郭黎媛，靳吉寅，段慧玲

（1.山西杏花村汾酒廠股份有限公司技術(shù)中心，山西汾陽032205； 2.山西杏花村汾酒廠股份有限公司質(zhì)量檢測中心，山西汾陽032205）

菊花提取方式的研究與應(yīng)用

郭黎媛1，靳吉寅1，段慧玲2

（1.山西杏花村汾酒廠股份有限公司技術(shù)中心，山西汾陽032205； 2.山西杏花村汾酒廠股份有限公司質(zhì)量檢測中心，山西汾陽032205）

菊花是菊科植物，屬于藥食兩用藥材，是竹葉青酒中配制藥材之一。本試驗對菊花中的總黃酮的提取方法進行了研究，以蘆丁為標準品對提取液中的總黃酮含量進行測定，測定結(jié)果表明，由超聲輔助提取得到的菊花總黃酮含量為4.2%，冷浸法提取得到的菊花總黃酮含量為3.3%，超聲輔助提取工藝優(yōu)于冷浸法。并且將菊花提取液在汾酒基酒中進行添加試驗，所得酒體清亮，微黃透明，菊花芳香怡人，口感醇和，悠長。

配制酒； 菊花； 提??； 總黃酮

菊花是菊科植物，屬于藥食兩用藥材。菊花具有多種藥理作用：疏散風(fēng)熱、明目、清熱解毒。主要治療頭痛、眩暈、目赤、心胸?zé)?、疔瘡、腫毒等癥?，F(xiàn)代藥理研究表明，菊花具有治療冠心病、降低血壓、預(yù)防高血脂、抗菌、抗病毒、抗炎、抗衰老等多種藥理活性。菊花的化學(xué)成分比較復(fù)雜，其中黃酮類化合物是其主要有效成分。目前研究表明，黃酮類化合物能防治心腦血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)疾病，具有抗炎抑菌、降血糖以及增強免疫功能等藥理作用。通過文獻資料的查詢，關(guān)于菊花中總黃酮的提取文獻較多，本試驗結(jié)合菊花品種與在汾酒中的感官應(yīng)用進行研究，對菊花總黃酮的提取工藝選用超聲輔助提取方法進行正交試驗，最終確定最佳提取工藝。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

樣品：菊花；65%vol汾酒；45%vol汾酒。

試劑：乙醇、乙醇（AR）、氫氧化鈉、硝酸鋁、亞硝酸鈉等均為市售分析純；蒸餾水；蘆丁對照品（Dr.ehrenstorfer Gmbh）；Rutin hydrate C 168000；Lot:80212 0.5 g 98.0%R-code 36137138S-code 22-25。

儀器設(shè)備：紫外可見分光光度計(uv-2450日本島津公司)；超聲波清洗機（LQ-300DE昆山超聲波儀器有限公司）；電子天平(梅特勒電子天平)；具塞三角瓶；玻璃棒；燒杯；微量進樣器；電子秤；移液管；量筒；濾紙；漏斗；容量瓶。

1.2 實驗方法

1.2.1 標準曲線的繪制

1.2.1.1 蘆丁標準液的制備

精密稱取蘆丁對照品26.32 mg，用體積濃度70%的乙醇溶解于100 mL容量瓶中，定容后搖勻，制成質(zhì)量濃度為263.2 mg/L的蘆丁標準品溶液。取蘆丁標準溶液，以相應(yīng)不加標準品溶液為空白，用紫外可見分光光度計在200～600 nm波長范圍內(nèi)進行全波長掃描得蘆丁標準品最大吸收波長為λmax=510 nm。

1.2.1.2 蘆丁標準曲線的繪制

精確量取上述蘆丁標準品溶液0 mL、2.0 mL、4.0 mL、6.0 mL、8.0 mL、10.0 mL、12.0 mL，分別置于50 mL容量瓶中，加5%亞硝酸鈉溶液2.0 mL，搖勻放置6 min，加10%硝酸鋁2.0 mL，搖勻放置6 min，加10%氫氧化鈉溶液20.0 mL，再加水至刻度，搖勻放置15 min，配制成標準曲線工作液。以相應(yīng)的試劑溶液為空白，在510 nm處測定吸光度，以溶液質(zhì)量濃度C為橫坐標，吸光度A為縱坐標，線性回歸得到工作曲線為：A=12.268C-0.0025，R2=0.9998(N=6)。結(jié)果見圖1。

圖1 蘆丁標準曲線

1.2.2 菊花超聲提取液制備方法

準確稱取烘干至恒重的菊粉X g，按試驗中優(yōu)選的料液比加入Y%vol乙醇，按限定的時間和溫度進行超聲波提取后冷卻過濾，取待測液1 mL于50 mL容量瓶中，定容。用分光光度計在510 nm處測定其吸光度,并按1.2.1.2中的方法檢測菊花總黃酮含量。

1.2.3 提取條件選擇

根據(jù)初步預(yù)試驗結(jié)果,采用L16(4)4正交試驗設(shè)計正交表,對乙醇濃度、提取時間、提取溫度、料液比4因子在4個水平上進行優(yōu)選,結(jié)果采用直觀分析和方差分析。選出提取效果較好的組合，具體見表1。

