婁淑清,熊向前
MACC1及c-met在卵巢癌中的表達及臨床意義
婁淑清,熊向前
目的 分析結腸癌轉(zhuǎn)移相關基因1(MACC1)及c-met在卵巢癌中的表達及臨床意義。方法 采用免疫組織化學法檢測MACC1及c-met蛋白在卵巢癌中的表達情況,并分析其與臨床病理特征的相關性。對78例卵巢癌患者采用電話、信件及門診檢查隨訪,進行生存分析。結果 MACC1及c-met蛋白在卵巢癌中的陽性表達率分別為78.21%和70.51%,MACC1及 c-met的表達呈正相關(r=0.468,P<0.01)。隨訪結果提示 MACC1和 c-met陽性患者生存率顯著低于陰性患者(P<0.05)。結論 MACC1及c-met蛋白可能參與了卵巢癌的發(fā)生和進展。
卵巢癌;結腸癌轉(zhuǎn)移相關基因1;c-met;生存分析
Abstract:Objective To analyze expression and its clinical significance of metastasis associated in colon cancer 1(MACC1)and c-met in ovarian cancer. Methods Expression of MACC1 and c-met in ovarian cancer were detected by using immunohistochemical method,and its correlation with clinicopathological features were analyzed.Follow-up and survival analysis were carried out for 78 patients. Results Expression rate of MACC1 and c-met in ovarian cancer were 78.21%and 70.51%,respectively.Expression of MACC1 and c-met protein were positively correlated with ovarian cancer(r=0.468,P<0.01).The follow-up results showed that positive patients survival rate of MACC1 and c-met were significantly lower than that of negative patients(P<0.05).Conclusion MACC1 and c-met proteins might be involved in the development and progression of ovarian cancer.
Key words:ovarian cancer;metastasis associated in colon cancer 1;c-met;survival analysis
卵巢癌為死亡率最高的惡性腫瘤,一般就診時70%患者已處于晚期,而卵巢癌侵襲、轉(zhuǎn)移和復發(fā)是導致患者生存率較低的重要原因[1]。目前其發(fā)病機制還不明確,可能與內(nèi)分泌、遺傳、環(huán)境相關。研究顯示,結腸癌轉(zhuǎn)移相關基因1(metastasis associated in colon cancer 1,MACC1)在結腸癌、肺癌、肝癌等惡性腫瘤中高表達,與腫瘤多種生物學行為密切相關[2]。而c-met為肝細胞生長因子酪氨酸激酶受體蛋白,與MAPK信號通路和 PI3K信號通路相關,可通過級聯(lián)反應調(diào)節(jié)腫瘤細胞的增殖和凋亡[3]。卵巢癌MACC1蛋白、c-met蛋白與卵巢癌發(fā)生和進展的具體機制不明確[4]。為了探討 MACC1及 c-met與卵巢癌的臨床、病理及分子機制,本研究采用免疫組織化學方法檢測卵巢癌組織中的MACC1及c-met蛋白水平,分析其與臨床病理特征的相關性,現(xiàn)報道如下。
1.1 臨床治療 收集2010年1月至2016年1月我院病理科存檔的卵巢癌石蠟標本78例,年齡25~65(41.6±5.2)歲。術前均未接受激素治療,且無其他腫瘤疾病。其中,淋巴結轉(zhuǎn)移25例,無淋巴結轉(zhuǎn)移53例;組織學分級:Ⅰ級16例,Ⅱ級29例,Ⅲ級33例;臨床分期:Ⅰ期 42例,Ⅱ期 24例,Ⅲ期 12例。另收集35例術后標本的邊緣,病理確診為正常的卵巢組織。
1.2 主要試劑 兔抗人MACC1多克隆抗體(美國Sigma公司);兔抗人c-met多克隆抗體(北京博奧森生物技術有限公司);DAB顯色試劑盒、SP免疫組化試劑盒(北京中杉金橋生物技術有限公司)。
1.3 方法 標本均采用10%甲醛固定,常規(guī)脫水和石蠟包埋,連續(xù)切片,微波進行常規(guī)修復,采用常規(guī)免疫組織化學法進行染色,同時PBS液代替一抗制作陰性對照切片。
1.4 結果判定 MACC1和c-met均為胞質(zhì)染色,部分胞膜染色,其中呈棕黃色顆粒狀或片狀為陽性細胞。雙盲法讀片,隨機選取10個高倍視野,每個視野計數(shù)100個細胞。其中染色強度:無著色0分,淺黃色1分,棕黃色2分,棕褐色3分;陽性細胞百分比:陰性 0分,陽性細胞 <25%1分,25% ~50%2分,51%~75%3分,>75%4分;兩項指標積分相乘,乘積>3為陽性。
1.5 隨訪情況 采用電話、信件及門診檢查進行隨訪,以手術治療日期為隨訪起點,隨訪0.5~6 a。
1.6 統(tǒng)計學分析 采用SPSS 18.0統(tǒng)計學軟件進行分析。MACC1和 c-met的陽性表達率比較采用 χ2檢驗,相關分析采用Spearman相關性檢驗,隨訪數(shù)據(jù)采用 log rank test檢驗,檢驗水準 α=0.05。
