槲皮黃酮。試驗日糧均為粉料，基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗雞只采用三層階梯籠養(yǎng)，每籠3只雞。光照采用人工光照和自然光照相結(jié)合，光照時間為16 h（10 lx），舍內(nèi)相對濕度為60%～65%。試驗雞只全期自由采食和飲水，按照常規(guī)程序免疫和消毒。試驗開始預(yù)飼1周，正式期4周。

1.4 測定指標(biāo)

1.4.1 生產(chǎn)性能 試驗期間每天按重復(fù)記錄產(chǎn)蛋個數(shù)，稱量蛋重，每周按重復(fù)記錄采食量，計算產(chǎn)蛋率、平均日采食量、蛋重和料蛋比。

1.4.2 蛋品質(zhì)測定 分別在試驗結(jié)束時，每組按重復(fù)隨機選6枚雞蛋進行蛋品質(zhì)測定。蛋品質(zhì)指標(biāo)采用日立全自動蛋品質(zhì)分析儀測定（DET-6000，日本日立）。

1.4.3 血清和蛋黃膽固醇含量 試驗結(jié)束時，每個重復(fù)隨機選擇4只雞翅下靜脈采血5 mL，3000 r/min離心10 min后，Epperdoff 管-80℃保存。每組隨機選擇36枚雞蛋，分離蛋黃和蛋清。采用南京建成生物工程有限公司的膽固醇試劑盒測定血清和蛋黃中膽固醇的含量。

1.4.4 蛋黃抗氧化性能 分別于試驗第7、14和28天每組分別收集18枚雞蛋測定蛋黃中丙二醛含量。在試驗第10天每組分別收集18枚雞蛋4℃冰箱貯存，分別于第28和80天測定蛋黃中丙二醛含量。丙二醛含量采用試劑盒法測定，試劑盒購自南京建成生物工程有限公司。

1.4.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析 采用SPSS 19.0版多因素方差分析（Muti-way ANOVA）處理數(shù)據(jù)，各處理間的平均值比較采用Tukey’s多重比較進行差異顯著性檢驗。以P＜0.05作為差異顯著標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧槲皮黃酮水平對蛋雞生產(chǎn)性能的影響由表2可知，日糧槲皮黃酮水平對蛋雞平均日采食量、產(chǎn)蛋率和料蛋比均無顯著影響（P＞0.05）。日糧添加0.2 g/kg槲皮黃酮較0.1和0.4 g/kg槲皮黃酮組蛋雞平均日采食量顯著提高（P＜0.05），且日糧槲皮黃酮水平對蛋雞平均日采食量的影響呈現(xiàn)顯著的二次曲線效應(yīng)（P＜0.05）。

2.2 日糧槲皮黃酮水平對雞蛋品質(zhì)的影響 由表3可知，日糧槲皮黃酮水平對蛋形指數(shù)、蛋殼強度、蛋殼厚度均無顯著影響（P＞0.05）。隨著日糧槲皮黃酮添加水平的增加，蛋黃重量線性增加（P＜0.05）。日糧添加0.2 g/kg槲皮黃酮較0.1和0.4 g/kg槲皮黃酮組顯著提高蛋殼重量（P＜0.05），但與對照組無顯著差異（P＞0.05）。隨著日糧槲皮黃酮水平的增加，蛋黃重量線性增加（P ＜ 0.05）。

2.3 日糧槲皮黃酮水平對蛋雞血清和蛋黃中膽固醇含量的影響 由表4可知，蛋黃中膽固醇的含量隨日糧槲皮黃酮添加水平的增加線性增加（P＜0.05），其中0.2和0.4 g/kg槲皮黃酮組蛋黃膽固醇含量顯著高于對照組和0.1 g/kg槲皮黃酮組（P＜0.05），同時0.2和0.4 g/kg槲皮黃酮組雞蛋總膽固醇含量顯著高于對照組和0.1 g/kg槲皮黃酮組（P＜0.05）。日糧槲皮黃酮添加水平對蛋雞血清膽固醇含量無顯著影響（P＞0.05）。

2.4 日糧槲皮黃酮水平對蛋黃抗氧化性能的影響 由表5可知，不同試驗時間及貯存期蛋黃抗氧化性能表示為每克蛋黃中丙二醛的含量（ng/g蛋黃）。隨著日糧槲皮黃酮添加水平的增加，蛋黃中丙二醛的含量顯著線性降低（P＜0.05）。與對照組相比，0.1、0.2和0.4 g/kg槲皮黃酮組第7、14和28天蛋黃丙二醛含量顯著降低（P＜0.05）。日糧槲皮黃酮水平和時間對蛋黃膽固醇含量的影響無顯著交互作用（P＞0.05）。雞蛋貯存28和80 d后，與對照組相比，日糧添加0.1、0.2和0.4 g/kg槲皮黃酮蛋黃膽固醇含量顯著降低（P＜0.05），蛋黃膽固醇含量與日糧槲皮黃酮水平呈顯著線性和二次曲線關(guān)系（P＜0.05）。0.4 g/kg槲皮黃酮組較其他各組蛋黃丙二醛含量顯著降低（P＜0.05）。日糧槲皮黃酮水平與貯存時間對蛋黃丙二醛含量的影響具有顯著交互作用（P＜0.05）。

