徐秀景，謝長(zhǎng)文，劉 敏，宋 斌

（宿州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，安徽宿州 234000）

隨著消費(fèi)者食品安全意識(shí)的增強(qiáng)和病原微生物耐藥性的出現(xiàn)，無(wú)抗養(yǎng)殖已成為不可逆轉(zhuǎn)的趨勢(shì)。因此，尋找抗生素替代品和研發(fā)替代技術(shù)，保障畜牧生產(chǎn)健康發(fā)展是動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)家面對(duì)的一個(gè)重大科學(xué)問(wèn)題。

微生物發(fā)酵飼料技術(shù)是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種技術(shù)，有巨大應(yīng)用前景（亓秀曄，2016）。微生物發(fā)酵飼料是在人為可控制的條件下，以植物性農(nóng)副產(chǎn)品為主要原料，經(jīng)有益微生物代謝作用，降解部分多糖、蛋白質(zhì)和脂肪等大分子物質(zhì)，生成有機(jī)酸、可溶性多肽等易于消化吸收的小分子物質(zhì)，形成適口性好、營(yíng)養(yǎng)豐富、有效益生菌含量高的生物飼料，其有效成分主要包括極易吸收的有益微生物菌體蛋白、各種生物酶類(lèi)、生物活性寡膚、氨基酸、有機(jī)酸、活性益生菌等（陸文清，2011）。目前在發(fā)酵飼料生產(chǎn)中使用較為廣泛的主要有乳酸菌、芽孢桿菌和酵母菌（吳妍妍等，2013）。乳酸桿菌對(duì)豬影響的研究主要集中在對(duì)哺乳仔豬（石青松，2016）、斷奶仔豬（谷巍等，2007）和保育豬（周紅妹，2016）生長(zhǎng)性能和抗腹瀉等方面，對(duì)肥育豬生長(zhǎng)性能、豬肉品質(zhì)和抗氧化性方面的研究較少。因此，本試驗(yàn)研究乳酸菌固態(tài)發(fā)酵飼料對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能、豬肉品質(zhì)和血液抗氧化能力的影響，以期為養(yǎng)豬生產(chǎn)中應(yīng)用乳酸菌發(fā)酵飼料提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間及地點(diǎn) 本試驗(yàn)在某試驗(yàn)豬場(chǎng)進(jìn)行，試驗(yàn)時(shí)間為2017年4～9月，其中預(yù)飼期1周，正式期18周。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)設(shè)計(jì) 選擇（21.3+0.8）kg、（60+4）d的杜×長(zhǎng)×大三元雜交生長(zhǎng)育肥豬48頭，將試驗(yàn)豬只隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4頭豬。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組飼喂經(jīng)過(guò)乳酸菌發(fā)酵的飼糧。

1.3 試驗(yàn)飼糧 參照NRC飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制生長(zhǎng)期和育肥期豬的基礎(chǔ)飼糧，其原料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。試驗(yàn)所用乳酸菌發(fā)酵飼料的制作方法如下：按照飼料：水=100：60進(jìn)行混合，然后在常溫下密閉發(fā)酵，發(fā)酵7 d后開(kāi)窖取料飼喂。試驗(yàn)用乳酸菌購(gòu)自于XX生物公司。

表1 基礎(chǔ)飼糧原料組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.4 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)開(kāi)始前徹底清掃豬舍，然后清水沖洗消毒，自然晾干待用。試驗(yàn)豬群的飼喂管理按照豬場(chǎng)程序進(jìn)行，每日飼喂3次，飼喂時(shí)間分別為 6：00、14：00和 20：00，自由采食和飲水，每隔兩周對(duì)豬舍進(jìn)行常規(guī)消毒。

1.5 樣品采集及指標(biāo)測(cè)定

1.5.1 基礎(chǔ)飼糧樣品采集及營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定 每周采集投料前和豬采食后剩余的飼料，然后將18周收集的飼料充分混合，65℃烘干后粉碎，用于測(cè)定粗蛋白質(zhì)、鈣、有效磷、賴(lài)氨酸、蛋氨酸+胱氨酸含量。

1.5.2 發(fā)酵飼糧樣品采集及發(fā)酵指標(biāo)測(cè)定 飼糧發(fā)酵結(jié)束后收集發(fā)酵飼糧，按照GB2023-2003的方法測(cè)定發(fā)酵飼糧中乳酸含量，用酸度計(jì)測(cè)定發(fā)酵飼糧pH。按照何佳（1998）的方法計(jì)算飼糧樣品中乳酸桿菌的數(shù)量。

1.5.3 豬生長(zhǎng)性能測(cè)定 整個(gè)試驗(yàn)期內(nèi)，豬只生長(zhǎng)階段分為生長(zhǎng)期和育肥期，因此，豬只生長(zhǎng)性能的測(cè)定也分為生長(zhǎng)期生長(zhǎng)性能測(cè)定和育肥期生長(zhǎng)性能測(cè)定。每周統(tǒng)計(jì)每組各重復(fù)的投料量和剩料量，計(jì)算平均日采食量。分別在正式期的第56天和第126天早晨對(duì)豬只進(jìn)行空腹稱(chēng)重，計(jì)算平均日增重。結(jié)合平均日采食量和平均日增重，計(jì)算平均料肉比。