表1 菊花提取物試驗方法

2 結(jié)果與分析

2.1 正交試驗及試驗結(jié)果分析（見表2和表3）

總平均數(shù)=0.301625，總離差平方和QT=0.036234。

2.2 提取工藝條件的確定

由正交試驗數(shù)據(jù)可知，根據(jù)R值大小，判斷因素對試驗結(jié)果影響的主次順序：D＞A＞C＞B，最優(yōu)組合水平為D3A4C4B3，根據(jù)方差分析得，在α=0.1的顯著水平下，可知因素D對試驗結(jié)果有顯著影響，其余3個因素則無顯著影響。

通過正交試驗結(jié)果直觀分析和方差分析得出菊花總黃酮提取的最佳工藝條件為D3A4C4B3，即料液比 1∶20（g/mL），乙醇濃度 70%vol，提取溫度60℃，提取時間50 min。

2.3 驗證試驗

由正交試驗設(shè)計得到最佳提取工藝，并對最佳條件進行驗證試驗，在最優(yōu)條件下超聲波提取菊花中總黃酮吸光度值為0.453，計算得菊花中總黃酮含量，為4.2%。

表2 正交試驗設(shè)計及結(jié)果

表3 方差分析

2.4 冷浸提取方法的對比及測定

按比例稱取菊花,放入65%vol汾酒中,在避光條件下放置30 d，然后過濾得濾液，取待測液1 mL于50 mL容量瓶中，定容。用分光光度計在510 nm處測定其吸光度,并按1.2.1.2中的方法檢測菊花總黃酮含量，測得吸光度值為0.397,計算得菊花中總黃酮含量，為3.3%。

2.5 菊花提取液在汾酒中的應(yīng)用試驗

2.5.1 基酒的確定

本試驗選取優(yōu)質(zhì)汾酒為基酒，酒精度為45%vol。

2.5.2 提取液在酒中加量的確定

在基酒中將菊花提取液按0.5‰～5‰加入不同酒體中，按一定量加入后的酒體有明顯改善,經(jīng)項目組評酒員反復(fù)品評后，確定調(diào)味液的最佳添加量，保留了藥材香和味的有效成分，而且增加了酒體口感的豐富度。酒體微黃，菊花芳香幽雅，酒體綿軟協(xié)調(diào)，具有本品的特殊風(fēng)格，可以在酒中使用。

2.5.3 不同浸提液在基酒中的感官品評結(jié)果(見表4)

表4 不同浸提液在基酒中的感官品評結(jié)果

3 結(jié)論

本試驗通過對菊花提取工藝的研究，確定了使用超聲提取技術(shù)從菊花中提取黃酮類物質(zhì)，得到的優(yōu)化條件為：料液比1∶20（g/mL），乙醇濃度70%vol，提取溫度60℃，提取時間50 min。并且測得由超聲輔助提取得到的菊花總黃酮含量為4.2%，冷浸法提取得到的菊花總黃酮含量為3.3%，此方法與傳統(tǒng)提取法相比，時間縮短，提取率增加，并且在酒中的應(yīng)用效果優(yōu)于冷浸提取液。

[1]賈凌云,孫啟時,黃順旺.滁菊花中黃酮類化學(xué)成分的分離與鑒定[J].中國藥物化學(xué)雜志,2003,13(3)：159-161.

[2]李英霞,彭廣芳,王小梅,等.菊花的藥理研究進展[J].時珍國醫(yī)國藥,1998,9(6)：580.

[3]斯琴格日樂,恩德,李英杰.懷菊花總黃酮的提取工藝及其抗氧化活性[J].光譜實驗室,2013(2)：513-518.

[4]趙兵,王玉春,歐陽藩,等.超聲波在植物提取中的應(yīng)用[J].中草藥,1999(9)：381-383.

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Extraction of Total Flavonoids from Chrysanthemum

GUO Liyuan1,JIN Jiyin1and DUAN Huiling2
(1.Technical Center of Xinghuacun Fenjiu Distillery Co.Ltd.,Fenyang,Shanxi 032205;2.Quality Inspection Center of Xinghuacun Fenjiu Distillery Co.Ltd.,Fenyang,Shanxi 032205,China)

Chrysanthemum is a kind of herb that has both medicinal and edible values,and is also one of the medicinal herbs used for producing Zhuyeqing liquor.In this study,the extraction of total flavonoids from chrysanthemum was investigated.Rutin was used as the standard to determine total flavonoids content in the extract.The determination results showed that,total flavonoids content in the extract by ultrasonic assisted extraction was 4.2%,and total flavonoids content in the extract by cold-soak extraction was 3.3%.Ultrasonic assisted extraction was better than cold-soak extraction.Besides,chrysanthemum extract was added in Fenjiu base liquor for experiments.The produced liquor was transparent and yellowish with pleasant aroma and enjoyable taste.

liqueur;chrysanthemum;extraction;total flavonoids

TS262.3；TS261.4

A

1001-9286（2017）10-0065-03

10.13746/j.njkj.2017145

2017-05-31

郭黎媛(1981-)，女，山西人，本科，工程師，從事保健酒新品研發(fā)工作。

優(yōu)先數(shù)字出版時間：2017-07-19；地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20170719.1107.005.html。