王亮 張高生 劉安寧 陳利靈 王亞蘭 印章

近些年來，隨著經(jīng)濟(jì)高速發(fā)展和工業(yè)化的加速進(jìn)程、人民生活水平提高、人口老年化和生活方式的改變，糖尿病患病率呈顯著上升趨勢(shì)，成為繼腫瘤、心腦血管疾病之后的另外一個(gè)嚴(yán)重危害人民健康的慢性非傳染性疾病，2010年在全國范圍內(nèi)開展的一項(xiàng)采用美國糖尿病學(xué)會(huì)（ADA）的診斷標(biāo)準(zhǔn)，即對(duì)血糖和糖化血紅蛋白（glycosylated hemoglobin，HbA1c）進(jìn)行糖尿病聯(lián)合診斷標(biāo)準(zhǔn)的流行病學(xué)調(diào)查，結(jié)果顯示我國成人中糖尿病患病率為11.6%，患病人群中2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）占90%以上[1]。冠心?。╟oronary heart disease，CHD）是T2DM主要大血管并發(fā)癥，T2DM合并CHD是糖尿病患者死亡的主要原因。蛋白酪氨酸磷酸酶 1B（protein tyrosine phosphatase 1B，PTP1B）是一種非跨膜性磷酸酶，主要調(diào)控細(xì)胞的生長代謝、基因轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞遷移、免疫應(yīng)答等，目前認(rèn)為PTP1B與腫瘤明顯相關(guān)，在多種腫瘤中存在異常表達(dá)[2]。PTP1B與T2DM合并CHD的關(guān)系尚未見報(bào)道，本研究檢測(cè)PTP1B在T2DM及T2DM合并CHD患者外周血中的表達(dá)水平，探討其相互之間的關(guān)系為臨床治療提供理論依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年10月-2016年9月在長江大學(xué)附屬醫(yī)院仙桃市第一人民醫(yī)院內(nèi)分泌科及心血管內(nèi)科病房新診斷和既往確診的2型糖尿病患者92例，其中男44例，女48例。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有入選患者均符合1999年世界衛(wèi)生組織（WHO）的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，合并冠心病患者均符合2007年我國《慢性穩(wěn)定型心絞痛診斷與治療指南》診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影證實(shí)至少有一支冠狀動(dòng)脈內(nèi)徑狹窄≥50%，對(duì)發(fā)病年齡較輕、癥狀明顯的患者需行胰島素自身抗體（insulin autoantibody，IAA）、胰島細(xì)胞自身抗體（isletcell autoantibodies，ICA）、谷氨酸脫羧酶抗體（glutamicacid decarboxylaseantibody，GAD-Ab）檢測(cè)排除1型糖尿病。排除標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均排除糖尿病急性并發(fā)癥、腫瘤、感染、自身免疫性疾病、特殊類型糖尿病、肝腎功能損害等嚴(yán)重其他系統(tǒng)疾病及近3個(gè)月使用胰島素者。其中，單純糖尿病患者50例（DM組），2型糖尿病合并冠心病患者42例（DM+CHD組）。另選同期來自本院行健康體檢的38例健康體檢者設(shè)為對(duì)照組（NC組）。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者均無糖尿病家族史，近期無感染史及胸悶等心絞痛臨床表現(xiàn)，空腹血糖＜6.1 mmol/L，75 g口服葡萄糖耐量試驗(yàn)（OGTT）2 h血糖 ＜7.8 mmol/L，HbA1c（4.02±1.17）%，心電圖檢查無異常。排除標(biāo)準(zhǔn)：患者均排除腫瘤、肝腎疾病、脂代謝疾病，心血管疾病及內(nèi)分泌疾病等其他系統(tǒng)疾病。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后，所有受試者均簽署知情同意書。

