孫代鵬，郭文潔，鄭從森，張議丹，李琳琳

（沈陽(yáng)工學(xué)院生命工程學(xué)院，遼寧撫順 113122）

在集約化養(yǎng)殖生產(chǎn)中，對(duì)仔豬進(jìn)行早期斷奶是提高企業(yè)經(jīng)濟(jì)效益的重要措施，但仔豬斷奶以后，由于環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)、心理等方面的改變，容易處于應(yīng)激狀態(tài)，表現(xiàn)為食欲下降、高頻腹瀉、生長(zhǎng)遲緩等癥狀，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)造成仔豬死亡，給養(yǎng)殖企業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失（韓劍，2015；Kim等，2012）?？股氐膽?yīng)用對(duì)畜牧業(yè)快速發(fā)展做出了巨大的貢獻(xiàn)，以硫酸黏桿菌素、金霉素等為代表的抗生素具有顯著的抗菌效果，可有效抑制腸道內(nèi)病原菌的生長(zhǎng)和繁殖，減少有害代謝產(chǎn)物的生成，在生產(chǎn)中通常作為添加劑使用，具有防止應(yīng)激、預(yù)防疾病、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)（曹麗萍等，2009；Jindal等，2006）。但畜牧生產(chǎn)中長(zhǎng)期過(guò)量使用抗生素會(huì)帶來(lái)嚴(yán)重的問(wèn)題，不僅會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性、動(dòng)物自身免疫力下降、畜產(chǎn)品抗生素殘留，還會(huì)造成嚴(yán)重的環(huán)境污染，最終危害人類(lèi)健康（Amezcua等，2002；Goforth等，2000）?？股刈鳛榇偕L(zhǎng)添加劑的禁用將成為畜牧生產(chǎn)領(lǐng)域發(fā)展的必然趨勢(shì)。因此，在抗生素禁用的背景下，為了不影響?zhàn)B殖企業(yè)的生產(chǎn)效益，尋找和開(kāi)發(fā)抗生素替代品是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。

植物精油是從植物中萃取的芳香物質(zhì)，其成分復(fù)雜，主要包括萜烯類(lèi)化合物、芳香族化合物、脂肪族化合物、含氮含硫化合物四大類(lèi)物質(zhì)（劉猛，2011）。天然提取的植物精油主要功能物質(zhì)包括肉桂醛、香芹酚、百里香酚等，具有抗菌、抗炎、抗氧化等廣泛的生物學(xué)效應(yīng)（燕磊等，2017；Cobellis等，2016）。有研究表明，保育豬飼料中添加肉桂醛可以取得比金霉素和桿菌肽鋅聯(lián)用更好的應(yīng)用效果，肉桂醛在保育豬日糧中的添加量以600 mg/kg為宜（周明等，2016）。于彩云等（2017）研究表明，在不同能量水平的日糧中添加植物精油可以提高仔豬生產(chǎn)效益，但相對(duì)來(lái)說(shuō)，植物精油對(duì)低能量日糧利用效率的改善更為明顯。

此外，還有大量研究表明，在豬飼料中添加植物精油可以明顯改善飼料轉(zhuǎn)化率，提高豬的生產(chǎn)性能，在養(yǎng)豬行業(yè)中具有很好的應(yīng)用前景（李孟閣等，2016；王亮等，2015；陳如水等，2014）。本試驗(yàn)旨在研究日糧中添加不同劑量的植物精油對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能和免疫功能的影響，并與硫酸黏桿菌素進(jìn)行對(duì)比，探討植物精油替代抗生素的應(yīng)用效果，為抗生素禁用環(huán)境下養(yǎng)殖生產(chǎn)的順利進(jìn)行提供解決方案。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 試驗(yàn)所用的植物精油有效成分為肉桂醛和百里香酚（其中百里香酚含量15%，肉桂醛含量5%），購(gòu)自上海某生物科技有限公司；抗生素（硫酸黏桿菌素）購(gòu)自當(dāng)?shù)貏?dòng)物醫(yī)院。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選取健康、體重接近的25日齡斷奶仔豬150頭（杜×長(zhǎng)×大三元雜交），隨機(jī)分為5組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10頭仔豬。試驗(yàn)設(shè)計(jì)如表1所示，整個(gè)試驗(yàn)為期28 d。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3 試驗(yàn)日糧 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧參照NRC（2012）斷奶仔豬營(yíng)養(yǎng)需進(jìn)行設(shè)計(jì)，采用玉米-豆粕型全價(jià)日糧，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表2。

