李 俊，吳建國，郭慧慧

（1.山西省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所，山西太原 030032；2.右玉縣農(nóng)業(yè)委員會，山西右玉 037200）

反芻動物的瘤胃發(fā)育情況對飼料消化吸收利用至關重要，促進幼齡反芻動物瘤胃盡早發(fā)育，對于幼齡動物后期生長性能具有重要意義（張海濤等，2008）。研究表明，日糧類型影響瘤胃發(fā)育速率（吳天佑等，2016），固體飼料為瘤胃的正常發(fā)育提供必要的化學刺激和物理刺激，若只給幼齡反芻動物飼喂液體飼料，其瘤胃乳頭不發(fā)育（Heinrichs，2005）。眾多研究已經(jīng)證實，反芻動物飼糧中添加牧草可以促進瘤胃肌層發(fā)育，保持瘤胃上皮組織結構的完整性（馮丹等，2017；翁秀秀等，2013）。然而，僅依靠瘤胃微生物對牧草的消化不能為機體提供足量的揮發(fā)性脂肪酸，而揮發(fā)性脂肪酸對維持瘤胃乳頭發(fā)育是必須的，尤其是丁酸。雖然精飼料含有較多的可發(fā)酵碳水化合物，可以在瘤胃中快速發(fā)酵產(chǎn)生大量的揮發(fā)性脂肪酸，刺激瘤胃乳頭發(fā)育，但谷物飼糧的快速發(fā)酵會引起瘤胃酸中毒或者瘤胃角化不全，對動物機體造成不良影響（Steele等，2011）。目前，幼齡羔羊飼糧中牧草的合適添加水平還沒有定論。確定幼齡羔羊飼糧中牧草的合適添加水平對羔羊斷奶前和斷奶后瘤胃發(fā)育和生長性能的發(fā)揮具有重要意義。因此，本試驗以薩寒雜交一代公羔羊為試驗動物，研究飼糧中添加不同水平的苜蓿對斷奶前后羔羊生長性能和瘤胃發(fā)育的影響，為羔羊飼糧中苜蓿的合適添加數(shù)量提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗時間及地點 本試驗在右玉縣宏宇牧業(yè)有限責任公司進行，試驗時間為2017年4～5月。

1.2 試驗動物及試驗設計 選擇30只平均日齡（21±3）d和平均體重（8.3±1.4）kg的薩寒雜交一代去勢公羔羊，按照年齡和體重相近的原則，采用完全隨機試驗設計，分為3個處理組，每組10只羔羊，每只羔羊為一個重復。對照組飼喂以谷物為基礎的飼糧，其余兩組分別飼喂基礎飼糧+5%的苜蓿干草和基礎飼糧+10%的苜蓿干草。

1.3 試驗飼糧 給試驗羔羊飼喂的開食量為粉狀精料。在粉狀精料的基礎上分別添加5%和10%的苜蓿干草配制試驗開食料。各試驗組飼糧的營養(yǎng)組成見表1。

表1 開食料的組成及營養(yǎng)水平

1.4 飼養(yǎng)管理 試驗開始后，將母羊和羔羊隔離，單籠飼養(yǎng)，羔羊自由采食開食料和飲水。每天上午和下午羔羊和母羊在一起30 min，用于母羊哺乳。同時記錄吮乳前和吮乳后羔羊的體重，用以計算羔羊的吮乳量。每周收集兩次奶樣，用以測定羊奶的干物質(zhì)含量。

1.5 樣品采集及指標測定

1.5.1 飼糧樣品采集及營養(yǎng)成分測定 每周于投料前和羔羊采食后采集飼糧樣品，-20℃保存，用于后續(xù)營養(yǎng)成分測定，測定的營養(yǎng)成分指標包括干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維。飼糧樣品在65℃烘箱中烘干48 h后粉碎過1 mm篩。按照AOAC（1990）的方法測定干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分的含量；按照Van Soest（1991）的方法測定中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維的含量。

