薛建平++林麗云+陳金泉++裴德君

摘要

本文以1%甲酸-乙腈為提取溶劑，結(jié)合超聲波提取前處理和高效液相色譜分析技術(shù)，建立了紡織品中孔雀石綠染料的快速檢測(cè)方法。該方法的平均回收率為93.4%～98.7%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于5%，方法檢出限為0.01mg/kg，定量限為0.03mg/kg。方法簡(jiǎn)單快速、準(zhǔn)確度高、檢出限低，可滿足紡織品中孔雀石綠含量的日常檢測(cè)要求。

關(guān)鍵詞：紡織品；孔雀石綠染料；高效液相色譜

1 引言

孔雀石綠是一類(lèi)三苯甲烷類(lèi)染料，被廣泛應(yīng)用于制陶業(yè)、紡織業(yè)、皮革業(yè)、食品染色和細(xì)胞化學(xué)染色，既是工業(yè)性染料，又是一種殺真菌劑[1]。在紡織領(lǐng)域中，孔雀石綠染料主要用于絲綢、羊毛的染色。但孔雀石綠與人體長(zhǎng)期接觸，會(huì)進(jìn)入人體還原成無(wú)色孔雀石綠，該物質(zhì)具有致畸致癌的危害[2]。2016年1月，國(guó)際環(huán)保紡織協(xié)會(huì)發(fā)布了新一版OEKO-TEX Standard 100，新標(biāo)準(zhǔn)將孔雀石綠作為禁用致癌染料列入其中。但目前，紡織品中孔雀石綠的檢測(cè)方法還未見(jiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道。

目前國(guó)內(nèi)外與孔雀石綠檢測(cè)相關(guān)的研究多集中在水和水產(chǎn)品上。對(duì)于水和水產(chǎn)品中孔雀石綠的檢測(cè)，已報(bào)道的檢測(cè)方法主要有高效液相色譜法[3-5]和高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法[6-7]，其中前者設(shè)備價(jià)格相對(duì)低廉，開(kāi)發(fā)的檢測(cè)方法易于推廣。本文采用高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)器（HPLC-DAD）對(duì)紡織品中的孔雀石綠染料進(jìn)行分析研究，建立一套可靠的定性定量檢測(cè)方法。

2 試驗(yàn)部分

2.1 試劑和材料

孔雀石綠標(biāo)準(zhǔn)品（CAS號(hào)為2437-29-8），純度為97%，購(gòu)于Dr. Ehrenstorfer公司；乙腈、甲酸均為色譜純；乙酸銨、乙酸純度均大于99%；試驗(yàn)水為超純水。

1%甲酸-乙腈提取溶劑的配制：在100mL乙腈中加入1mL的甲酸，混勻。

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制：分別準(zhǔn)確稱(chēng)取適量的孔雀石綠標(biāo)準(zhǔn)品，用1%甲酸-乙腈配制成濃度為1000mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。使用時(shí)，用1%甲酸-乙腈逐級(jí)稀釋配制成1.0mg/L、0.75mg/L、0.25mg/L、0.1mg/L、0.03mg/L系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

2.2 設(shè)備和儀器

1260高效液相色譜儀-二極管陣列檢測(cè)器（美國(guó)Agilent公司）；ZORBAX SB-CN色譜柱、ZORBAX Eclipse Plus C18色譜柱（4.6mm×250mm，膜厚5μm，美國(guó)Agilent公司）；超聲波發(fā)生器（昆山市超聲儀器有限公司）；聚四氟乙烯過(guò)濾膜（0.22?m）。

2.3 試驗(yàn)方法

2.3.1 試樣提取

取紡織試樣，剪成約5mm×5mm的小片，混勻。從混合樣中稱(chēng)取1.0g（精確至0.01g），置于50mL具密封塞的管狀瓶中，準(zhǔn)確移取10mL的1%甲酸-乙腈，于超聲波發(fā)生器中室溫下萃取20min，用0.22μm聚四氟乙烯膜過(guò)濾后供色譜分析。

2.3.2 儀器分析

色譜柱：ZORBAX Eclipse Plus C18色譜柱（250mm×4.6mm，5?m）；柱溫30℃；進(jìn)樣體積20?L；流動(dòng)相乙腈：0.1mol/L乙酸銨緩沖液（用乙酸調(diào)至pH=4.5）為60：40；流速1.0mL/min；DAD檢測(cè)器波長(zhǎng)618nm。

