謝曉燕

[摘要] 目的 探討目標教學法對金銀花提取物中綠原酸含量測定質(zhì)量的影響，為綠原酸的測定提供理論依據(jù)。方法 選取2015年6月—2016 年6月以及選取2016 年7月—2017年7月在該院實習的實習生各12名，其中前者采取常規(guī)教學法，稱之為對照組，后者采取目標教學法稱之為觀察組，對比兩組金銀花提取物中綠原酸含量的測定值、檢測方法的穩(wěn)定性、精密度等結果。結果 經(jīng)過目標教學法后，考試成績觀察組為（96.81±2.85）分，對照組（72.21±8.94）分，研究組成績明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。觀察組測得金銀花提取物中綠原酸的含量明顯高于對照組，含量分別為24.1%和21.8%，精密度、加樣回收率、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性等結果均好于對照組。經(jīng)比較，結果差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結論 通過目標教學法后，金銀花提取物中綠原酸的測定方法準確可靠，操作簡單，值得推廣。

[關鍵詞] 金銀花提取物；綠原酸；含量測定；目標教學；穩(wěn)定性

[中圖分類號] R95 [文獻標識碼] A [文章編號] 1672-5654（2018）01（b）-0115-02

金銀花具有清熱解毒，涼散風熱等功效，用于癰腫疔瘡，丹毒，喉痹，熱毒血痢，溫病發(fā)熱，風熱感冒等癥[1]。綠原酸是金銀花中的有效成分之一，具有廣泛的生物活性，如抗病毒、抗菌、保肝利膽、增高白血球、抗腫瘤、降血脂、降血壓、興奮中樞神經(jīng)、清除自由基等。綠原酸具有廣泛的抗菌作用，但是在體內(nèi)會被蛋白質(zhì)滅活，口服或者腹腔注射后，可以興奮大鼠中樞神經(jīng)，增加大鼠小腸蠕動及子宮張力，增進大鼠膽汁分泌，對人體有致敏作用，可以誘發(fā)皮炎、氣喘等疾病[2]。中國藥典規(guī)定，金銀花干燥品中，綠原酸含量不得少于1.5%[3]，該文選取2015年6月—2016 年6月及選取2016 年7月—2017年7月，實習生12名研究目標教學法對金銀花提取物中綠原酸含量測定質(zhì)量的影響，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取在該院實習的實習生各12名，其中前者采取常規(guī)教學法，稱之為對照組，后者采取目標教學法稱之為觀察組。

1.2 樣品及藥材

該文選用的金銀花購買于中藥大市場，自制金銀花提取物；綠原酸對照品購買于中國藥品生物制品檢定所。

1.3 試劑及儀器

試劑：色譜純乙腈；分析純甲醇、乙醇；磷酸鹽緩沖液等；儀器：pHS-3C型pH計；Sartorius 1 712型1/10萬電子分析天平；Agilent 1 100 LC；中藥煎藥機；RZ-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；SHB-B循環(huán)水式多用真空泵等。

1.4 方法

1.4.1 金銀花提取 取金銀花500 g，干燥，粉碎，在70℃條件下，用8倍量的60%乙醇加熱回流提取3次，2 h/次，過濾，合并提取液，減壓回收乙醇，干燥，得金銀花提取物，平均分為對照組和觀察組兩組，用于綠原酸含量的測定。

1.4.2 兩種教學方法對綠原酸含量的質(zhì)量影響 （1）對照組采取常規(guī)教學法。對照組采取常規(guī)教學法講解金銀花提取物高效液相色譜法進行測定，色譜條件：C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流動相：乙腈-0.4%磷酸溶液（20：80），流速：1 mL/min，柱溫：30℃，檢測波長：327 nm。

（2）觀察組采取目標教學法。觀察組在對照組的基礎上采取目標教學法，突出測定質(zhì)量達到的目標，具體方法如下。①測定用玻璃器皿處理。實驗用的所有玻璃器皿均用洗滌劑清洗，再用水沖洗3遍，之后用稀硫酸浸泡過夜，水沖洗3遍，最后用去離子水沖洗，干燥備用。②樣品處理。實驗過程中樣品的前處理非常重要，如金銀花要完全干燥后再進行稱重；金銀花粉末不宜過細；提取溫度不能過高，否則會破壞有效成分；回收乙醇溫度不可太高；濃縮時溫度不能過高，當溶液變稠時要注意不要糊化。③空白實驗的設置。影響實驗結果的因素很多，實驗用水的質(zhì)量、試劑的純度、實驗操作是否規(guī)范，器皿的潔凈程度等均可造成檢測結果不準確，因此要嚴格控制，減少系統(tǒng)誤差。④回收實驗?；厥諏嶒灥暮脡?，決定了樣品含量是否在可控范圍內(nèi)。在同樣條件下進行測定，如果標準參考物質(zhì)的測定值在標準范圍內(nèi)，則樣品的檢測結果即為可靠，否則，要查找原因，重新測定。⑤標準品的選擇。實驗用標準品要購買正規(guī)廠家生產(chǎn)的標準品，要標有確切數(shù)值，對于不確定的標準品，不可使用。⑥ 平行樣的測定。樣品取樣時稱量不可太少，一般在1～2 g，平行樣檢測結果是否合格，依據(jù)兩次獨立測定樣品測定結果相對偏差值而定，如果偏差值超出范圍，要重復測定直至結果合格為止。

