劉雪梅

[摘要] 目的 探究細(xì)菌耐藥表型檢測(cè)中通過(guò)微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴(kuò)散法進(jìn)行檢測(cè)所存在的應(yīng)用價(jià)值。方法 選取學(xué)院教學(xué)醫(yī)院細(xì)菌室金黃色葡萄球菌80例，均在2014年1月—2016年6月分離保存。為檢測(cè)細(xì)菌耐藥表型，對(duì)細(xì)菌分別運(yùn)用微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴(kuò)散法進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析研究。結(jié)果 在細(xì)菌耐藥表型方面，微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴(kuò)散法的檢測(cè)結(jié)果相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。但在臨界范圍陽(yáng)性菌株的檢測(cè)中，微生物分析儀法檢測(cè)結(jié)果更準(zhǔn)確。結(jié)論 細(xì)菌耐藥表型檢測(cè)中通過(guò)微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴(kuò)散法進(jìn)行檢測(cè)所存在的應(yīng)用價(jià)值均較顯著，但在臨界范圍陽(yáng)性菌株的檢測(cè)中，微生物分析儀法對(duì)其檢測(cè)更加靈敏，同時(shí)具有較高的準(zhǔn)確性和特異性，能夠?yàn)榕R床診療過(guò)程提供更加準(zhǔn)確的藥敏結(jié)果，存在一定推廣價(jià)值。

[關(guān)鍵詞] 微生物分析儀法；常規(guī)紙片擴(kuò)散法；細(xì)菌耐藥表型；臨床價(jià)值

[中圖分類號(hào)] R7 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1672-5654（2017）06（b）-0051-02

近年來(lái)，由于各種不良因素影響，導(dǎo)致大氣中的細(xì)菌總量明顯增多，嚴(yán)重威脅人類身體健康，患者得到有效治療的前提在于加強(qiáng)對(duì)各類型細(xì)菌的有效研究，從而更好地治療疾病[1-2]。微生物分析儀通過(guò)尖端的數(shù)據(jù)分析軟件和獨(dú)創(chuàng)的檢測(cè)原理共同作用，從而對(duì)細(xì)菌進(jìn)行鑒定，并進(jìn)行藥敏檢測(cè)。微生物分析儀的主要功能在于自動(dòng)的菌落計(jì)數(shù)和對(duì)抑菌區(qū)的有效測(cè)量。微生物分析儀在單位、醫(yī)院及工業(yè)領(lǐng)域進(jìn)行微生物菌落計(jì)數(shù)和含量分析、抗生素的抗菌性及細(xì)菌的抗生素敏感性分析等工作中較為適用。該文為探究細(xì)菌耐藥表型檢測(cè)中通過(guò)微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴(kuò)散法進(jìn)行檢測(cè)所存在的應(yīng)用價(jià)值，選取在2014年1月—2016年6月該院分離保存的金黃色葡萄球菌80例，具體內(nèi)容如下文所示。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將在2014年1月—2016年6月教學(xué)醫(yī)院微生物實(shí)驗(yàn)室分離保存的金黃色葡萄球菌80例確定為該次研究對(duì)象。對(duì)細(xì)菌進(jìn)行微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴(kuò)散法檢測(cè)，其中常規(guī)紙片擴(kuò)散法檢測(cè)中的藥敏紙片、M-H培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基、血培養(yǎng)基及微生物分析儀檢測(cè)中的配套檢測(cè)板均出自正規(guī)廠家。

