●閔靜

雷公藤多甙對不同時(shí)間點(diǎn)腦出血模型大鼠細(xì)胞因子的影響

●閔靜

目的：探討雷公藤多苷對腦出血大鼠炎癥因子的影響；方法：采用膠原酶法制備腦出血動物模型，將36只大鼠隨機(jī)分為模型組、雷公藤多苷低、高劑量組共3組，每組12只；造模后6h腹腔注射藥物，每12小時(shí)1次，于造模后12、48h測各組大鼠腦組織含水量，腦組織炎癥因子水平；結(jié)果：與模型組比較，48h高劑量雷公藤多苷組腦組織含水量減少，高劑量組IL-1、TNF-α水平下降(P＜0.05)；結(jié)論：雷公藤多苷明顯降低炎癥因子水平，從而減輕出血性腦損傷。

雷公藤多苷；腦出血；IL-1；TNF-α；大鼠

腦出血指非外傷性腦實(shí)質(zhì)內(nèi)血管破裂引起的出血，隨著人口老年化進(jìn)程，老年性疾病發(fā)病率的日趨提高，腦出血已成為嚴(yán)重威脅人們的健康重要疾病；本實(shí)驗(yàn)通過觀察雷公藤多苷(tripterygium glycosides)對腦出血大鼠腦組織變化的影響。

1 材料與方法

1.1 動物分組與造模

健康雄性SD大鼠，體量為220～260g，清潔級，由湖北省動物實(shí)驗(yàn)中心提供；實(shí)驗(yàn)分組：大鼠隨機(jī)分為三組，模型組、雷公藤多苷低劑量組(50mg·kg-1)、高劑量組(100mg·kg-1)，每組12只，每組再分別觀察術(shù)后12、48h兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)。雷公藤多苷組術(shù)后6h腹腔注射藥物，其他組灌胃等量生理鹽水，以后每隔12h1次，共3次。腦出血模型：參照Rosenberg等[1]的方法。

1.2 藥品與儀器

雷公藤多苷，批號Z33020422，浙江恩德制藥有限公司；VII型膠原酶，美國Sigma公司產(chǎn)品；IL-1、TNF-α試劑盒，北京福瑞生物工程有限公司)。儀器：大鼠腦立體定位儀，微量注射儀(北京智鼠多寶生物科技有限責(zé)任公司；貝克曼生化分析儀(貝克曼庫爾特商貿(mào)有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 腦組織含水量測定

分別于術(shù)后第12h及48h，過量麻醉大鼠，快速斷頭取腦組織，用濾紙吸干腦表面液體和血跡，小塑料封口袋密閉全腦，電子天平稱濕重，然后放入80℃烤箱中，48h后稱干重。腦含水量計(jì)算公式：[(濕重-干重)/濕重]×100%。

1.3.2 IL-1、TNF-α 測定

取腦勻漿上清液，按放免試劑盒說明書，加入分離劑后充分混勻離心，吸上清，生化分析儀上測放射性。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

2 結(jié)果

2.1 雷公藤多苷對腦水腫的影響

從表1可見，12h時(shí)雷公藤多苷組腦出血后的腦組織含水量無明顯影響，48h時(shí)高劑量組雷公藤多苷組腦出血后的腦組織含水量減少，和模型組比較有顯著性差異(P＜0.05)。

表1 雷公藤多苷對大鼠腦組織含水量測定(±s)

表1 雷公藤多苷對大鼠腦組織含水量測定(±s)

-10.751±0.0061)0.767±0.011 0.739±0.0192)組別 劑量/mg·kg n 12小時(shí) 48小時(shí)模型組低劑量組高劑量組/50 100 12 12 12 0.769±0.0411)0.771±0.049 0.755±0.061

與模型組比較：均P＜0.05，下表同

2.2 雷公藤多苷對大鼠腦組織中IL-1，TNF-α含量的影響

與模型組比較12h時(shí)雷公藤多苷組IL-1無明顯差異，TNF-α有差異(P＜0.05)；48h時(shí)高劑量雷公藤多苷組大鼠IL-1、TNF-α水平下降(P＜0.05)，見表 2。

表2 雷公藤多苷對模型IL-1、TNF-α含量的影響(±s)

表2 雷公藤多苷對模型IL-1、TNF-α含量的影響(±s)

2.45±0.07 2.41±0.12 2.05±0.041)組別 數(shù)量 IL-1/ng·m L-1 TNF-α/ng·m L-1 12小時(shí) 48小時(shí) 12小時(shí) 48小時(shí)模型組低劑量組高劑量組12 12 12 3.27±0.32 3.19±0.63 3.10±0.54 3.50±0.15 3.22±0.12 3.04±0.051)2.51±0.05 2.42±0.23 2.08±0.041)

3 討論

腦出血(Intracerebral hemorrhage，ICH)繼發(fā)性神經(jīng)損傷對其發(fā)展起著非常重要作用。包括腦水腫、血-腦屏障破壞、炎性反應(yīng)參與腦出血的繼發(fā)性損傷[2-3]。雷公藤多苷(tripterygium glycosides)是從衛(wèi)矛科植物雷公藤根提取精制而成的一種脂溶性混合物，實(shí)驗(yàn)中可以看出雷公藤多苷組腦出血后的腦組織含水量減少，與模型組有顯著性差異(P＜0.05)；對顱腦損傷有一定保護(hù)作用。

腦出血時(shí)，炎性因子表達(dá)明顯增加，從而增加腦水腫、血管壁通透性，炎細(xì)胞向損傷部位集中。IL-1介導(dǎo)白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附，TNF-α能促進(jìn)中性粒細(xì)胞浸潤并釋放蛋白水解酶，與神經(jīng)元損害密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)48h時(shí)高劑量雷公藤多苷組IL-1、TNF-α水平明顯下降，與模型組有顯著性差異(P＜0.05)，說明其對損傷腦組織發(fā)揮保護(hù)作用，使局部炎癥反應(yīng)減輕，可能是其發(fā)揮效果的重要機(jī)制。

(作者單位：湖北職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院)

[1] Rosenberg G A,M un-Bryce S,Korn feld M,eta l.Co lla-genase induced intracerebral hem orrhage in rats[J].Stroke,1990,21 (5)：801-807.

[2]趙性泉,王擁軍.腦出血后繼發(fā)性水腫和神經(jīng)損害的機(jī)制[J].國外醫(yī)學(xué),腦血管疾病分冊,2004；12(8)：571-574.

[3]楊建權(quán),田學(xué)成,趙斌杰,汪林濤.早期微創(chuàng)碎吸術(shù)治療高血壓腦出血療效及對患者血清TNF-α、IL-6水平和生活質(zhì)量的影響[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2017,26(13)：1456-1458.