1.5.4 血液樣品采集及抗氧化指標(biāo)測(cè)定 分別于正式期第56天和第136天從各重復(fù)中挑選1只與平均體重相近的豬，前腔靜脈采血10 mL，室溫靜置30 min后，3000 r/min離心10 min，收集上層血清，放于-20℃冰箱保存。使用南京建成生物公司的試劑盒測(cè)定超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶和丙二醛含量。

1.5.5 豬肉品質(zhì)指標(biāo)測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)屠宰采血豬只，然后取背最長(zhǎng)肌測(cè)定肉質(zhì)指標(biāo)。用肉色分析儀測(cè)定宰后45 min和24 h后的肉色值。用便攜式pH測(cè)定儀測(cè)定宰后45 min和24 h后的豬肉pH。參考NY/T821-2004《豬肌肉品質(zhì)測(cè)定技術(shù)規(guī)范》的方法，測(cè)定豬肉滴水損失和剪切力。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析 采用SAS 9.2統(tǒng)計(jì)軟件的兩樣本獨(dú)立T檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，以P＜0.05為差異顯著。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 乳酸菌發(fā)酵飼料品質(zhì)檢測(cè) 由表2可以看出，從發(fā)酵第1天到發(fā)酵第5天，乳酸菌發(fā)酵飼糧的乳酸含量顯著升高（P＜0.05），從第5天開(kāi)始，發(fā)酵飼糧的乳酸含量趨于穩(wěn)定，數(shù)值平均約在110 mg/kg。同時(shí)可以發(fā)現(xiàn)，乳酸菌發(fā)酵飼糧pH隨發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)逐級(jí)降低，其中從發(fā)酵第1天到發(fā)酵第5天，pH顯著降低（P＜0.05）；而從第5天到第15天，pH趨于穩(wěn)定。隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)，發(fā)酵飼糧乳酸桿菌數(shù)量先增加后趨于平穩(wěn)，酵母菌數(shù)量在發(fā)酵第7天數(shù)量趨于穩(wěn)定。而對(duì)于大腸桿菌而言，在發(fā)酵第5天數(shù)量達(dá)到最大值，隨后迅速降低。

2.2 乳酸菌發(fā)酵飼料對(duì)豬生長(zhǎng)性能的影響 由表3可以看出，乳酸菌發(fā)酵飼糧對(duì)生長(zhǎng)期豬平均日增重、平均日采食量和料肉比均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。乳酸菌發(fā)酵飼糧對(duì)育肥豬和整個(gè)生長(zhǎng)期豬的平均日增重具有顯著影響，其中乳酸菌發(fā)酵飼糧組豬的平均日增重分別比對(duì)照組豬高7.11%和6.23%（P＜0.05）。乳酸菌發(fā)酵飼糧對(duì)育肥期豬和整個(gè)生長(zhǎng)期豬的平均日采食量均無(wú)顯著影響（P＞0.05），但乳酸菌發(fā)酵飼糧組豬的料肉比分別比對(duì)照組豬低7.55%和6.95%（P ＜ 0.05）。

2.3 乳酸菌發(fā)酵飼料對(duì)豬肉品質(zhì)的影響 由表4可以看出，乳酸菌發(fā)酵飼糧對(duì)豬肉亮度值和紅度值有顯著影響（P＜0.05），其中乳酸菌發(fā)酵組豬肉的亮度值和紅度值均顯著高于對(duì)照組。乳酸菌發(fā)酵飼糧對(duì)豬肉的黃度值、宰后45 min和宰后24 h的pH、滴水損失無(wú)顯著影響。乳酸菌發(fā)酵飼糧組豬肉的剪切力顯著低于對(duì)照組豬肉（P ＜ 0.05）。

表4 乳酸菌發(fā)酵飼糧對(duì)豬肉品質(zhì)的影響

2.4 乳酸菌發(fā)酵飼料對(duì)豬血液抗氧化能力的影響 由表5可以看出，對(duì)于生長(zhǎng)期豬和育肥期豬而言，乳酸菌發(fā)酵飼糧均提高豬血液抗氧化能力，提高超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性，降低血液丙二醛含量，減少氧化損傷。

