戴志敏　楊占珍　閉玨　王芳

【摘 要】目的：通過血清胸苷激酶（STK1）的檢測，評估其在該地區(qū)健康體檢人群中的應(yīng)用價值。方法：采用高靈敏度點印染/免疫增強發(fā)光檢測系統(tǒng)（ECL）對我院967例健康體檢人群的STK1濃度檢測，分別對各年齡階段、性別之間的檢測結(jié)果進行分析研究。結(jié)果：STK1測定值以2pmol/L為標準閾值，>2.0pmol/L為陽性，≤2.0pmol/L為陰性。（1）STK1在健康體檢人群中的陰性者（909/967），平均值為（0.43±0.39）pmol/L，陽性者（58/967），陽性率為6.4%，平均值為（6.14±4.14）pmol/L（T=-10.51，P<0.05）。（2）男性檢出陽性率為5.8%，平均值為（0.72±1.62）pmol/L，女性檢出陽性率為7.2%，平均值為（0.85±1.89）pmol/L（x?=3.52，P>0.05），（3）將年齡分為三個階段（青年：≤45歲、中年：46-59歲、老年：≥60歲），STK1的陰性組和陽性組與年齡階段之間的兩兩比較，差異無統(tǒng)計學意義（x?=0.315，P>0.05）。（4）TK1表達的陽性的58例中，癌前病變12人，占20.7%，良性腫瘤10人，占17.2%，其他非腫瘤增殖性疾病21人，占36.2%，其他疾病15人，占25.9%，男性隨年齡增大TK1的陽性率呈增長趨勢，女性隨年齡增長呈下降趨勢。結(jié)論：TK1可真實反應(yīng)體內(nèi)細胞異常增殖情況，其水平與細胞增殖呈正相關(guān)，可對細胞異常增殖疾病發(fā)生的風險進行評估，在腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)有重要的應(yīng)用價值，可作為健康體檢人群的癌前病變篩查。

【關(guān)鍵詞】 黔東南州，血清胸苷激酶1，健康人群，體檢

【中圖分類號】R446.11 【文獻標識碼】B 【文章編號】1005-0019（2018）23--01

TK1與細胞周期S期的特殊相關(guān)性，又被稱為“S”期關(guān)鍵酶[1]，與細胞增殖有關(guān)，其水平隨著細胞快速增殖而逐漸增加，處于過度增殖的增殖類疾病是腫瘤形成的第一步。胸苷激酶1（TK1）基于與細胞增殖的密切關(guān)系，能夠靈敏地檢查出TK1濃度的變化，可以及時提示體內(nèi)癌前病變是否已出現(xiàn)惡性進展。常規(guī)抽血檢查就可實現(xiàn)多種治療方案（如手術(shù)、化療、放療及生物治療等）的前后體內(nèi)細胞增殖的活動能力，血清TK1與其他常用腫瘤標記聯(lián)合檢測時，可明顯提高腫瘤早期診斷的敏感性及特異性[2]。

黔東南州地區(qū)少數(shù)名族居多，以侗族苗族為主，在飲食、生活習慣、生活環(huán)境等方面都與其他地區(qū)健康人群有所不同，因此我們針對該地區(qū)在我院健康體檢管理中心體檢的健康人群的血清胸苷激酶1（STK1）測定結(jié)果進行分析，評估其在該地區(qū)健康體檢人群中的臨床應(yīng)用價值。

本次通過對黔東南州地區(qū)健康體檢中心967例健康體檢人群的血清胸苷激酶1的檢測結(jié)果進行分析，研究在不同性別、年齡階段的STK1濃度，探討其在該地區(qū)健康體檢中的檢測意義，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 對象 選擇2017年1月至2017年12月本地區(qū)到我院進行TK1檢測的體檢者共967例為研究對象，其中男性582例，女性385例，年齡18-88歲。應(yīng)排除標本溶血、脂血，女性月經(jīng)期等情況。

1.2 方法

1.2.1 標本采集：使用無添加劑的真空采血管取靜脈血2ml，建議空腹，室溫靜置30-60min或水浴30min至凝固后離心，以4000r/min，5min，離心后保存于-20℃冰箱備用。