2.1 MACC1和 c-met在卵巢癌組織的表達MACC1在卵巢癌組織中的陽性表達率(78.21%,61/78)明顯高于正常卵巢組織陽性表達率(5.71%,2/35)(χ2=51.463,P<0.01)。c-met在在卵巢癌組織中的陽性表達率(70.51%,55/78)明顯高于正常卵巢組織陽性表達率(8.57%,3/35)(χ2=48.253,P<0.01)。
圖1 MACC1及c-met蛋白在卵巢癌的表達 (SP,×200)
2.2 MACC1及c-met蛋白與卵巢癌臨床病理特征MACC1及c-met蛋白表達與年齡、月經(jīng)、組織類型均無明顯相關性 (P>0.05),而與組織學分級、臨床分期、淋巴結轉(zhuǎn)移、浸潤程度有相關性(P<0.05),見表 1。
表1 MACC1及c-met蛋白在卵巢癌中的表達與臨床病理特征的關系 例(%)
2.3 MACC1與c-met相關性分析 卵巢癌組織中MACC1與c-met的表達具有明顯的正相關性(rs=0.468,P=0.000 1),見表 2。
表2 MACC1與c-met相關性分析 例(%)
2.4 MACC1與卵巢癌預后 78例卵巢癌患者,5例失訪,隨訪患者中,MACC1陽性患者生存率低于陰性者(χ2=11.191,P=0.001),生存曲線見圖 2。
圖2 卵巢癌MACC1蛋白表達生存曲線
2.4.2 c-met與卵巢癌預后的關系 78例卵巢癌患者,5例失訪,隨訪患者中,c-met陽性患者生存率低于陰性者(χ2=17.388,P=0.000),生存曲線見圖 3。
圖3 卵巢癌c-met蛋白表達生存曲線
MACC1為HGF/c-met信號通路的調(diào)節(jié)因子,與結腸癌細胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移關系密切,而且有報道MACC1與胃癌、肺癌和肝癌細胞的轉(zhuǎn)移和預后相關[5-6],說明MACC1可以作為評價惡性腫瘤轉(zhuǎn)移和預后的標志物[7]。而 c-met為肝細胞生長因子的受體,對腫瘤組織生物學行為存在一定的影響,參與了腫瘤細胞的有絲分裂、遷移和形態(tài)的發(fā)生[8]。通過和部分癌基因產(chǎn)物和調(diào)節(jié)蛋白作用,降解腫瘤組織周圍基質(zhì),促進腫瘤組織內(nèi)血管的生成,影響腫瘤細胞增殖、分化[9]。通過 RNA干擾下調(diào)腫瘤細胞中MACC1蛋白水平,結果顯示腫瘤細胞增殖及侵襲能力明顯降低,這也提示卵巢癌的發(fā)生和進展與MACC1以及 c-met基因的激活相關[10]。
本研究結果,卵巢癌組織的MACC1和c-met表達率明顯高于正常卵巢組織,與患者年齡、月經(jīng)以及組織類型無相關性,而與組織學分級、臨床分期、淋巴結轉(zhuǎn)移以及浸潤程度顯著相關,提示兩者可能參與了卵巢腫瘤的發(fā)生和進展。腫瘤組織學分級越低、臨床分期越晚、浸潤程度越高,且發(fā)生淋巴結轉(zhuǎn)移,則MACC1和c-met蛋白表達性率越高[11]。而且MACC1和c-met陽性率較高的腫瘤患者生存時間短,并伴有預后不良,本研究結果中生存期越短的卵巢癌患者,MACC1和c-met蛋白表達明顯增加。
研究顯示,MACC1參與了腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移,可通過下游的HGF/c-met信號通路上調(diào) c-met蛋白水平,調(diào)節(jié)腫瘤相關基因參與凋亡、侵襲以及血管的發(fā)生和卵巢癌的侵襲和轉(zhuǎn)移[12]。而c-met位于細胞膜,為生長因子酪氨酸激酶跨膜受體家族[13]。HGF/c-met對其下游Grb2-Ras-MAPK信號通路具有一定的調(diào)節(jié)作用,高表達MACC1蛋白可激活 Grb2-Ras-MAPK信號通路,Grb2-Ras-MAPK信號通路又可以反饋上調(diào)MACC1基因的表達水平,這也提示HGF/c-met信號通路和Grb2-Ras-MAPK信號通路存在正反饋環(huán)路調(diào)節(jié)通路,對侵襲和轉(zhuǎn)移具有一定的影響[14]。本研究結果顯示,卵巢癌組織中的 MACC1蛋白和 c-met蛋白表達存在明顯的相關性,提示MACC1基因可能通過c-met途徑促進腫瘤細胞侵襲和轉(zhuǎn)移,其中MACC1蛋白可以有效地激活HGF,有活性的HGF與 c-met結合,激活 HGF/c-met信號通路[15],并導致磷酸化的c-met激活酪氨酸激酶,級聯(lián)激活 P13K/Akt、Wnt/β-catenin以及 MAPK信號多條信號通路,調(diào)節(jié)卵巢癌組織細胞的增殖、分化和侵襲。
綜述以上,MACC1及 c-met蛋白在卵巢癌中陽性表達明顯高于正常卵巢組織,而且 MACC1及 cmet在卵巢癌中的表達呈正相關。隨訪結果顯示MACC1和c-met陽性患者生存率顯著低于陰性患者,因此MACC1及c-met蛋白可能參與了卵巢癌的發(fā)生和進展。
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Expression and Its Clinical Significance of MACC1 and c-met in Ovarian Cancer
LOU Shu-qing,XIONG Xiang-qian
(Obstetrics and Gynecology,People′s Hospital of Shaoling,Luohe 462000,China)
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A
1672-688X(2017)03-0175-04
10.15926/j.cnki.issn1672-688x.2017.03.005
2017-04-11
漯河市召陵區(qū)人民醫(yī)院婦產(chǎn)科,河南漯河462000
婁淑清(1980—),女,河南漯河人,主治醫(yī)師,從事婦產(chǎn)科臨床工作。
熊向前,女,副主任醫(yī)師,E-mail:125020175@qq.com