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        微生物檢測(cè)結(jié)果的報(bào)告和不確定度的應(yīng)用

        2017-11-16 17:40:29沈泓李玨孫晗
        中國(guó)科技縱橫 2017年20期
        關(guān)鍵詞:微生物檢測(cè)不確定度

        沈泓++李玨++孫晗

        摘 要:檢測(cè)報(bào)告的質(zhì)量直接影響客戶對(duì)報(bào)告的理解和使用,在微生物領(lǐng)域,除了做好檢測(cè)過(guò)程的質(zhì)量控制和保證外,也應(yīng)重視對(duì)結(jié)果報(bào)告的質(zhì)量保證工作。本文在微生物檢測(cè)結(jié)果的表示、評(píng)定和不確定度的應(yīng)用三方面進(jìn)行探討。

        關(guān)鍵詞:微生物檢測(cè);不確定度;結(jié)果評(píng)定

        中圖分類號(hào):TS207.4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1671-2064(2017)20-0235-01

        檢測(cè)報(bào)告的質(zhì)量直接影響客戶對(duì)報(bào)告的理解和使用,在微生物領(lǐng)域,除了做好檢測(cè)過(guò)程的質(zhì)量控制和保證外,也應(yīng)重視對(duì)結(jié)果報(bào)告的質(zhì)量保證工作。

        1 微生物檢測(cè)結(jié)果的表示

        在微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室結(jié)果的表示中,菌落計(jì)數(shù)、MPN值和定性結(jié)果表示方式不同。

        菌落計(jì)數(shù)結(jié)果表示:通常用菌落形成單位CFU(colony forming unit)表示菌落計(jì)數(shù)結(jié)果,如:“CFU/g”(一般是固體樣品),“CFU/mL”(一般是液體樣品),“CFU/cm2”(表面積取樣法時(shí))和“CFU/雙”(如加工人員的手)等,也有用“個(gè)/g”,“個(gè)/mL”表示。菌落計(jì)數(shù)數(shù)字的表示需要符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的具體要求。如GB 4789.2-2016對(duì)菌落總數(shù)報(bào)告的要求為:菌落數(shù)小于100 CFU時(shí),按“四舍五入”原則修約,以整數(shù)報(bào)告。菌落數(shù)大于或等于100 CFU時(shí),第3位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后,取前2位數(shù)字,后面用0代替位數(shù)。也可用10的指數(shù)形式來(lái)表示,按“四舍五入”原則修約。如:20532CFU/g修約為21000CFU/g,也可用2.1×104CFU/g來(lái)表示。

        MPN值結(jié)果表示:有一些細(xì)菌檢測(cè)結(jié)果用最大可能值MPN(Most Probable Number)表示,如:“MPN/g”,“MPN/mL”,“MPN/100g”和“MPN/100mL”等。MPN是表示樣品中活菌密度的估算值,并不是樣品中活菌數(shù)的真值。MPN計(jì)數(shù)法是基于泊松分布的一種間接計(jì)數(shù)方法,適用于測(cè)定混雜微生物群落中含量較低的微生物。通過(guò)確證的陽(yáng)性管數(shù),檢索MPN表來(lái)獲得檢驗(yàn)微生物的最可能數(shù)(MPN)。MPN值可以根據(jù)稀釋度檢樣量的不同,對(duì)表內(nèi)數(shù)字進(jìn)行相應(yīng)得降低或增加。

        定性檢測(cè)結(jié)果的表示:在微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室中,一種常見(jiàn)的結(jié)果表示方式是對(duì)定性檢測(cè)結(jié)果的報(bào)告。如:“陰性或陽(yáng)性”,“檢出或未檢出”。在定性結(jié)果表示時(shí)有時(shí)會(huì)標(biāo)注取樣量,如“陰性或陽(yáng)性/25g”,“陰性或陽(yáng)性/100g”等。定性檢測(cè)的目標(biāo)需要明確,如根據(jù)GB 4789.42檢測(cè)結(jié)果報(bào)告“檢出諾如病毒基因”或“未檢出諾如病毒基因”。

