陸燕珍 黃誠(chéng)花 石祺淇

地中海貧血屬于常染色體隱性遺傳性疾病, 一般分為型地中海貧血和β型地中海貧血, 其中, β型地中海貧血又分為β0型和β+型［1,2］。臨床經(jīng)過(guò)研究發(fā)現(xiàn), β地中海貧血的發(fā)病機(jī)制為人類的β珠蛋白基因存在缺陷, 導(dǎo)致β珠蛋白合成發(fā)生缺失或者減少, 且流行病學(xué)資料中顯示, 地中海貧血患者的不同基因型與表型之間存在密切的關(guān)聯(lián), 且突變頻率存在明顯的差異［3］。本次研究主要分析并探討了7歲以下β地中海貧血患兒中不同基因型以及表型之間存在的密切關(guān)聯(lián)性?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本次研究選取了本院2016年10月～2017年10月收治的155例β地中海貧血患兒作為研究對(duì)象, 其中男89例, 女66例；年齡0～7歲, 平均年齡(3.21±1.27)歲；民族包括漢族83例、壯族51例、其他民族21例。所有患兒家長(zhǎng)均已經(jīng)直銷本次實(shí)驗(yàn)局限性、風(fēng)險(xiǎn)性, 且已經(jīng)簽署知情同意書。

1.2 方法 對(duì)本次研究所選取的155例患兒進(jìn)行外周血細(xì)胞檢測(cè)和血清鐵蛋白測(cè)定。外周血細(xì)胞檢測(cè)主要采用日本SYSMES公司生產(chǎn)的SE2100型全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行常規(guī)血液學(xué)分析；血清鐵蛋白測(cè)定主要利用電化學(xué)發(fā)光免疫法, 操作過(guò)程完全遵照用于測(cè)試的試劑盒說(shuō)明書。所有患兒經(jīng)過(guò)外周血細(xì)胞檢測(cè)和血清鐵蛋白測(cè)定后, MCH＜27 pg、MCV＜80 fl、鐵蛋白＞12 μg/L的患兒采用Sebia或者高效液相色譜技術(shù)進(jìn)行血紅蛋白組分析。所有分析過(guò)程均完全按照說(shuō)明書操作, 若常規(guī)基因并不能夠?qū)ξ粗蛔兓蛘呷笔нM(jìn)行檢測(cè), 則采用多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)(MLPA)法或者直接測(cè)序進(jìn)行檢測(cè)。

2 結(jié)果

本次研究中, 7歲以下的β地中海貧血患兒中, 基因型主要包括 CD17(A-T)、CD14-15、CD27-28、CD29、CD41-42(-TTCT)、CD43(G-T)、CD71-72(+A)、IVSII-654(C-T)、IVSI-I(G-T)、NT-28(A-G)、βE, 表型主要有β0和β+兩種。在不同基因型中最常見(jiàn)的突變類型為CD41-42(-TTCT), 其次為CD17(A-T), 突變率分別為47.10%和28.39%。見(jiàn)表1。

表1 7歲以下β地中海貧血患兒不同基因型和表型情況分析(n, %)

3 討論

地中海貧血即珠蛋白生成障礙性貧血, 又被稱為海洋性貧血, 屬于遺傳性溶血性貧血疾病。該疾病緣于多樣且復(fù)雜的基因缺陷, 導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)缺乏的珠蛋白鏈數(shù)量、類型、臨床癥狀均存在比較大的變異性。地中海貧血在我國(guó)分布最廣的地區(qū)為廣東、廣西和四川, 北方則比較少見(jiàn)。β地中海貧血(β珠蛋白生成障礙性貧血)具有相當(dāng)復(fù)雜的分子病理, 目前已知的β基因突變已經(jīng)有100種以上, 均主要由于基因的點(diǎn)突變, 其中少數(shù)由于基因的缺失［4］。

