楊勁 何安華 李凌波

孕婦中RhE抗原陰性分布特點(diǎn)*

楊勁 何安華 李凌波

目的 探討 RhE抗原陰性孕婦妊娠和生產(chǎn)次數(shù)與抗-E產(chǎn)生的關(guān)系。方法 采用微柱凝膠法對(duì)2 012例孕婦進(jìn)行RhE抗原、不規(guī)則抗體和ABO血型檢測(cè)，并對(duì)不規(guī)則抗體陽(yáng)性的孕婦進(jìn)行譜細(xì)胞鑒定，檢測(cè)抗-E。結(jié)果 孕婦中RhE抗原陰性占53%；抗-E在首次妊娠與未育妊娠次數(shù)1次以上孕婦中的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；抗-E在首次妊娠與生育1次以上孕婦中的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；RhE抗原陰陽(yáng)性孕婦在ABO血型分布的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論RhE陰性孕婦占比超過(guò)50%，抗-E產(chǎn)生以生育1次以上孕婦為主，在日益增多的生二胎家庭中意義重大。

RhE 妊娠 經(jīng)產(chǎn)婦

Rh血型抗原是所有血型系統(tǒng)中最復(fù)雜的，RhE抗原免疫原性僅次于RhD抗原，但陰性率遠(yuǎn)高于RhD抗原。2016年1月1日國(guó)家放開(kāi)二胎政策實(shí)施以來(lái)，生二胎的家庭日益增多，陰性率超過(guò)50%的RhE抗原檢測(cè)則顯得尤為重要。本次研究未育妊娠次數(shù)和生育次數(shù)不同孕婦中RhE抗原陰性分布特點(diǎn)，及未育妊娠次數(shù)和生育次數(shù)與產(chǎn)生抗-E的關(guān)系，為生二胎的RhE抗原陰性孕婦做好預(yù)防和備血工作。

對(duì)象與方法

1 研究對(duì)象 2016年1～10月臨床2 012例孕婦（均無(wú)輸血史），年齡20～48歲，孕齡20～40周，未育妊娠1～5次，生育0～5次。

2 試劑與儀器

2.1 ABO血型鑒定卡、RhE抗原卡、抗人球蛋白卡及譜細(xì)胞均來(lái)自長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司；ABO反定細(xì)胞、 不規(guī)則抗體篩選細(xì)胞及抗體鑒定譜細(xì)胞均來(lái)自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司；血型定型質(zhì)控品來(lái)自長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司（所有試劑均在有效期內(nèi)使用）。

2.2 瑞士Hamilton全自動(dòng)血型儀提供ABO血型、RhE抗原和不規(guī)則抗體的檢測(cè)。長(zhǎng)春博迅提供專用孵育器、專用離心機(jī)適用于譜細(xì)胞鑒定檢測(cè)。

3 方法

3.1 ABO血型定型、RhE抗原檢測(cè)和不規(guī)則抗體篩查：用EDTA-K2真空管采集孕婦靜脈血2 ml，充分混勻，3 000 r/min離心10 min。采用全自動(dòng)血型儀說(shuō)明書進(jìn)行檢測(cè)。

3.2 抗-E鑒定：不規(guī)則抗體陽(yáng)性孕婦用EDTA-K2真空管采集靜脈血2 ml，充分混勻，3 000 r/min離心10 min。將分離血漿按50 μl和對(duì)應(yīng)譜細(xì)胞（1～10號(hào)）各50 μl分別加入抗人球蛋白卡的10個(gè)孔中，37℃孵育15 min，離心5 min（900 r/min，2 min；1 500 r/min 3）。依據(jù)譜細(xì)胞格局判定抗體特異性。

3.3 應(yīng)用spss17.0軟件統(tǒng)計(jì)分析，采用非參數(shù)檢驗(yàn)和卡方檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 2016年1～10月2 012例孕婦RhE抗原檢測(cè)陰性1 067例（占53%），陽(yáng)性945例。

2 2 012例孕婦中檢出不規(guī)則抗體陽(yáng)性13例，其中RhE抗原陰性1 067例檢出抗-E 9例。首次妊娠孕婦RhE抗原陰性419例檢出抗-E 1例，檢出率0.2%；未育妊娠1次以上孕婦RhE抗原陰性314例檢出抗-E 2例，檢出率0.6%；生育1次上孕婦RhE抗原陰性334例檢出抗-E 6例，檢出率1.7%?？?E在首次妊娠與未育妊娠1次以上孕婦中的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.699，P＞0.05）；抗-E在首次妊娠與生育1次以上孕婦中的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.897，P＜0.05）。（表1、2）。