        2 微生物檢測(cè)結(jié)果的評(píng)定

        根據(jù)微生物學(xué)指標(biāo)值或限量值對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行判定,還應(yīng)考慮抽樣方法,以及評(píng)定的范圍,是對(duì)某一樣品進(jìn)行評(píng)定,還是對(duì)整批產(chǎn)品進(jìn)行評(píng)定。國(guó)際食品微生物標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(The International Committee on Microbiological Specification for Food,ICMSF)制定的食品微生物學(xué)分析采樣方法,我國(guó)目前也逐漸采納了與國(guó)際接軌的ICMSF采樣方案。ICMSF提出的采樣基本原則,根據(jù)各種微生物本身對(duì)人的危害程度各有不同和食品經(jīng)不同條件處理后,其危害度變化情況來(lái)設(shè)定抽樣方案并規(guī)定其不同采樣數(shù)。ICMSF方法是從統(tǒng)計(jì)學(xué)角度,依據(jù)一批產(chǎn)品檢查多少個(gè)檢樣才能夠有代表性,才能客觀地反映該批產(chǎn)品的質(zhì)量的原則,其抽樣方法包括二級(jí)法和三級(jí)法。二級(jí)法設(shè)有n、c和m值,三級(jí)法設(shè)有n、c、m和M值。GB 4789.1-2016對(duì)其有明確解釋:

        n:同一批次產(chǎn)品應(yīng)采集的樣品件數(shù);

        c:最大可允許超出m 值的樣品數(shù);

        m:微生物指標(biāo)可接受水平限量值(三級(jí)采樣方案)或最高安全限量值(二級(jí)采樣方案);

        M:微生物指標(biāo)的最高安全限量值。

        注1:按照二級(jí)采樣方案設(shè)定的指標(biāo),在n個(gè)樣品中,允許有≤c個(gè)樣品其相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗(yàn)值大于m值。

        注2:按照三級(jí)采樣方案設(shè)定的指標(biāo),在n個(gè)樣品中,允許全部樣品中相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗(yàn)值小于或等于m值;允許有≤c個(gè)樣品其相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗(yàn)值在m值和M值之間;不允許有樣品相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗(yàn)值大于M值。

        如GB10765-2010中對(duì)嬰兒配方食品中的阪崎腸桿菌采用二級(jí)采樣的方案,其限度為n=3,c=0,m=0/100g,即抽樣的3個(gè)樣品中均不能檢出該致病菌。而對(duì)大腸菌群的檢驗(yàn)采用的是三級(jí)抽樣的方案,其限度為n=5,c=2,m=10,M=100。

        因?yàn)槎?jí)采樣對(duì)致病菌“零容忍”,對(duì)阪崎腸桿菌的檢驗(yàn)可以看作是定性檢驗(yàn),直接報(bào)告結(jié)果為“檢出”或“未檢出”,有任何1個(gè)樣品檢出,則該批次乳粉不合格。

        對(duì)大腸菌群的檢驗(yàn)可以分為以下幾種情況:若5個(gè)樣品大腸菌群數(shù)均≤10CFU/g,則該批次產(chǎn)品合格;若≤2個(gè)樣品大腸菌群數(shù)在10CFU/g-100CFU/g,則該批次產(chǎn)品合格;若有3個(gè)樣品大腸菌群數(shù)>10CFU/g,則該批次乳粉全部不合格.若有任何1個(gè)樣品大腸菌群數(shù)>100CFU/g,則該批次乳粉都不合格。

        對(duì)于固體樣品,若平板計(jì)數(shù)法的培養(yǎng)計(jì)算結(jié)果為5,低于檢出限,應(yīng)以小于檢出限數(shù)值報(bào)告,即為<10CFU/g。

        3 不確定度的應(yīng)用

        當(dāng)不確定度與檢測(cè)結(jié)果的有效性或應(yīng)用有關(guān),或客戶的指令中有要求,或不確定度影響到與規(guī)范限度的符合性時(shí),則檢測(cè)報(bào)告中還需要有關(guān)不確定度的信息。測(cè)量不確定度是表征合理地賦予被測(cè)量之值的分散性、與測(cè)量結(jié)果相聯(lián)系的參數(shù)。測(cè)量不確定度不能用于被測(cè)量值的修正,它可以表征被測(cè)量值的合理范圍。