1.5 統(tǒng)計方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計學軟件對研究結果進行統(tǒng)計學分析，計量資料用（x±s）表示，并用t檢驗，計數(shù)資料用百分率表示，并用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

1.6 判定標準

①臨床實習教學結束時，對所有學生進行考試，試卷滿分100分，比較兩組學生的教學效果；②含量值：綠原酸檢測含量越高，表明檢測方法越有效，靈敏度越高；精密度RSD值：RSD值越小，表明檢測方法精密度越好；加樣回收率RSD值：RSD值越小，表明檢測方法準確度越好；重現(xiàn)性RSD值：RSD值越小，表明檢測方法重現(xiàn)性越好；穩(wěn)定性RSD值：RSD值越小，表明檢測方法的穩(wěn)定性越好[4]。

2 結果

2.1 兩組教學前后考試成績比較

考試成績觀察組為（96.81±2.85）分，對照組（72.21±8.94）分，研究組結果明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2 兩組實習生檢測結果比較

觀察組測得金銀花提取物中綠原酸的含量明顯高于對照組，含量分別為24.1%和21.8%，精密度、加樣回收率、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性等結果均好于對照組。經(jīng)比較，結果差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

金銀花，又稱雙花、二花、銀花等，為忍冬科植物忍冬、紅腺忍冬、山銀花或毛花柱忍冬的干燥花蕾或帶初開的花，夏初開放前采收，干燥既得。金銀花呈棒狀，上粗下細，略有彎曲，長約2 cm，表面黃白色或綠白色，密被短絨毛；花萼綠色，先端5裂，裂片有絨毛，長約2 mm；花冠筒狀，先端二唇形，雄蕊5，附著于筒壁，黃色，雌蕊1，子房無毛；氣清香，味淡、微苦。金銀花具有清熱解毒，涼散風熱等功效，用于癰腫疔瘡，丹毒，喉痹，熱毒血痢，溫病發(fā)熱，風熱感冒等癥[5]。

綠原酸，又稱氯原酸、咖啡鞣酸、1，3，4，5-四羥基環(huán)己烷羧酸-（3，4-二羥基肉桂酸酯）等，是金銀花中的有效成分之一，具有廣泛的生物活性，如抗病毒、抗菌、保肝利膽、增高白血球、抗腫瘤、降血脂、降血壓、興奮中樞神經(jīng)、清除自由基等。綠原酸具有廣泛的抗菌作用，但是在體內(nèi)會被蛋白質(zhì)滅活，口服或者腹腔注射后，可以興奮大鼠中樞神經(jīng)，增加大鼠小腸蠕動及子宮張力，增進大鼠膽汁分泌，對人體有致敏作用，可以誘發(fā)皮炎、氣喘等疾病。氯原酸半水合物為針狀結晶，在110 ℃時變?yōu)闊o水化合物，熔點 208 ℃，在25 ℃的水中溶解度為 4%，熱水中溶解度更大；易溶于乙醇、丙酮，極微溶于乙酸乙酯，難溶于乙醚、三氯甲烷、苯等親脂性有機溶劑。

研究結果顯示，經(jīng)過目標教學法后，考試成績觀察組為（96.81±2.85）分，對照組（72.21±8.94）分（P<0.05），研究組成績明顯高于對照組，差異存在顯著性，觀察組測得金銀花提取物中綠原酸的含量明顯高于對照組，含量分別為24.1%和21.8%，精密度、加樣回收率、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性等的RSD值結果均好于對照組。經(jīng)比較，結果差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

金銀花為常用藥材之一，藥用歷史悠久，近年來隨著經(jīng)濟的發(fā)展和醫(yī)療事業(yè)的進步，金銀花逐漸成為了研究的熱點。金銀花中的主要有效成分為綠原酸，綠原酸為苯丙素類化合物，易溶于乙醇、丙酮、熱水，具有抗菌抗病毒等活性。通過目標教學法后，金銀花提取物中綠原酸的測定方法準確可靠，操作簡單，值得推廣。

[參考文獻]

[1] 買凌燕.山銀花不同炮制品中綠原酸含量測定[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2017，13（6）：23.

[2] 范婉思.高效液相色譜法測定復方金銀花顆粒中綠原酸的含量[J].中國藥物經(jīng)濟學，2017，12（2）：22.

[3] 劉開萍.蜘蛛香中綠原酸及總酚酸的含量測定[J].湖北農(nóng)業(yè)科學，2017，56（2）：288.

[4] 周惠燕.金銀花提取物中綠原酸含量測定[J].中國中醫(yī)藥信息雜志，2011，18（11）：61.

[5] 林以寧.金銀花-連翹配伍比例對有效成分溶出和大鼠體內(nèi)藥動學的影響[J].中國實驗方劑學雜志，2013，19（17）：180.（收稿日期：2017-10-19）