3 討論

3.1 日糧添加不同水平的槲皮黃酮對蛋雞生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)的影響 本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，日糧添加槲皮黃酮對蛋雞生產(chǎn)性能的影響僅表現(xiàn)在采食量上，日糧添加0.2 g/kg槲皮黃酮較其他各組顯著提高蛋雞的平均日采食量。蛋雞采食量的增加與蛋殼重量提高的結(jié)果一致。采食量提高，蛋雞攝入的鈣水平相應(yīng)提高；鈣是蛋殼的主要組成成分，因此蛋殼重量相應(yīng)提高。Liu等（2014，2013）研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加槲皮黃酮可以顯著提高蛋雞產(chǎn)蛋率和降低料蛋比，其中日糧添加0.2和0.4 g/kg槲皮黃酮表現(xiàn)最好，其認(rèn)為這與槲皮黃酮具有植物雌激素的活性功能有關(guān)。Liu等（2013）同樣認(rèn)為，槲皮黃酮可以改善蛋殼質(zhì)量，因為雌激素對鈣代謝具有調(diào)控作用，這與本試驗添加槲皮黃酮提高蛋殼重量的研究結(jié)果一致。

表2 日糧槲皮黃酮水平對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

表3 日糧槲皮黃酮水平對雞蛋品質(zhì)的影響

表4 日糧槲皮黃酮水平對蛋雞血清和蛋黃中膽固醇含量的影響

表5 日糧槲皮黃酮水平對蛋黃抗氧化性能的影響 ng/g

3.2 日糧添加不同水平的槲皮黃酮對蛋雞血清和蛋黃膽固醇含量的影響 本研究發(fā)現(xiàn)，蛋黃膽固醇含量隨日糧槲皮黃酮添加水平的升高而升高，而血清膽固醇水平呈現(xiàn)上升趨勢，但差異不顯著。蛋黃膽固醇水平的升高通常被人們認(rèn)為與心血管疾病風(fēng)險有關(guān)。但膽固醇是動物機體必需的一種物質(zhì)，參與合成細(xì)胞膜、維生素D、激素等，適量的膽固醇能維持身體的正常生理功能。當(dāng)動物攝入高膽固醇食物時，機體會控制吸收量并降低膽固醇的合成量；相反，當(dāng)攝入低膽固醇時，機體會合成足夠的膽固醇（張旭等，2011）。本研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)日糧槲皮黃酮水平達(dá)到0.2 g/kg時，蛋黃中膽固醇含量才表現(xiàn)為顯著升高。Zhao等（2011）研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加0.5%槲皮黃酮可以顯著提高血清低密度脂蛋白膽固醇的水平，說明槲皮黃酮可以調(diào)控膽固醇代謝，這與本試驗研究結(jié)果一致。但也有相關(guān)報道與本試驗結(jié)果存在差異，如Liu等（2013）、Iskender等（2016）在蛋雞日糧中添加槲皮黃酮發(fā)現(xiàn)，其降低了蛋黃和血清膽固醇水平。作者推測這可能與不同品種蛋雞蛋黃膽固醇含量不同有關(guān)，同時不同基因型蛋雞與日糧槲皮黃酮添加水平可能存在交互作用，但具體作用機制還有待進一步研究。

3.3 日糧添加不同水平的槲皮黃酮對蛋黃抗氧化性能的影響 本研究通過在日糧中添加不同水平的槲皮黃酮，考察其對在不同時間收集的雞蛋及貯存期間雞蛋蛋黃抗氧化性能的影響。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同水平的槲皮黃酮能顯著提高蛋黃氧化穩(wěn)定性，最長可達(dá)80 d，且日糧槲皮黃酮添加水平與貯存時間對蛋黃抗氧化性能的影響存在顯著交互效應(yīng)。此外，在整個實驗期間，通過連續(xù)測定蛋黃中丙二醛的含量發(fā)現(xiàn)，蛋雞采食含槲皮黃酮的日糧第7天時就可以改善蛋黃的氧化穩(wěn)定性。槲皮黃酮對蛋黃的抗氧化作用影響可能與其可以清除自由基，終止蛋黃中自由基鏈反應(yīng)有關(guān)（Van Acker等，2000）。Fayyaz 等（2016） 研究發(fā)現(xiàn)，蛋黃中槲皮黃酮平均水平為6.9 μg/mL。Goliomytis等（2014）研究發(fā)現(xiàn)，槲皮黃酮具有類似α-生育酚抗氧化活性功能，可以延長雞肉保存期，日糧中攝入的槲皮黃酮或其代謝產(chǎn)物可以沉積進入肌肉，從而促進肉質(zhì)的氧化穩(wěn)定性，本研究結(jié)果中雞蛋在貯存期間蛋黃氧化穩(wěn)定性的結(jié)果可能與槲皮黃酮或其代謝產(chǎn)物沉積在蛋黃中從而降低脂質(zhì)過氧化有關(guān)。

4 結(jié)論

日糧中添加0.1、0.2和0.4 g/kg槲皮黃酮可以提高蛋雞的生產(chǎn)性能，改善蛋黃氧化穩(wěn)定性。蛋雞采食含槲皮黃酮的日糧可以提高雞蛋新鮮度，延長保質(zhì)期。綜合蛋雞生產(chǎn)性能和蛋黃氧化穩(wěn)定性，日糧中槲皮黃酮適宜添加水平為0.2 g/kg。

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