1.2 方法 受試者采血前1 d禁食高脂飲食，禁食12 h后，于第2天清晨空腹采集肘靜脈血，檢測(cè)空腹血糖（FPG）、饅頭餐后 2 h 血糖（2 h PG）、HbA1c、空腹胰島素（FINS）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG），血生化采用本院檢驗(yàn)科美國Beckman Coulter公司AU5800型全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)，HbA1c測(cè)定采用高壓液相法，試劑盒購自美國Bio-Rad公司，F(xiàn)INS測(cè)定采用放射免疫法，試劑盒采用中國原子能科學(xué)研究院藥盒。其中5 mL室溫靜置 2 h 后以 1 500 r/min 離心 10 min 取上清液置于-40 ℃冰箱低溫保存待檢，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）以同一批號(hào)試劑檢測(cè)血清中PTP1B水平，PTP1B ELISA試劑盒購自美國R&D公司，按試劑盒說明書操作。由專人測(cè)量身高、體重，計(jì)算體質(zhì)指數(shù)（body mass index，BMI），BMI計(jì)算公式為體重（kg）/身高（m2）。以穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)（homeostasis model assessment for insulin resistance，HOMA-IR）評(píng)價(jià)胰島素抵抗，HOMA-IR=FPG×FINS/22.5。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以（±s）表示，兩兩比較采用t檢驗(yàn)，多組間差異比較采用方差分析，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用 字2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組的基線資料比較 DM組男21例，女29例； 年 齡 38～71歲， 平 均（53.6±10.1） 歲。DM+CHD組男23例，女19例；年齡41～69歲，平均（57.4±9.8）歲。NC組男17例，女21例；年齡43～64歲，平均（54.2±8.7）歲。三組間性別、年齡一般資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

2.2 三組間各項(xiàng)臨床指標(biāo)的比較 DM組的臨床指標(biāo) FPG、2 h PG、HbA1c、BMI、TC、TG、FINS、HOMA-IR、PTP1B均高于NC組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。DM+CHD組的臨床指標(biāo)BMI、HOMA-IR、PTP1B均高于DM組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其他指標(biāo) TG、FPG、2 h PG、HbA1c、FINS比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 三組間各項(xiàng)臨床指標(biāo)的比較（±s）

表1 三組間各項(xiàng)臨床指標(biāo)的比較（±s）

組別 FPG（mmol/L） 2 h PG（mmol/L） HbA1c（%） BMI（kg/m2） TC（mmol/L）NC組（n=38） 5.51±0.42 6.13±0.39 4.02±1.17 21.84±1.97 4.06±0.72 DM 組（n=50） 8.23±1.74 13.38±3.93 8.64±1.57 24.14±3.26 5.14±1.47 DM+CHD 組（n=42） 8.75±1.91 14.16±4.01 9.03±1.49 27.84±3.77 5.21±1.53 t1值 9.42 11.31 15.20 3.85 4.16 P1值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 t2值 1.37 0.94 1.21 5.05 0.22 P2值 ＞0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＞0.05

表1（續(xù)）

2.3 相關(guān)性分析結(jié)果 DM+CHD組患者PTP1B水平和 BMI（r=0.52，P＜0.05）、HOMA-IR（r=0.64，P＜0.05）呈正相關(guān)。

3 討論

CHD是冠狀動(dòng)脈管腔狹窄或阻塞，導(dǎo)致心肌缺血、缺氧而引起的心臟病，亦稱缺血性心肌病，是世界上最常見的死亡原因之一，其病理基礎(chǔ)是動(dòng)脈粥樣硬化（Atheromatosis，AS），2型糖尿病患者AS程度明顯高于健康人[4]，合并CHD的發(fā)病率是非糖尿病患者的4倍[5]，2型糖尿病被視為CHD的等危癥，導(dǎo)致冠心病的發(fā)生是多因素的，Stern[6]早在1995年即提出“共同土壤”學(xué)說，認(rèn)為胰島素抵抗（insulin resistance，IR）是T2DM與CHD的共同發(fā)病基礎(chǔ)，兩者之間存在著潛在的聯(lián)系。IR不僅在從糖耐量正常到糖尿病的病變過程中起著關(guān)鍵作用，還是心血管病變危險(xiǎn)因子之一[7]。