1.2 方法

1.2.1常規(guī)紙片擴(kuò)散法檢測(cè)細(xì)菌藥敏 ①檢測(cè)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌。在培養(yǎng)基上復(fù)種金黃色葡萄球菌，將克隆好的金黃色葡萄球菌制成金黃色葡萄球菌懸濁液，濃度為0.5麥?zhǔn)蠁挝?，在M-H平板上進(jìn)行均勻涂布，并在M-H平板上將30 ug頭孢西丁和1 ug苯唑西林兩種藥敏紙片固定妥當(dāng)，將其置于35℃的環(huán)境中進(jìn)行孵育，孵育時(shí)間一般為24 h，孵育完成后對(duì)抑菌環(huán)直徑進(jìn)行有效量取，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)為：苯唑西林抑菌環(huán)直徑低于11 mm或頭孢西丁抑菌環(huán)直徑低于19 mm[3-4]。②紅霉素耐藥克林霉素誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)。在培養(yǎng)基上復(fù)種金黃色葡萄球菌，將克隆好的金黃色葡萄球菌制成金黃色葡萄球菌懸濁液，濃度為0.5麥?zhǔn)蠁挝?，在M-H平板上進(jìn)行均勻涂布，并在M-H平板上將15 ug紅霉素紙片和2 ug克林霉素紙片兩種藥敏紙片固定妥當(dāng)，15 mm為兩者中心點(diǎn)相距距離，將其置于35℃的環(huán)境中進(jìn)行孵育，孵育時(shí)間一般為24 h，對(duì)靠近紅霉素紙片一側(cè)的克林霉素抑菌環(huán)進(jìn)行觀察，觀察其有無(wú)截平現(xiàn)象發(fā)生，也就是D型環(huán)形成。若為陽(yáng)性，則存在D型環(huán)，表明克林霉素誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)為陽(yáng)性結(jié)果。若為陰性，則不存在D型環(huán)，表明克林霉素誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)為陰性結(jié)果[5]。

1.2.2微生物分析儀檢測(cè)細(xì)菌藥敏 金黃色葡萄球菌懸濁液的配制濃度為0.5麥?zhǔn)蠁挝唬瑱z測(cè)時(shí)，使用梅里埃AST-GP67檢測(cè)板進(jìn)行操作。

1.3 觀察項(xiàng)目

觀察金黃色葡萄球菌通過(guò)微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴(kuò)散法兩種方法進(jìn)行檢測(cè)的結(jié)果情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

選擇SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析資料；計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌檢測(cè)結(jié)果情況

檢測(cè)80株金黃色葡萄球菌，對(duì)抑菌環(huán)直徑進(jìn)行測(cè)量，僅對(duì)苯唑西林呈陽(yáng)性、僅對(duì)頭孢西丁呈陽(yáng)性及對(duì)苯唑西林和頭孢西丁均呈陽(yáng)性的菌株數(shù)分別為3株、2株及48株。總陽(yáng)性率為66.3%。則對(duì)苯唑西林和頭孢西丁均呈陰性的菌株數(shù)27株，具體情況如表1所示。

2.2 霉素耐藥克林霉素誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)結(jié)果情況

檢測(cè)80株金黃色葡萄球菌，其中出現(xiàn)D型環(huán)的有45株，且對(duì)克林霉素誘導(dǎo)為陽(yáng)性結(jié)果。對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，結(jié)合表1結(jié)果，53株耐甲氧西林金黃色葡萄球菌中，對(duì)克林霉素誘導(dǎo)為陽(yáng)性菌株數(shù)為32例，所占比率為60.4%

2.3 微生物分析儀檢測(cè)細(xì)菌結(jié)果情況

檢測(cè)80株金黃色葡萄球菌，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的菌株數(shù)為54株，在克林霉素誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)中呈陽(yáng)性的菌株數(shù)為48株，結(jié)果情況如表2所示。

2.4 微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴(kuò)散法兩種檢測(cè)方法分析

在耐甲氧西林金黃色葡萄球菌和紅霉素耐藥克林霉素誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)中，常規(guī)紙片擴(kuò)散法陽(yáng)性檢出率分別為66.3%、60.4%，微生物分析儀法陽(yáng)性檢出率分別為67.5%、60.0%，兩種檢測(cè)方法在耐甲氧西林金黃色葡萄球菌和紅霉素耐藥克林霉素誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)中陽(yáng)性檢測(cè)率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.267，P>0.05）。但在常規(guī)紙片擴(kuò)散法的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌檢測(cè)中，陰性例數(shù)為27例，但通過(guò)微生物分析儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，其中有1例為耐甲氧西林金黃色葡萄球菌陽(yáng)性。