1.2.2 試劑和儀器：深圳華瑞同康生物科技有限公司提供的STK1診斷試劑盒和CIS-1型化學發(fā)光數(shù)字成像分析儀。

1.2.3 檢測方法：采用高靈敏度點印染/免疫增強發(fā)光檢測系統(tǒng)（ECL）進行檢測，詳細操作步驟按診斷試劑盒操作手冊進行。吸取3ul的體檢者血清到硝酸纖維素膜上，加入TBS緩沖液配置的6%脫脂奶粉，將硝酸纖維素膜于室溫封閉1h后除去封閉劑，繼續(xù)加入用TBS配置的最佳稀釋濃度的TK1抗體室溫下免疫反應(yīng)2h。再加生物素化二抗（生物素化-驢抗雞IgY），室溫下反應(yīng)40min后，加入親和素辣根過氧化物酶1h。用ECL發(fā)光試劑反應(yīng)后，發(fā)光信號的強弱用CS-1成像系統(tǒng)進行分析。每次測定均采用不同濃度IK1（20pmo/L、6.6pmo/L，2.2pmo/L）做標準品制定標準曲線，依據(jù)已知的標準品的濃度，每個點樣點的發(fā)光信號的強度換算成pmoL，STK1水平超過2.0pmoL定為陽性。體檢者同時進行全面檢查：包括體格檢查、血生化檢驗、影像學檢查（如胸部正側(cè)位片和腹部B超）等。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 22.0軟件進行統(tǒng)計，計量資料組間比較就采用獨立樣本t檢驗方法，用（）表示，計數(shù)資料組間比較采用x?檢驗方法，P<0.05為有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 TK1的正常組和風險組間的相關(guān)性TK1的風險組平均值與正常組的平均值有統(tǒng)計學差異（T=-10.51，P<0.05）。

2.2 TK1正常組和風險組與性別間的相關(guān)性 TK1在男性和女性之間的平均值無差異（x?=3.521，P=0.061）。如表2：

2.3 TK1正常組和風險組與年齡之間的相關(guān)性 TK1在各年齡組階段的平均值無差異（x?=0.315，P=0.854）。如表3。

2.4 TK1的表達與疾病的相關(guān)性 TK1表達的陽性的58例中：（1）癌前病變12人，占20.7%，其中子宮頸炎伴宮頸糜爛為3人，結(jié)腸息肉為4人，慢性萎縮性胃炎為3人，乳腺非典型增生為2人。（2）良性腫瘤10人，占17.2%，其中甲狀腺瘤為2人，子宮肌瘤為4人，肝囊腫為2人，肝血管瘤為2人。（3）其他非腫瘤增殖性疾病21人，占36.2%，乳腺葉增生10人，前列腺增生為11人。（4）其他疾病15人，占25.9%，其中包括心血管病，糖尿病，女性月經(jīng)期等等。

3 討論

現(xiàn)目前有很多種方法可以檢測到腫瘤細胞，比如影像學、免疫組化、CT等都可以較好的測出腫瘤細胞。但是這些方法只能對已經(jīng)形成實質(zhì)性腫瘤塊細胞進行識別，不能對早期潛伏在機體內(nèi)的癌細胞進行監(jiān)測，只適用于癌癥中晚期的患者，會導(dǎo)致病人不能及時治愈。而血清胸苷激酶1中的胸苷激酶抗體是隨著體內(nèi)細胞異常增殖而隨之增加，呈一個正相關(guān)的關(guān)系，所以當機體內(nèi)有細胞異常增殖的時候，那么TK1的濃度水平也會跟著升高，而正常細胞增殖的時候TK1不會或者極低釋放到血液中，血清中TK1濃度極低[3]。TK1對于一些及早潛伏在機體內(nèi)的腫瘤細胞可以進行瞬時捕獲，不僅特異性高，而且靈敏度也更好。當然也不能排除一些非腫瘤增殖性疾病而引起的胸苷激酶增高，比如乳腺增生，前列腺增生，糖尿病等血清TK1濃度也會增高，還有女性月經(jīng)期、病毒感染、炎癥會導(dǎo)致TK1一過性增高，TK1的濃度也會受標本自身的影響，比如溶血，脂血等也會導(dǎo)致一些假陽性的結(jié)果出現(xiàn)。

有研究應(yīng)用血清TKl作為健康體檢人群篩查腫瘤的風險，Xu等[4]對癌前病變組與健康體檢組比較后結(jié)果顯示，TKl檢測的靈敏度和特異度均適用于體檢篩查。

本次研究對黔東南州地區(qū)健康體檢中心的967例體檢人群進行結(jié)果檢測，陽性率為6.4%，高于陳志恒等[5]1.20%的結(jié)果及張興華等[6]5.8%的結(jié)果。TK1檢測結(jié)果在男女之間比較無統(tǒng)計學意義，與劉影[7]等報道結(jié)果一致，在各年齡階段兩兩比較也無統(tǒng)計學意義，與宋成等[8]報道結(jié)果一致。由于本地區(qū)的少數(shù)名族居多，可能在職業(yè)、生活習慣、生活環(huán)境、飲食方面都與其他地區(qū)的健康人有所不同，如本地區(qū)的人有喜歡飲酒、抽煙的習慣，而且這次收集的數(shù)據(jù)陽性者中有12人為癌前病變，良性腫瘤的有10人，其他非腫瘤增殖性疾病為21人，還有一些其他自身疾病的有15人，故陽性率會遠大于其他地區(qū)的健康體檢人群，而對于TK1陽性者應(yīng)該排除脂血、溶血等情況。

對本次研究的血清TK1（STKI）的檢測結(jié)果進行分析，表明了TK1可以真實評估機體內(nèi)細胞異常增殖的情況，是一個特異性、敏感性極好的腫瘤標記物，可以瞬時捕獲到腫瘤細胞。其水平與細胞增殖速度呈正相關(guān)，可對細胞異常增殖疾病發(fā)生的風險進行評估，在腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)有重要的應(yīng)用價值，尤其適合癌前病變體檢篩查，可以幫助患者早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療。

參考文獻

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