PTP1B屬于蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶家族，最初從人胎盤蛋白提取物中分離出來，是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)并純化的哺乳動(dòng)物PTP[8]，在人體多種組織細(xì)胞中廣泛表達(dá)，其可以催化酪氨酸脫去磷酸基團(tuán)，特別在胰島素作用的靶細(xì)胞（脂肪細(xì)胞、肝、骨骼）中過量表達(dá)，人類PTP1B基因定位于人20號(hào)染色體q13.1～13.2，此基因區(qū)域與肥胖癥和胰島素抵抗相關(guān)[9]，臨床研究表明約有75%的肥胖癥患者存在不同程度的胰島素抵抗，既往研究發(fā)現(xiàn)PTP1B可獨(dú)立調(diào)節(jié)胰島素信號(hào)及整合后的信號(hào)，激活的胰島素受體可使PTP1B的酪氨酸殘基磷酸化，同時(shí)PTP1B又能使胰島素受體底物去磷酸化，減弱甚至終止胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，與胰島素抵抗有關(guān)[10]，被認(rèn)為是胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的負(fù)調(diào)節(jié)因子。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)剔除PTP1B的小鼠即使經(jīng)過一段時(shí)間致肥胖飲食喂養(yǎng)，也沒有出現(xiàn)肥胖或胰島素抵抗癥狀，小鼠的胰島素敏感性顯著增強(qiáng)，而在小鼠的肝臟重新表達(dá)PTP1B后，增強(qiáng)的胰島素敏感性又顯著減弱，驗(yàn)證了PTP1B與胰島素介導(dǎo)的胰島素受體酪氨酸磷酸化的關(guān)系[11]，表明PTP1B在胰島素信號(hào)通路中起著關(guān)鍵性作用。最近的研究顯示PTP1B可通過ROS-NF-κB途徑在肥胖誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激過程中發(fā)揮重要作用，而肥胖誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是導(dǎo)致胰島素抵抗的重要原因之一[12]。肥胖癥患者通過減輕體重后，胰島素敏感性增強(qiáng)，其脂肪組織中的PTP1B活性也出現(xiàn)相應(yīng)的下降。此外脂代謝異常是T2DM與CHD的共同特征，PTP1B與脂代謝密切相關(guān)。趙勇等[13]的研究發(fā)現(xiàn)IR大鼠中PTP1B表達(dá)量明顯增加，過量表達(dá)PTP1B的大鼠細(xì)胞中膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1a（sterol regulatory element binding protein，SREBP-1a）和-1c的mRNA和啟動(dòng)子的含量增加，使脂肪酸合酶的mRNA增多，磷酸酶2A的活性增強(qiáng)，所以PTP1B通過磷酸酶2A活性的調(diào)節(jié)使SREBP-1表達(dá)增強(qiáng)，從而調(diào)節(jié)肝臟脂肪餐后高甘油三酯血癥，PTP1B在肝臟的過量表達(dá)可使低密度脂蛋白增加，引起脂代謝異常[14-16]。除此之外，對(duì)PTP1B進(jìn)行抑制可降低下丘腦AMP活化蛋白激酶的活性，阻礙了功能性特異性AMP活化蛋白激酶在周圍組織中的激活，促進(jìn)了瘦肉生長和能量的消耗，可能是PTP1B控制肥胖的作用結(jié)果[17]。本研究結(jié)果顯示，2型糖尿病患者BMI、HOMA-IR及PTP1B水平高于正常對(duì)照組，此外合并冠心病的糖尿病患者較單純糖尿病患者升高更為明顯，提示2型糖尿病的主要特征是IR，2型糖尿病合并冠心病的過程中，IR起著重要的作用，PTP1B參與了IR的過程。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，PTP1B和BMI、HOMA-IR呈正相關(guān)，與宋丹等[18]研究結(jié)果一致，PTP1B水平的增高與肥胖及胰島素抵抗增加有關(guān)，而肥胖是AS的重要危險(xiǎn)因素[19]，PTP1B可能在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制中起著重要作用。

綜上所述，PTP1B與胰島素抵抗密切相關(guān)，在2型糖尿病合并冠心病的發(fā)生發(fā)展中起到協(xié)同促進(jìn)作用，PTP1B對(duì)2型糖尿病合并冠心病的影響是通過增加胰島素抵抗、影響肥胖等多方面作用而實(shí)現(xiàn)的，PTP1B可以作為早期檢測(cè)指標(biāo)預(yù)測(cè)2型糖尿病合并冠心病的風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)PTP1B特異性抑制劑可通過改善胰島素敏感性而成為治療糖尿病的新靶點(diǎn)[20]。

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