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.4 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)在標(biāo)準(zhǔn)化全封閉豬舍進(jìn)行，舍內(nèi)溫度第一周保持在28℃左右，此后逐漸下降并穩(wěn)定維持在25℃左右，相對(duì)濕度保持在75%～85%。仔豬飼養(yǎng)于半漏縫地板的豬圈內(nèi)，每個(gè)重復(fù)單獨(dú)一欄，不同處理組的欄位交錯(cuò)分布，以便更好地消除非試驗(yàn)因素的影響。所有試驗(yàn)仔豬均按照豬場(chǎng)的常規(guī)管理程序進(jìn)行免疫驅(qū)蟲(chóng)，試驗(yàn)期間仔豬自由采食和飲水。

1.5 測(cè)定指標(biāo)和方法

1.5.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定 于試驗(yàn)的第1天和第28天早上8：30對(duì)仔豬空腹稱重，計(jì)算平均日增重（ADG）；以欄為單位準(zhǔn)確記錄仔豬的喂料量和余料量，計(jì)算平均日采食量（ADFI）；據(jù)仔豬日增重和采食量計(jì)算料重比。

以欄為單位記錄發(fā)生腹瀉的仔豬頭數(shù)，據(jù)此計(jì)算仔豬腹瀉率。計(jì)算公式為：

腹瀉率/%=腹瀉仔豬頭次/試驗(yàn)仔豬總頭次×100。

1.5.2 免疫功能指標(biāo)測(cè)定 試驗(yàn)第28天早上8：30，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取2頭斷奶仔豬進(jìn)行前腔靜脈采血，采集的血液分裝于真空促凝管中。促凝管室溫靜置30 min后，經(jīng)3000×g離心15 min制得血清，將血清分裝于1.5 mL離心管中，-20℃保存以待測(cè)定。

血清中總蛋白（TP）采用雙縮脲法進(jìn)行測(cè)定，白蛋白（ALB）采用溴甲酚綠法進(jìn)行測(cè)定，免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM），以及補(bǔ)體C3和C4均采用豬ELISA試劑盒進(jìn)行測(cè)定。

1.6 數(shù)據(jù)處理與分析 所有數(shù)據(jù)先經(jīng)過(guò)Excel 2016進(jìn)行初步整理后，采用SPSS 22.0軟件中的One-way ANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，多重比較采用Duncan’s檢驗(yàn)，P＜0.05為差異顯著，P＜0.10為有顯著性趨勢(shì)。

2 結(jié)果

2.1 植物精油對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響 由表3可以看出，與對(duì)照組相比，抗生素組和3個(gè)試驗(yàn)組均顯著提高斷奶仔豬的末重（P＜0.05）。試驗(yàn)期間斷奶仔豬的平均日增重隨植物精油添加量的增加不斷提高，均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），但50 mg/kg和100 mg/kg植物精油添加組的平均日增重顯著低于抗生素組（P＜0.05），150 mg/kg植物精油添加組已接近抗生素的添加效果，兩組平均日增重?zé)o顯著性差異（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，日糧中添加抗生素和植物精油均能顯著提高斷奶仔豬的平均日采食量（P＜0.05），但50 mg/kg和100 mg/kg植物精油添加組的平均日采食量顯著低于抗生素組（P＜0.05），150 mg/kg植物精油添加組的平均日采食量與抗生素組相比無(wú)顯著性差異（P＞0.05）?？股亟M、100 mg/kg和150 mg/kg植物精油添加組與對(duì)照組相比有降低斷奶仔豬低料重比的趨勢(shì)（P=0.085）；此外，與對(duì)照組相比，抗生素組和3個(gè)試驗(yàn)組均有降低斷奶仔豬腹瀉率的趨勢(shì)（P=0.072），但未達(dá)到顯著性差異（P＞0.05）。

2.2 植物精油對(duì)斷奶仔豬免疫功能的影響 由表4可知，日糧中添加抗生素和植物精油可顯著提高血清中總蛋白水平（P＜0.05），其中，抗生素組血清總蛋白水平顯著高于50 mg/kg和150 mg/kg植物精油添加組（P＜0.05），但與100 mg/kg植物精油添加組相比無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，抗生素組和3個(gè)試驗(yàn)組均顯著提高了斷奶仔豬血清中白蛋白水平（P＜0.05），150 mg/kg植物精油添加組血清中白蛋白水平顯著高于抗生素組和其他兩個(gè)植物精油添加水平組（P＜0.05）。斷奶仔豬血清中IgA水平以150 mg/kg植物精油添加組為最高，顯著高于其他各處理組（P＜0.05）；與對(duì)照組相比，抗生素組和3個(gè)試驗(yàn)組均顯著提高斷奶仔豬血清中IgG水平（P＜0.05），其中以150 mg/kg植物精油添加組血清中IgG水平最高，顯著高于其他各處理組（P＜0.05）；但斷奶仔豬血清中IgM水平在各個(gè)處理組之間沒(méi)有顯著性差異（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，日糧中添加抗生素和植物精油還可以顯著提高血清中補(bǔ)體C3和C4水平（P＜0.05）。