        在APLAC TC 005:2004中指出在對(duì)微生物測(cè)量不確定度評(píng)定方面,微生物測(cè)試有四種主要類型:常規(guī)定量測(cè)試、MPN法、定性測(cè)試和專家測(cè)試如醫(yī)藥測(cè)試等。各種不確定度的評(píng)定方法是用于常規(guī)定量測(cè)試的。

        在CNAS-CL09:2013中指出在微生物檢測(cè)領(lǐng)域,某些情況下,一些檢測(cè)無(wú)法從計(jì)量學(xué)和統(tǒng)計(jì)學(xué)角度對(duì)測(cè)量不確定度進(jìn)行有效而嚴(yán)格的評(píng)估,這時(shí)至少應(yīng)通過(guò)分析方法,考慮它們對(duì)于檢測(cè)結(jié)果的重要性,列出各主要的不確定度分量,并作出合理的評(píng)估。有時(shí)在重復(fù)性和重現(xiàn)性數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上估算不確定度也是合適的。

        最簡(jiǎn)單的情況是規(guī)范本身清楚地說(shuō)明測(cè)得值在給定的置信水平下的不確定度擴(kuò)展后不應(yīng)超出規(guī)定的限值或在規(guī)定的限定值內(nèi)。

        在多數(shù)情況下,規(guī)范要求在證書或報(bào)告中做出符合性聲明,但沒(méi)有指明進(jìn)行符合性評(píng)價(jià)時(shí)需考慮不確定度的影響。在這種情況下,可以在不考慮不確定度的情況下,根據(jù)測(cè)得值是否在規(guī)定限制范圍內(nèi)做出符合性判斷。

        在客戶與實(shí)驗(yàn)室之間的協(xié)議或?qū)嵤?zhǔn)則或規(guī)范中可能已聲明其采用方法的準(zhǔn)確性是足夠的,且在判斷符合性時(shí),可以忽略不確定度。

        當(dāng)沒(méi)有相應(yīng)的準(zhǔn)則、測(cè)試規(guī)范、客戶要求、協(xié)議或?qū)嵤┮?guī)則時(shí),可采用下列方法:

        (1)當(dāng)測(cè)得值以95%的置信水平延伸擴(kuò)展不確定度時(shí)仍不超過(guò)規(guī)定限值時(shí),則可以聲明符合規(guī)范要求。

        (2)如果測(cè)得值向下延伸擴(kuò)展不確定度后,仍超出規(guī)定限值的上限,則可以聲明不符合規(guī)范要求。

        (3)如果測(cè)得值向上延伸擴(kuò)展不確定度后仍低于規(guī)定限值的下限,則可以聲明不符合規(guī)范要求。

        (4)在不可能測(cè)試同一個(gè)產(chǎn)品單元的多個(gè)樣品,或不可能進(jìn)行重復(fù)測(cè)試的情況下,測(cè)得的單一值若非常接近規(guī)定限值,延伸擴(kuò)展不確定度后高于上限或低于下限,這時(shí)在規(guī)定的置信水平上不能確定是否符合規(guī)范。應(yīng)當(dāng)報(bào)告測(cè)得值與擴(kuò)展不確定度,并聲明無(wú)法證實(shí)符合或不符合規(guī)范。

        如果可以對(duì)同一產(chǎn)品單元的兩個(gè)或多個(gè)樣品進(jìn)行測(cè)試,或可以對(duì)同一樣品進(jìn)行重復(fù)測(cè)試,或可以對(duì)留樣進(jìn)行重復(fù)測(cè)試,則建議做重復(fù)測(cè)試。估算出對(duì)同一樣品所有測(cè)得值的平均值或所有重復(fù)測(cè)試的平均值和該平均值的不確定度,然后做出相應(yīng)的判斷。

        (5)如果測(cè)得值恰好為規(guī)定限值,則在指定的置信度水平上不可能做出是否符合規(guī)范的聲明。應(yīng)當(dāng)報(bào)告測(cè)得值與擴(kuò)展不確定度,并說(shuō)明在指定的置信度水平上無(wú)法證實(shí)符合或是不符合規(guī)范。endprint

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