3 討論

在各種致病菌的影響下，使得各類型疾病的發(fā)生率呈現(xiàn)逐年增長(zhǎng)的趨勢(shì)，降低人類生存質(zhì)量，給社會(huì)和整個(gè)家庭帶來(lái)沉重負(fù)擔(dān)，對(duì)患者進(jìn)行有效治療尤為重要。因此必須加強(qiáng)對(duì)各類致病菌的有效研究[6-7]。

微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴(kuò)散法是檢測(cè)細(xì)菌的常用方法，能夠評(píng)估和推斷常用細(xì)菌的耐藥表型，兩種檢測(cè)方法各有其利弊，在監(jiān)測(cè)細(xì)菌方面均具有一定臨床價(jià)值[8]。

該文通過(guò)探究細(xì)菌耐藥表型檢測(cè)中通過(guò)微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴(kuò)散法進(jìn)行檢測(cè)所存在的應(yīng)用價(jià)值，臨床數(shù)據(jù)結(jié)果顯示，在耐甲氧西林金黃色葡萄球菌和紅霉素耐藥克林霉素誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)中，常規(guī)紙片擴(kuò)散法陽(yáng)性檢出率分別為66.3%、60.4%，微生物分析儀法陽(yáng)性檢出率分別為67.5%、60.0%，兩種檢測(cè)方法在耐甲氧西林金黃色葡萄球菌和紅霉素耐藥克林霉素誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)中陽(yáng)性檢測(cè)率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。但通過(guò)微生物分析儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，在常規(guī)紙片擴(kuò)散法的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌檢測(cè)的27例陰性例數(shù)中有1例為耐甲氧西林金黃色葡萄球菌陽(yáng)性。綜上所述，細(xì)菌耐藥表型檢測(cè)中通過(guò)微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴(kuò)散法進(jìn)行檢測(cè)均存在的顯著應(yīng)用價(jià)值，微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴(kuò)散法相比，在臨界范圍陽(yáng)性菌株的檢測(cè)中，其準(zhǔn)確性和特異性較高，存在顯著推廣價(jià)值。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 黃烈，張銀輝，聶署萍，等.全自動(dòng)微生物分析儀檢測(cè)細(xì)菌耐藥表型性能評(píng)價(jià)[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（5）：602-604.

[2] Stefanie Krajewski，Johannes Rheinlaender，Philip Ries，et al.Bacterial interactions with proteins and cells relevant to the development of life-threatening endocarditis studied by use of a quartz-crystal microbalance[J].Analytical and bioanalytical chemistry，2014，406（14）：3395-3406.

[3] 張國(guó)雄，古漢福，范曉怡，等.VITEK2 Compact全自動(dòng)微生物分析儀專家系統(tǒng)細(xì)菌耐藥表型檢測(cè)能力的評(píng)價(jià)[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（8）：1015-1016.

[4] 宋逸萍，宛傳丹，馬月琴，等.VITEK2Compact高級(jí)專家系統(tǒng)對(duì)腸桿菌科及銅綠假單胞菌中β-內(nèi)酰胺酶耐藥表型鑒別能力分析[J].江蘇大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2012，22（1）：77-79.

[5] 宋逸萍，宛傳丹.臨床主要革蘭陰性菌耐藥表型的檢測(cè)與分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，22（24）：5455-5457.

[6] 陳儉，姜中其，唐一鳴，等.仔豬黃白痢大腸桿菌耐藥性檢測(cè)及ERIC圖譜分析[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)：農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版，2010，36（2）：125-132.

[7] Jaranowska P，Cydzik-Kwiatkowska A，Zielinska M，et al.Configuration of biological wastewater treatment line and influent composition as the main factors driving bacterial community structure of activated sludge[J].World Journal of Microbiology &；amp； Biotechnology，2013，29（7）：1145-1153.

[8] 李莉，趙自云，鄧華，等.微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴(kuò)散法在細(xì)菌耐藥表型檢測(cè)中的比較[J].氨基酸和生物資源，2014，36（2）：67-69，76.

（收稿日期：2017-03-15）