婁淑清，熊向前

MACC1及c-met在卵巢癌中的表達及臨床意義

婁淑清，熊向前

目的 分析結腸癌轉(zhuǎn)移相關基因1（MACC1）及c-met在卵巢癌中的表達及臨床意義。方法 采用免疫組織化學法檢測MACC1及c-met蛋白在卵巢癌中的表達情況，并分析其與臨床病理特征的相關性。對78例卵巢癌患者采用電話、信件及門診檢查隨訪，進行生存分析。結果 MACC1及c-met蛋白在卵巢癌中的陽性表達率分別為78.21%和70.51%，MACC1及 c-met的表達呈正相關（r＝0.468，P＜0.01）。隨訪結果提示 MACC1和 c-met陽性患者生存率顯著低于陰性患者（P＜0.05）。結論 MACC1及c-met蛋白可能參與了卵巢癌的發(fā)生和進展。

卵巢癌；結腸癌轉(zhuǎn)移相關基因1；c-met；生存分析

Abstract：Objective To analyze expression and its clinical significance of metastasis associated in colon cancer 1（MACC1）and c-met in ovarian cancer. Methods Expression of MACC1 and c-met in ovarian cancer were detected by using immunohistochemical method，and its correlation with clinicopathological features were analyzed.Follow-up and survival analysis were carried out for 78 patients. Results Expression rate of MACC1 and c-met in ovarian cancer were 78.21%and 70.51%，respectively.Expression of MACC1 and c-met protein were positively correlated with ovarian cancer（r＝0.468，P＜0.01）.The follow-up results showed that positive patients survival rate of MACC1 and c-met were significantly lower than that of negative patients（P＜0.05）.Conclusion MACC1 and c-met proteins might be involved in the development and progression of ovarian cancer.

Key words：ovarian cancer；metastasis associated in colon cancer 1；c-met；survival analysis

卵巢癌為死亡率最高的惡性腫瘤，一般就診時70%患者已處于晚期，而卵巢癌侵襲、轉(zhuǎn)移和復發(fā)是導致患者生存率較低的重要原因［1］。目前其發(fā)病機制還不明確，可能與內(nèi)分泌、遺傳、環(huán)境相關。研究顯示，結腸癌轉(zhuǎn)移相關基因1（metastasis associated in colon cancer 1，MACC1）在結腸癌、肺癌、肝癌等惡性腫瘤中高表達，與腫瘤多種生物學行為密切相關［2］。而c-met為肝細胞生長因子酪氨酸激酶受體蛋白，與MAPK信號通路和 PI3K信號通路相關，可通過級聯(lián)反應調(diào)節(jié)腫瘤細胞的增殖和凋亡［3］。卵巢癌MACC1蛋白、c-met蛋白與卵巢癌發(fā)生和進展的具體機制不明確［4］。為了探討 MACC1及 c-met與卵巢癌的臨床、病理及分子機制，本研究采用免疫組織化學方法檢測卵巢癌組織中的MACC1及c-met蛋白水平，分析其與臨床病理特征的相關性，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 臨床治療 收集2010年1月至2016年1月我院病理科存檔的卵巢癌石蠟標本78例，年齡25～65（41.6±5.2）歲。術前均未接受激素治療，且無其他腫瘤疾病。其中，淋巴結轉(zhuǎn)移25例，無淋巴結轉(zhuǎn)移53例；組織學分級：Ⅰ級16例，Ⅱ級29例，Ⅲ級33例；臨床分期：Ⅰ期 42例，Ⅱ期 24例，Ⅲ期 12例。另收集35例術后標本的邊緣，病理確診為正常的卵巢組織。

1.2 主要試劑 兔抗人MACC1多克隆抗體（美國Sigma公司）；兔抗人c-met多克隆抗體（北京博奧森生物技術有限公司）；DAB顯色試劑盒、SP免疫組化試劑盒（北京中杉金橋生物技術有限公司）。

1.3 方法 標本均采用10%甲醛固定，常規(guī)脫水和石蠟包埋，連續(xù)切片，微波進行常規(guī)修復，采用常規(guī)免疫組織化學法進行染色，同時PBS液代替一抗制作陰性對照切片。

1.4 結果判定 MACC1和c-met均為胞質(zhì)染色，部分胞膜染色，其中呈棕黃色顆粒狀或片狀為陽性細胞。雙盲法讀片，隨機選取10個高倍視野，每個視野計數(shù)100個細胞。其中染色強度：無著色0分，淺黃色1分，棕黃色2分，棕褐色3分；陽性細胞百分比：陰性 0分，陽性細胞 ＜25%1分，25% ～50%2分，51%～75%3分，＞75%4分；兩項指標積分相乘，乘積＞3為陽性。

1.5 隨訪情況 采用電話、信件及門診檢查進行隨訪，以手術治療日期為隨訪起點，隨訪0.5～6 a。

1.6 統(tǒng)計學分析 采用SPSS 18.0統(tǒng)計學軟件進行分析。MACC1和 c-met的陽性表達率比較采用 χ2檢驗，相關分析采用Spearman相關性檢驗，隨訪數(shù)據(jù)采用 log rank test檢驗，檢驗水準 α＝0.05。

2 結果

2.1 MACC1和 c-met在卵巢癌組織的表達MACC1在卵巢癌組織中的陽性表達率（78.21%，61／78）明顯高于正常卵巢組織陽性表達率（5.71%，2／35）（χ2＝51.463，P＜0.01）。c-met在在卵巢癌組織中的陽性表達率（70.51%，55／78）明顯高于正常卵巢組織陽性表達率（8.57%，3／35）（χ2＝48.253，P＜0.01）。