1.5.2 羔羊生長性能測定 每天記錄每只羔羊的飼糧供給量和剩料量，計算日采食量。每周于晨飼前測定羔羊體重。

1.5.3 羔羊血液采集及指標測定 試驗開始前和試驗結束后，于晨飼3 h后頸靜脈采集10 mL血液，室溫靜置1 h后，3000 r/min離心 10 min，收集上層血清保存于-20℃冰箱，用于后續(xù)β-羥丁酸、非酯化脂肪酸和葡萄糖含量測定。

1.5.4 羔羊瘤胃組織樣品采集及指標測定 試驗結束后，每組選擇與平均體重相近的6只羔羊用于屠宰，采集瘤胃組織樣品。將采集的瘤胃組織樣品放于10%的福爾馬林溶液中固定，然后經(jīng)不同濃度的酒精逐級脫水和石蠟包埋，制作蠟塊。然后用切片機切成6 μm厚的切片，經(jīng)HE染色，在光學顯微鏡下拍照，然后分析瘤胃組織微觀形態(tài)結構。參考Norouzian等（2011）的方法測定乳頭高度、乳頭寬度、上皮厚度、角質(zhì)層厚度、肌層厚度、瘤胃壁厚度、乳頭密度、表面積比值。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析 所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計均使用SAS 9.2軟件進行分析。使用SAS 9.2的One-Way Analysis 進行生長性能指標、血液生化指標和瘤胃形態(tài)指標的分析，若組間比較差異顯著，則使用Duncan’s法進行多重比較。以P＜0.05為差異顯著，以P＜0.01為差異極顯著。

2 試驗結果

2.1 不同水平苜蓿添加量對羔羊飼糧物理性能的影響 由表2可以看出，羔羊開食料中添加苜蓿增加了開食料的系水力（P＜0.05），降低了開食料的容重（P＜0.05），其中5%和10%苜蓿添加組的系水力差異顯著（P＜0.05），而容重差異不顯著（P＞0.05）。濱州篩分析開食料的顆粒分布結果表明，苜蓿添加組開食料中物料粒度大于1.18 mm所占的比例高于對照組（P＜0.05），而物料粒度小于1.18 mm所占的比例低于對照組（P＜0.05），其中5%和10%苜蓿添加組差異不顯著（P＞0.05）。同樣苜蓿添加組開食料的物理有效因子和物理有效中性洗滌纖維的含量高于對照組，分別高16.17%和20.00%（P＜0.05）。

2.2 不同水平苜蓿添加量對羔羊生長性能的影響 由表3可以看出，羔羊開食料中添加苜蓿顯著降低了羔羊斷奶前和整個試驗期內(nèi)的日均干物質(zhì)采食量，分別降低了16.31%和8.5%（P＜0.05）。羔羊開食料中添加苜蓿對各生長階段羔羊的體重、平均日增重和料肉比均無顯著影響（P ＞ 0.05）。

表2 不同水平苜蓿添加量對飼糧物理性能的影響

表3 不同水平苜蓿添加量對羔羊生長性能的影響

2.3 不同水平苜蓿添加量對羔羊血液代謝指標的影響 由表4可以看出，羔羊開食料中添加苜蓿對羔羊血液中葡萄糖和非酯化脂肪酸含量無顯著影響（P＞0.05），但顯著降低了血液β-羥丁酸的含量（P＜0.05）。5%和10%添加組羔羊血液的β-羥丁酸含量差異不顯著，比對照組羔羊低35.48%（P＜0.05）。