β地中海貧血患兒在接受檢查時(shí)需要按照病情輕重分為輕型、中間型和重型。曾祥興等［5］在其研究當(dāng)中表示,輕型的β地中海貧血患兒會(huì)發(fā)生成熟的紅細(xì)胞輕度形態(tài)改變, 紅細(xì)胞的滲透脆性一般表現(xiàn)為正?；蛘呓档? 血紅蛋白檢測(cè)中顯示血紅蛋白(Hb)A2的含量會(huì)增高, 但是HbF的含量正常；中間型的β地中海貧血患兒會(huì)發(fā)生外周血象和骨髓象的改變, 紅細(xì)胞的滲透脆性則會(huì)降低, 血紅蛋白檢測(cè)中顯示HbF的含量處于正常水平或者發(fā)生增高；重型的β地中海貧血患兒的外周血象會(huì)呈現(xiàn)出小細(xì)胞低色素性的貧血,紅細(xì)胞的大小并不一致, 甚至?xí)霈F(xiàn)靶型、異型、碎片、有核、點(diǎn)彩等, 網(wǎng)織紅細(xì)胞則處于正常水平或升高, 紅細(xì)胞的滲透脆性發(fā)生比較明顯的降低, 血紅蛋白檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)HbF的含量發(fā)生了明顯的增高。李嵐等［6］的研究中發(fā)現(xiàn), β地中海貧血患兒的不同基因型和不同地中海表型之間存在一定關(guān)聯(lián)性, 且該關(guān)聯(lián)性比較復(fù)雜, 必須要通過(guò)患兒的臨床疾病特點(diǎn)以及比較常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室血液學(xué)檢查進(jìn)行判斷。本次研究中在簡(jiǎn)單分析7歲以下β地中海貧血患兒不同基因型和表型的關(guān)聯(lián)時(shí)便采用了外周血細(xì)胞檢測(cè)和血清鐵蛋白測(cè)定, 最終發(fā)現(xiàn)7歲以下β地中海貧血患兒的β0和β+表型中CD41-42(-TTCT)和CD17(A-T)基因型的發(fā)病率比較高。除了上述相關(guān)研究以外, 地中海貧血患兒中亦存在少見(jiàn)類型以及多種類型相互重疊所導(dǎo)致的復(fù)雜復(fù)合體情況, 僅憑借常規(guī)的血液學(xué)并不能夠準(zhǔn)確的診斷, 因此必須要做好進(jìn)一步診斷與臨床遺傳咨詢。此時(shí)主要手段可以包括遺傳學(xué)檢查和分子生物學(xué)檢查等, 注意要將地中海貧血與傳感性肝炎、肝硬化、缺鐵性貧血等疾病進(jìn)行準(zhǔn)確且有效的鑒別, 以便進(jìn)一步為地中海貧血患兒制定具體可行的治療方案。

［1］ 宋兆靜, 潘紅飛, 黃肯, 等.Hb Westmead復(fù)合輕型β地中海貧血的血液學(xué)表型和基因型分析.右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2017,39(1):40-42.

［2］ 顏綿生, 淦鑫, 劉敏, 等.廣州地區(qū)23例 Hb Westmead 異常血紅蛋白復(fù)合β-地中海貧血患者的血液學(xué)和基因型分析.中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志, 2016, 33(5):598-601.

［3］ 王春芳, 韋傳東, 雷茗, 等.Gγ+(Aγδβ)0地中海貧血復(fù)合β地中海貧血家系的表型與基因型分析的警示.中國(guó)兒童保健雜志, 2015, 23(11):1191-1193.

［4］ 李高馳, 李思慧, 曹憲振, 等.7歲以下地中海貧血患兒血液學(xué)表型的研究.廣東醫(yī)學(xué), 2017, 38(18):2817-2818.

［5］ 曾祥興, 劉惠敏, 廖悅余, 等.廣東河源客家人群αβ復(fù)合型地中海貧血基因型和表現(xiàn)型分析.國(guó)際遺傳學(xué)雜志, 2017, 40(3):113-116.

［6］ 李嵐, 翁彬, 孟慶寶.重型β地中海貧血患者突變基因及同種血型抗體頻率調(diào)查.中國(guó)輸血雜志, 2016, 29(3):284-287.