3 討論

3.1 乳酸菌發(fā)酵飼料品質(zhì)分析 王旭明等（2002）研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵飼料pH隨發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)下降速度加快，發(fā)酵第4天pH降到5.0以下。魏愛(ài)斌等（2012）研究發(fā)現(xiàn)，植物乳桿菌發(fā)酵飼料的pH在發(fā)酵1 d后迅速下降，在發(fā)酵10 d時(shí)pH趨于穩(wěn)定，達(dá)4.2左右。李濤（2014）研究發(fā)現(xiàn)，乳酸菌固體發(fā)酵飼料的pH在發(fā)酵5 d后趨于穩(wěn)定。本試驗(yàn)得到了與上述研究類(lèi)似的試驗(yàn)結(jié)果。乳酸菌發(fā)酵飼料的pH與發(fā)酵飼料的乳酸含量變化規(guī)律一致。本試驗(yàn)結(jié)果表明，隨著發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)，乳酸菌發(fā)酵組的乳酸桿菌、酵母菌數(shù)量逐級(jí)增加，在發(fā)酵第7天時(shí)達(dá)到峰值，這與李濤（2014）的研究結(jié)果類(lèi)似。本試驗(yàn)中，乳酸菌發(fā)酵飼料的大腸桿菌數(shù)量呈先上升后下降的變化規(guī)律，這與王旭明等（2002）的研究結(jié)果一致。與飼料發(fā)酵過(guò)程中發(fā)酵環(huán)境和發(fā)酵優(yōu)勢(shì)菌群的變化有關(guān)。發(fā)酵剛開(kāi)始時(shí)，各種細(xì)菌數(shù)量都在逐級(jí)增加，隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)，飼料中乳酸含量累積增加，pH逐漸下降，發(fā)酵厭氧程度增強(qiáng)，乳酸桿菌成為優(yōu)勢(shì)菌群，導(dǎo)致大腸桿菌數(shù)量急劇下降。

表5 乳酸菌發(fā)酵飼糧對(duì)豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

3.2 乳酸菌發(fā)酵飼料對(duì)豬生長(zhǎng)性能的影響 眾多研究表明，乳酸菌發(fā)酵飼料可以改善飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，提高飼料消化率和利用率，提高畜禽機(jī)體免疫機(jī)能，促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)。孫建廣等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵乳酸桿菌可以顯著提高日增重，降低料肉比。李濤（2014）研究結(jié)果表明，乳酸菌固體發(fā)酵飼料對(duì)生長(zhǎng)期豬的生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響。本試驗(yàn)得到類(lèi)似的試驗(yàn)結(jié)果。研究表明，提高飼料酸度值可以增加動(dòng)物采食量，增加日增重，然而過(guò)高的酸度值會(huì)降低飼糧適口性，從而對(duì)動(dòng)物干物質(zhì)采食量和日增重具有負(fù)面作用（秦圣濤，2007）。本研究中發(fā)酵飼糧的乳酸含量達(dá)100 mg/kg，可能由于酸度過(guò)高降低了飼糧適口性。此外，腸道微生物區(qū)系的重新建立平衡需要一定時(shí)間，尤其是外來(lái)菌群在腸道定植時(shí)（譚子超等，2018），這也可能是乳酸菌發(fā)酵飼糧對(duì)生長(zhǎng)期豬的生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響的原因。本試驗(yàn)結(jié)果表明，乳酸菌發(fā)酵飼糧對(duì)育肥期豬的生長(zhǎng)性能具有顯著影響，這可能與前期發(fā)酵飼糧對(duì)于腸道微生物區(qū)系的重新建立提供了一定基礎(chǔ)，在豬育肥期表現(xiàn)出正向效果。

3.3 乳酸菌發(fā)酵飼料對(duì)豬肉品質(zhì)的影響 pH直接反映肌肉酸度值，pH影響肌肉滴水損失和色度。一般情況下，正常豬肉的pH為6.0～6.5，PSE豬肉的pH為5.1～5.5。馬青竹（2011）研究結(jié)果表明，飼喂益生菌復(fù)合飼料顯著改善豬肉品質(zhì)，降低滴水損失，增加系水力。李濤（2014）研究結(jié)果表明，乳酸菌發(fā)酵飼料顯著改善育肥期豬的豬肉品質(zhì)。本試驗(yàn)得到類(lèi)似結(jié)果。本試驗(yàn)中，乳酸菌發(fā)酵飼糧顯著提高豬肉亮度值和紅度值，說(shuō)明乳酸菌發(fā)酵飼糧對(duì)肉色有積極改善作用，對(duì)于增加豬肉感官品質(zhì)具有重要作用。

3.4 乳酸菌發(fā)酵飼料對(duì)豬血液抗氧化指標(biāo)的影響 體內(nèi)和體外試驗(yàn)均證明乳酸桿菌的抗氧化作用。王娟娟等（2011）研究結(jié)果表明，仔豬飼喂發(fā)酵飼料可以顯著提高血液抗氧化能力。李濤（2014）研究發(fā)現(xiàn)，飼喂育肥豬乳酸菌發(fā)酵飼料顯著提高血液抗氧化酶活性，降低丙二醛含量。本試驗(yàn)與上述研究結(jié)果保持一致。本試驗(yàn)結(jié)果表明，乳酸菌是通過(guò)提高超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶和谷胱甘肽過(guò)氧化酶活性提高抗氧化能力的。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧經(jīng)過(guò)乳酸菌發(fā)酵可以提高血液抗氧化能力，提高豬的生長(zhǎng)性能，改善肉品質(zhì)。因此，養(yǎng)豬生產(chǎn)實(shí)際中，可以將飼料進(jìn)行乳酸菌固體發(fā)酵飼喂生長(zhǎng)育肥豬，提高生產(chǎn)性能，增加經(jīng)濟(jì)效益。

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