表4 不同水平苜蓿添加量對羔羊血液生化指標的影響

2.4 不同水平苜蓿添加量對羔羊瘤胃組織形態(tài)結構的影響 由表5可以看出，羔羊開食料中添加苜蓿對羔羊瘤胃角質(zhì)層厚度和肌層厚度均具有顯著影響（P＜0.05）。對照組羔羊的瘤胃角質(zhì)層厚度顯著比苜蓿添加組高19.24%（P＜0.05）。苜蓿添加組羔羊的瘤胃肌層厚度比對照組顯著提高33.00%（P＜0.05）。羔羊開食料中添加苜蓿對羔羊的瘤胃其他形態(tài)結構指標，如乳頭高度、乳頭寬度、上皮厚度、瘤胃壁厚度、乳頭密度和吸收表面積均無顯著影響（P＞0.05）。

表5 不同水平苜蓿添加量對羔羊瘤胃形態(tài)結構的影響

3 討論

3.1 不同水平苜蓿添加量對飼糧物理性能和羔羊生長性能的影響 本試驗結果表明，羔羊開食料中添加5%和10%的苜蓿干草降低了羔羊的干物質(zhì)采食量，與Hill等（2009）的研究結果相似，他們發(fā)現(xiàn)幼齡動物開食料的采食量與干草添加比例呈負相關關系。然而，也有研究表明，幼齡動物補飼苜蓿干草增加了干物質(zhì)采食量（Porter等，2007；Coverdale等，2004）。楊斌（2017）研究發(fā)現(xiàn)，斷奶前湖羊羔羊自由采食苜蓿干草顯著增加了干物質(zhì)采食量。這可能與飼糧中添加干草的量和種類對飼糧容重的影響不同。Teimouri等（2004）研究發(fā)現(xiàn)，干物質(zhì)采食量和瘤胃充盈度與飼糧干草的容重有關。飼糧物料的顆粒度增加會增加飼糧容重，增加瘤胃充盈度，降低食糜通過瘤胃的時間，進而降低采食量（Allen，2000）。本試驗中，羔羊開食料中添加苜蓿對羔羊體重、平均日增重和料肉比均無顯著影響，這與Norouzian等（2011）的研究結果一致。Coverdale等（2004）研究發(fā)現(xiàn)，犢牛飼糧中添加雀麥草干草顯著增加犢牛日增重，這可能是由于試驗中采食量限制方法造成了結果間的差異。

3.2 不同水平苜蓿添加量對羔羊血液代謝指標的影響 Quigley and Bernard（1992）研究發(fā)現(xiàn)，降低飼糧中苜蓿干草的水平可以降低血液β-羥丁酸的濃度，這與改變瘤胃揮發(fā)性脂肪酸濃度、丁酸消化和吸收代謝有關。本試驗得到了類似的試驗結果，開食料中增加苜蓿干草的水平，血液中β-羥丁酸的濃度顯著降低。這可能是由于增加干草的水平后快速可發(fā)酵碳水化合物的含量降低，改變了瘤胃發(fā)酵模式，使β-羥丁酸濃度降低。

3.3 不同水平苜蓿添加量對羔羊瘤胃組織形態(tài)結構的影響 研究表明，碳水化合物發(fā)酵過程中產(chǎn)生的揮發(fā)性脂肪酸影響瘤胃的形態(tài)結構和發(fā)育（Steele等，2009；Coverdale等，2004），快速發(fā)酵碳水化合物產(chǎn)生的大量揮發(fā)性脂肪酸會造成瘤胃角質(zhì)化不全（Heinrichs，2005），影響后續(xù)瘤胃對粗纖維的消化功能。本研究中，羔羊開食料中添加苜蓿干草顯著增加了瘤胃角質(zhì)層和肌層厚度，增加了瘤胃對粗飼料的消化能力，對后續(xù)羔羊的生長性能具有重要意義。這與苜蓿干草對瘤胃壁的物理刺激作用有關。

4 結論

本研究結果表明，羔羊開食料中添加10%的苜蓿干草對羔羊生長性能無不利影響，卻提高了瘤胃壁的角質(zhì)化程度，增加了瘤胃壁肌層厚度，提高了后續(xù)消化粗纖維的能力。因此，羔羊開食料中可以添加10%的苜蓿干草，不會對羔羊健康和生長性能造成不利影響。

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