牟致平，梁瑩瑩，張淑君，馬秉智，劉 曉，赫 軍

（中日友好醫(yī)院 藥學部，北京 100029）

補骨脂酊為中日友好醫(yī)院院內制劑，是由補骨脂加工制成的酊劑，主要指標成分為補骨脂素和異補骨脂素。外用補骨脂酊可增加皮膚對紫外線的敏感性，促進黑色素的生化合成和轉運，對白癜風治療效果明顯[1，2]。同時補骨脂酊可活血化瘀，促進局部血液循環(huán)，營養(yǎng)毛發(fā)，治療斑禿、牛皮癬等疾病[3]。我院補骨脂酊在臨床上使用多年，療效顯著，臨床醫(yī)師與患者對其評價良好。本著保障醫(yī)院制劑質量的原則，根據《醫(yī)療機構制劑注冊管理辦法》相關要求，本研究參照《北京市醫(yī)療機構劑制規(guī)程》2014年（征求意見版）等質量控制方法[4～6]，對留樣觀察的3批樣品進行定性鑒別和指標成分的含量測定考察，為我院補骨脂酊生產及臨床用藥提供參考。

1 儀器與試劑

Agilent 1260 series型高效液相色譜儀，CPA225D電子天平（德國賽多利斯儀器系統有限公司），KQ-300DE型數控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。硅膠G薄層板（青島海洋化工廠）。補骨脂酊為中日友好醫(yī)院中藥制劑室自制，規(guī)格為 100ml/瓶，批號分別為：20170214、20170628、20170801；補骨脂素、異補骨脂素為對照藥材，均購自中國藥品生物制品檢定所，批號分別為：110739-201617、110738-201614。試驗中所用甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

圖1 薄層色譜圖

2 方法與結果

2.1 定性鑒別[4]

取補骨脂素、異補骨脂素對照品，加乙酸乙酯制成每1ml各含2mg的混合溶液，作為對照品溶液，另取本品作為供試品溶液。照薄層色譜法實驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正乙烷-乙酸乙酯（4：1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%氫氧化鉀甲醇溶液，置紫外燈（365nm）下檢視。供試品色譜在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，見圖1。

2.2 含量測定[6]

2.2.1 色譜條件色譜柱

為 Symmetry C18 （4.6×250mm）； 流動相為甲醇-水（50：50，V/V），流速為 1.0ml/min，檢測波長為 246nm，帶寬為 4nm，柱溫為 40℃，進樣量為 10μl。

2.2.2 溶液的制備

（1）對照品溶液的制備。精密稱取補骨脂素、異補骨脂素對照品適量，加甲醇溶解，得濃度分別為0.1100mg/ml、0.1176mg/ml的補骨脂素、異補骨脂素對照品儲備液。分別從上述對照品儲備液精密量取10ml置50ml容量瓶中，加甲醇至刻度即得濃度為 22.0000μg/ml、23.5200μg/ml的補骨脂素、異補骨脂素對照品溶液。（2）供試品溶液的制備。取供試品5ml，置于100ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.3 系統適應性試驗

取“2.2.2”項下對照品溶液、供試品溶液各 10μl，按照“2.2.1”項下方法進樣測定。在相應保留時間上，供試品色譜與對照品色譜有相同的色譜峰。理論板數以補骨脂峰計應不少于3000，且補骨脂素、異補骨脂素分離度＞1.5，見圖2。

2.2.4 含量測定

按外標法以峰面積計算含量，3個批次補骨脂酊中補骨脂素和異補骨脂素的總含量見表1。

表1 樣品含量測定結果（mg/ml，n=3）

圖2 高效液相色譜圖

3 討論

目前我院補骨脂酊質控執(zhí)行的是《北京市醫(yī)療機構制劑規(guī)程》1984年版的規(guī)定，距今已有30余年，該標準中沒有含量測定檢查項，然而其唯一的原料藥補骨脂的指標成分明確，補骨脂素和異補骨脂素的含量直接影響制劑的有效性[7]，因此本文采用HPLC方法對3批樣品進行含量測定。文獻中對該成分的規(guī)定為每1ml補骨脂酊中含補骨脂素和異補骨脂素的總量須≥1.2mg[5，6]，結合中國藥典中對補骨脂的含量限度要求及3批樣品的測定結果[8]，暫定我院自制制劑補骨脂酊含量檢測限度要求為每1ml補骨脂酊含補骨脂素和異補骨脂素總量≥1.2mg。

通過本次質量考察可以得出，我院補骨脂酊符合現行相關質量標準，且通過本次研究制定出高于現行質量標準的內部控制標準，為生產穩(wěn)定有效的醫(yī)院制劑提供了依據，以保證自制制劑的有效性。

[1]朱小蘭，盛國榮，楊永美.補骨脂酊對實驗性白癜風模型的影響[J].中藥藥理與臨床，2014，30（6）：115-117.

[2]王曉燕，呂月桂，張麗.外用補骨脂酊聯合窄譜中波紫外線治療白癜風的臨床觀察及護理干預[J].中國醫(yī)藥導報，2016，13（14）：146-149.

[3]李恒，程孝頂，劉蘭.綜合治療法治療斑禿39例臨床觀察[J].中醫(yī)藥導報，2013，2：74-75.

[4]北京市食品藥品監(jiān)督管理局.北京市醫(yī)療機構制劑規(guī)程（征求意見版）[M].北京：中國商業(yè)出版社，2014.9-10.

[5]解放軍總后勤部衛(wèi)生部.中國人民解放軍醫(yī)療機構制劑規(guī)范[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2002.279-280.

[6]徐蘭，陶曉璇，王丹輝.補骨脂酊質量標準的建立[J].中國藥師，2015，2：329-331.

[7]曹金一，劉京晶，黃文華.補骨脂藥理作用與臨床應用研究進展 [J].中藥藥理與臨床，2008，24（6）：89-92.

[8]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.305.