3 RhE抗原陰陽(yáng)性在ABO血型中分布均衡，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=1.420，P＞0.05）（表3）。

表1 RhE抗原陰性1 067例中妊娠次數(shù)、生育次數(shù)與抗-E檢出情況

討 論

雖然E抗原的免疫原性較D弱，但本研究中RhE陰性率高達(dá)53%，由E抗原不合而引起的同種免疫的概率遠(yuǎn)大于D抗原?，F(xiàn)階段相關(guān)法律未要求臨床常規(guī)檢測(cè)E抗原。本次2 012例孕婦中生二胎占32.8%（共659例），生二胎的RhE陰性孕婦334例中抗-E檢出率為1.7%。孕產(chǎn)婦同種免疫最易產(chǎn)生抗-E[1，2]，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)了RhD陰性產(chǎn)生抗-D帶來(lái)的危害。在生育1次以上產(chǎn)生抗-E的6例中，有2例產(chǎn)生了Rh血型系統(tǒng)的新生兒溶血病。新生兒溶血病中高膽紅素對(duì)其腦部發(fā)育有著長(zhǎng)遠(yuǎn)的影響[3，4]。由于血站不常規(guī)檢測(cè)RhE抗原，一旦出現(xiàn)急診產(chǎn)婦大出血情況，輸血科只能進(jìn)行盲篩，影響了產(chǎn)婦的搶救時(shí)間。

表2 不規(guī)則抗體陽(yáng)性孕婦Rh血型表型與譜細(xì)胞檢出抗體分布情況

表3 2 012例孕婦RhE表型在ABO血型的分布情況

本次研究發(fā)現(xiàn)，生育1次以上的RhE陰性孕婦中檢出抗-E與首次妊娠檢出抗-E的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而未育妊娠1次以上的孕婦檢出抗-E與首次妊娠檢出抗-E的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）?？赡苌龝r(shí)妊娠時(shí)間比妊娠中停止妊娠的時(shí)間長(zhǎng)，易反復(fù)刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生IgG抗體[5]。這也是有生育史的女性不規(guī)則抗體陽(yáng)性率高于男性的原因[6]。隨著二胎生育的普及，臨床產(chǎn)科應(yīng)對(duì)剛生育過(guò)嬰兒RhE陽(yáng)性的RhE陰性產(chǎn)婦進(jìn)行不規(guī)則抗體普查，提早預(yù)防。未產(chǎn)生的應(yīng)及時(shí)注射抗-E的免疫球蛋白，破壞進(jìn)入母體的Rh陽(yáng)性紅細(xì)胞，避免產(chǎn)生抗-E，保證生二胎時(shí)母嬰平安。

臨床2 012例孕婦中RhE抗原陰陽(yáng)性在ABO各型中的分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。二胎生產(chǎn)率日益增高的今天，輸血科應(yīng)對(duì)入庫(kù)血液進(jìn)行RhE抗原檢測(cè)，建立RhE陰性應(yīng)急血的儲(chǔ)存機(jī)制[7]。

完善RhE陰性產(chǎn)婦，首次生產(chǎn)的新生兒做RhE抗原表型檢測(cè)，再按表型分組比較[8]。對(duì)RhE陰性孕婦生完1胎后或妊娠1次后，按IgG產(chǎn)生的時(shí)間檢測(cè)不規(guī)則抗體。對(duì)比有輸血史孕婦,按產(chǎn)生抗-E的時(shí)間、抗體效價(jià)分析，更能說(shuō)明RhE抗原檢測(cè)對(duì)安全生育二胎的重要性。對(duì)二胎開(kāi)放后更好地保障產(chǎn)婦及后續(xù)用血安全，減少Rh系統(tǒng)新生兒溶血病的發(fā)生[9]，RhE檢測(cè)或許更有臨床意義，有待今后進(jìn)一步研究。

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The Positive RhE Antigen Frequency in Pregnant Women

YANG Jin, HE An-hua, and LI Ling-bo. Department of Blood Transfusion, the Second Hospital of Hefei230001

Objective To explore the relations between times of delivery and anti-E antibody frequencies in RhE-negative pregnancies. Methods Micro-column gel test was used to detect RhE antigens, irregular antibodies and ABO blood groups in 2012 pregnant women, and spectral cell identification was performed to detect anti-E antibodies in the samples with positive irregular antibodies. Results Fifty percent pregnant women were found to be RhE antigen-negative.No significant difference of positive rates of anti-E antibodies was noted between the women with first pregnancy and those with over one time of pregnancy（P＞0.05）. Additionally, no obvious difference of ABO blood group distribution was seen between RhE-negative and –positive pragnancies （P＞0.05）. Conclusions Over half of pregnant women present negative RhE antigen and the positive anti-E antibodies are frequently detectable in multipara women, which is significantly meaningful to the women with a second child.

RhE Pregnancy Multipara

R457.1+1 R714.1

A

1671-2587（2017）06-0628-03

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.06.029

*本課題受吉林省科技廳重點(diǎn)科技成果轉(zhuǎn)化項(xiàng)目（No.20150307011YY）資助

230001 安徽省合肥市第二人民醫(yī)院輸血科（楊勁，何安華）；長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司（李凌波）

楊勁（1981–），男，安徽固鎮(zhèn)人，回族，主管技師，學(xué)士，主要從事輸血醫(yī)學(xué)工作，（E-mail）16571243@qq.com。

何安華，女，副主任檢驗(yàn)師，（Tel）13856074033。

2017-06-12）

（本文編輯：王敏）