3 討論

仔豬斷奶以后，從吸食高能高蛋白且容易消化的液體母乳轉(zhuǎn)向自主采食原料質(zhì)量、養(yǎng)分可消化性并不確定的固體飼料，將面臨諸多挑戰(zhàn)：一是仔豬在斷奶時(shí)各種消化酶分泌不足且活性較低，難以充分消化飼料中的各種養(yǎng)分；二是仔豬斷奶時(shí)免疫系統(tǒng)發(fā)育還不完善，容易受到外來(lái)病原菌和病毒的感染；三是仔豬斷奶時(shí)消化道的發(fā)育并不完善，飼料中的抗原物質(zhì)可能會(huì)引起嚴(yán)重的過(guò)敏反應(yīng)，造成仔豬持續(xù)腹瀉，嚴(yán)重影響生長(zhǎng)（陳云等，2015；劉猛，2011）。在仔豬飼料中添加抗生素，如硫酸黏桿菌素可以有效殺滅腸道病原菌，改善仔豬腹瀉狀況，提高飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用效率，促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)（尹富貴等，2007）。研究表明，植物精油的某些成分，如百里香酚、肉桂醛、香芹酚等也具有顯著的殺菌效果，可以有效抑制腸道中有害病菌的生長(zhǎng)和繁殖，平衡腸道微生物菌群，促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)（Ouwehand等，2010）。方熱軍等（2010）研究表明，日糧中添加適量植物精油（100 g/t）可以改善仔豬生產(chǎn)性能，顯著提高抗氧化能力；Huang等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，以復(fù)合植物精油（主要成分是香芹酚、肉桂醛和百里香酚）替代斷奶仔豬日糧中的泰樂(lè)菌素后仔豬生產(chǎn)性能沒(méi)有受到影響。在本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，日糧中添加抗生素和植物精油均能顯著改善斷奶仔豬的生產(chǎn)性能，且150 mg/kg添加量的植物精油不論是在平均日增重、平均日采食量，還是在料重比和腹瀉率上都已達(dá)到或接近硫酸黏桿菌素的添加效果，顯示出良好的替抗前景。

表3 植物精油對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

表4 植物精油對(duì)斷奶仔豬免疫功能的影響

血清中總蛋白水平反映動(dòng)物體內(nèi)的蛋白質(zhì)吸收代謝情況，而白蛋白屬于球蛋白的一種，在體內(nèi)起到維持血漿滲透壓和作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)載體，具有十分重要的生理意義（方秋紅等，2014）。在本試驗(yàn)中，日糧中添加抗生素和植物精油都可以顯著提高斷奶仔豬血清中總蛋白和白蛋白水平，說(shuō)明植物精油和抗生素一樣，可以有效改善仔豬蛋白質(zhì)代謝情況。免疫球蛋白是動(dòng)物體內(nèi)體液免疫應(yīng)答的主要信號(hào)分子，由B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生如IgA、IgG、IgM等來(lái)發(fā)揮功能。本研究表明，日糧中添加抗生素和植物精油可以顯著提高斷奶仔豬血清中IgA和IgG水平，150 mg/kg添加量的植物精油對(duì)IgA和IgG水平的提高甚至要優(yōu)于硫酸黏桿菌素，但對(duì)IgM水平無(wú)顯著性影響，這與張強(qiáng)等（2012）的研究結(jié)果一致。補(bǔ)體是動(dòng)物機(jī)體特異性免疫的主要組成部分，協(xié)助抗體吞噬病原菌，參與機(jī)體保護(hù)性的免疫應(yīng)答（程學(xué)慧等，2001）。本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，抗生素和植物精油都可以顯著提高斷奶仔豬血清中補(bǔ)體C3和C4水平，說(shuō)明添加抗生素和植物精油對(duì)于機(jī)體的免疫功能都具有增強(qiáng)作用。

4 小結(jié)

綜上所述，日糧添加抗生素或是植物精油都可以顯著改善斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能和免疫功能，硫酸黏桿菌素的添加效果要優(yōu)于50、100 mg/kg添加量的植物精油，但150 mg/kg添加量的植物精油已經(jīng)可以維持與50 mg/kg硫酸黏桿菌素相當(dāng)?shù)拇偕L(zhǎng)效果，說(shuō)明合適劑量的植物精油具有良好的抗生素替代前景。

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