圖1 MACC1及c-met蛋白在卵巢癌的表達 （SP，×200）

2.2 MACC1及c-met蛋白與卵巢癌臨床病理特征MACC1及c-met蛋白表達與年齡、月經(jīng)、組織類型均無明顯相關性 （P＞0.05），而與組織學分級、臨床分期、淋巴結轉(zhuǎn)移、浸潤程度有相關性（P＜0.05），見表 1。

表1 MACC1及c-met蛋白在卵巢癌中的表達與臨床病理特征的關系 例（%）

2.3 MACC1與c-met相關性分析 卵巢癌組織中MACC1與c-met的表達具有明顯的正相關性（rs＝0.468，P＝0.000 1），見表 2。

表2 MACC1與c-met相關性分析 例（%）

2.4 MACC1與卵巢癌預后 78例卵巢癌患者，5例失訪，隨訪患者中，MACC1陽性患者生存率低于陰性者（χ2＝11.191，P＝0.001），生存曲線見圖 2。

圖2 卵巢癌MACC1蛋白表達生存曲線

2.4.2 c-met與卵巢癌預后的關系 78例卵巢癌患者，5例失訪，隨訪患者中，c-met陽性患者生存率低于陰性者（χ2＝17.388，P＝0.000），生存曲線見圖 3。

圖3 卵巢癌c-met蛋白表達生存曲線

3 討論

MACC1為HGF／c-met信號通路的調(diào)節(jié)因子，與結腸癌細胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移關系密切，而且有報道MACC1與胃癌、肺癌和肝癌細胞的轉(zhuǎn)移和預后相關［5-6］，說明MACC1可以作為評價惡性腫瘤轉(zhuǎn)移和預后的標志物［7］。而 c-met為肝細胞生長因子的受體，對腫瘤組織生物學行為存在一定的影響，參與了腫瘤細胞的有絲分裂、遷移和形態(tài)的發(fā)生［8］。通過和部分癌基因產(chǎn)物和調(diào)節(jié)蛋白作用，降解腫瘤組織周圍基質(zhì)，促進腫瘤組織內(nèi)血管的生成，影響腫瘤細胞增殖、分化［9］。通過 RNA干擾下調(diào)腫瘤細胞中MACC1蛋白水平，結果顯示腫瘤細胞增殖及侵襲能力明顯降低，這也提示卵巢癌的發(fā)生和進展與MACC1以及 c-met基因的激活相關［10］。

本研究結果，卵巢癌組織的MACC1和c-met表達率明顯高于正常卵巢組織，與患者年齡、月經(jīng)以及組織類型無相關性，而與組織學分級、臨床分期、淋巴結轉(zhuǎn)移以及浸潤程度顯著相關，提示兩者可能參與了卵巢腫瘤的發(fā)生和進展。腫瘤組織學分級越低、臨床分期越晚、浸潤程度越高，且發(fā)生淋巴結轉(zhuǎn)移，則MACC1和c-met蛋白表達性率越高［11］。而且MACC1和c-met陽性率較高的腫瘤患者生存時間短，并伴有預后不良，本研究結果中生存期越短的卵巢癌患者，MACC1和c-met蛋白表達明顯增加。

研究顯示，MACC1參與了腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移，可通過下游的HGF／c-met信號通路上調(diào) c-met蛋白水平，調(diào)節(jié)腫瘤相關基因參與凋亡、侵襲以及血管的發(fā)生和卵巢癌的侵襲和轉(zhuǎn)移［12］。而c-met位于細胞膜，為生長因子酪氨酸激酶跨膜受體家族［13］。HGF／c-met對其下游Grb2-Ras-MAPK信號通路具有一定的調(diào)節(jié)作用，高表達MACC1蛋白可激活 Grb2-Ras-MAPK信號通路，Grb2-Ras-MAPK信號通路又可以反饋上調(diào)MACC1基因的表達水平，這也提示HGF／c-met信號通路和Grb2-Ras-MAPK信號通路存在正反饋環(huán)路調(diào)節(jié)通路，對侵襲和轉(zhuǎn)移具有一定的影響［14］。本研究結果顯示，卵巢癌組織中的 MACC1蛋白和 c-met蛋白表達存在明顯的相關性，提示MACC1基因可能通過c-met途徑促進腫瘤細胞侵襲和轉(zhuǎn)移，其中MACC1蛋白可以有效地激活HGF，有活性的HGF與 c-met結合，激活 HGF／c-met信號通路［15］，并導致磷酸化的c-met激活酪氨酸激酶，級聯(lián)激活 P13K／Akt、Wnt／β-catenin以及 MAPK信號多條信號通路，調(diào)節(jié)卵巢癌組織細胞的增殖、分化和侵襲。

綜述以上，MACC1及 c-met蛋白在卵巢癌中陽性表達明顯高于正常卵巢組織，而且 MACC1及 cmet在卵巢癌中的表達呈正相關。隨訪結果顯示MACC1和c-met陽性患者生存率顯著低于陰性患者，因此MACC1及c-met蛋白可能參與了卵巢癌的發(fā)生和進展。

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Expression and Its Clinical Significance of MACC1 and c-met in Ovarian Cancer

LOU Shu-qing，XIONG Xiang-qian
（Obstetrics and Gynecology，People′s Hospital of Shaoling，Luohe 462000，China）

R363.1；R737.31

A

1672-688X（2017）03-0175-04

10.15926／j.cnki.issn1672-688x.2017.03.005

2017-04-11

漯河市召陵區(qū)人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，河南漯河462000

婁淑清（1980—），女，河南漯河人，主治醫(yī)師，從事婦產(chǎn)科臨床工作。

熊向前，女，副主任醫(yī)師，E-mail：125020175＠qq.com