3 結(jié)果與討論

3.1 提取溶劑的選擇

對(duì)于在水產(chǎn)品中孔雀石綠殘留量的檢測(cè)，一般采用乙腈作為提取溶劑。徐彥輝[6]等人認(rèn)為，在酸性條件下對(duì)孔雀石綠進(jìn)行提取，可提高回收率。本試驗(yàn)比較了乙腈和1%甲酸-乙腈對(duì)紡織品中孔雀石綠的提取效果，在本試驗(yàn)的考察范圍內(nèi)，乙腈對(duì)目標(biāo)物的提取回收率僅為75.8%，而使用含1%甲酸的乙腈作為提取溶劑，目標(biāo)物的回收率大幅提高，達(dá)97.5%。因此，試驗(yàn)確定采用1%甲酸-乙腈作為提取溶劑。

3.2 色譜柱的選擇

本試驗(yàn)在其他條件相同的情況下，考察了ZORBAX SB-CN柱（4.6mm×250mm，5μm）和ZORBAX Eclipse Plus C18柱（4.6mm×250mm，5μm）對(duì)孔雀石綠的分析效果，結(jié)果見(jiàn)圖1～圖2。圖中的結(jié)果表明，使用該兩種色譜柱，目標(biāo)物的峰形都很好。但考慮到使用ZORBAX Eclipse Plus C18柱時(shí)目標(biāo)物峰寬會(huì)略窄些且保留時(shí)間適中，因此試驗(yàn)最終選用ZORBAX Eclipse Plus C18柱進(jìn)行色譜分離。

3.3 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

在190nm～900nm波段對(duì)孔雀石綠的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行DAD光譜掃描，光譜圖見(jiàn)圖3。如圖所示，孔雀石綠在316nm、426nm和618nm三個(gè)波長(zhǎng)處有吸收，其中618nm處的吸收最強(qiáng)，因此試驗(yàn)選擇618nm作為孔雀石綠的檢測(cè)波長(zhǎng)。

3.4 流動(dòng)相的選擇

試驗(yàn)以乙腈-乙酸銨緩沖液體系為流動(dòng)相，考察了乙腈與乙酸銨緩沖液的不同體積比例對(duì)孔雀石綠的分析效果，選擇體積分?jǐn)?shù)分別為40%、50%、60%、70%、80%的乙腈溶液進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表1。表中的結(jié)果表明，隨著流動(dòng)相乙腈的體積比例增大，分析物的保留時(shí)間逐漸縮短，峰寬逐漸變窄，峰面積也隨之小幅增大。當(dāng)乙腈體積分?jǐn)?shù)為70%～80%時(shí)，分析物的峰寬較窄，但出峰時(shí)間太早，容易被雜質(zhì)峰干擾；當(dāng)乙腈體積比例小于60%時(shí)，峰形寬大拖尾，出峰時(shí)間太長(zhǎng)；當(dāng)乙腈的體積分?jǐn)?shù)為60%時(shí)，峰形尖銳對(duì)稱(chēng)，保留時(shí)間適中，避開(kāi)了雜質(zhì)峰的干擾。因此，本試驗(yàn)選擇體積比例為60%乙腈作為分析流動(dòng)相。

3.5 線性關(guān)系與方法檢出限

在優(yōu)化的條件下，取1.1中的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)樣分析，以目標(biāo)物的質(zhì)量濃度對(duì)峰面積進(jìn)行線性回歸，結(jié)果表明孔雀石綠在0.03mg/L～1.0mg/L范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，其相關(guān)系數(shù)R2為0.9998。以信噪比大于3確定方法的檢出限，以信噪比大于10確定方法的定量限，孔雀石綠的方法檢出限和定量限分別為0.01mg/kg和0.03mg/kg。endprint

3.6 方法的回收率和精密度

在1.0g的空白毛紡織貼襯布中添加不同量的孔雀石綠標(biāo)準(zhǔn)溶液，使水平分別為0.03mg/kg、0.25mg/kg、1.0mg/kg，按優(yōu)化的條件進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，每個(gè)水平做7次平行試驗(yàn)，得到的回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）見(jiàn)表2。由結(jié)果可知，孔雀石綠的平均回收率為93.4%～98.7%，RSD為1.3%～3.5%，符合日常檢測(cè)的要求。

4 結(jié)論

采用高效液相色譜法測(cè)定紡織品中的孔雀石綠的方法為：選用1%甲酸-乙腈對(duì)紡織品中的孔雀石綠進(jìn)行超聲提取，選擇ZORBAX Eclipse Plus C18色譜柱進(jìn)行分離，以乙腈/0.1mol/L乙酸銨緩沖液（60/40，v/v）作為流動(dòng)相，在618nm的DAD波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè)。方法的平均回收率為93.4%～98.7%，RSD為1.3%～3.5%，方法檢出限為0.01mg/kg，定量限為0.03mg/kg。該方法檢出限低，準(zhǔn)確度和精密度高，能夠滿足紡織品中孔雀石綠的檢測(cè)要求。

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（作者單位：福建省纖維檢驗(yàn)局）endprint