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        柚皮苷對小鼠阿司匹林性胃潰瘍的保護作用

        2017-10-11 08:33:29王淑英王天祺朱琳淼胡孟強
        食管疾病 2017年3期
        關鍵詞:柚皮苷雷尼替丁胃潰瘍

        王淑英,王天祺,朱琳淼,馬 楠,謝 銳,胡孟強

        柚皮苷對小鼠阿司匹林性胃潰瘍的保護作用

        王淑英,王天祺,朱琳淼,馬 楠,謝 銳,胡孟強

        目的 觀察柚皮苷對小鼠阿司匹林性胃潰瘍的保護作用。方法 將60只Balb-c小鼠隨機分為空白組、模型組、柚皮苷高劑量組、柚皮苷低劑量組、雷尼替丁組,每組12只。灌胃第5天,除空白組外,其余各組用阿司匹林(200 mg·kg-1)連續(xù)灌胃5 d造模,計算或測定各組胃指數(shù)、潰瘍指數(shù)、pH值、血清中前列腺素 E2(PGE2)和環(huán)氧合酶-2(COX-2)的含量及胃組織學檢查。結果 與空白組比較,模型組的胃指數(shù)、潰瘍指數(shù)增大,pH減小,血清中PGE2和COX-2的濃度降低(均P<0.05);與模型組比較,柚皮苷可使胃指數(shù)、潰瘍指數(shù)減小,pH增大,血清中PGE2和COX-2的濃度增高(均P<0.05),且隨柚皮苷劑量增大作用增強。結論 柚皮苷對小鼠阿司匹林性胃潰瘍有一定的治療作用。

        柚皮苷;胃潰瘍;阿司匹林;小鼠

        Abstract:Objective In order to study the protective effect of naringin on gastric ulcer of mouse by aspirin. Methods The sixty Balb-c mice were randomly divided into blank control group,model group,high dose naringin group,low dose naringin group,ranitidine group,each group with twelve mice.On the fifth day,except the blank control group,the other groups were treated with aspirin(200mg·kg-1)for 5 days to make the gastric ulcer of mice.The gastric index,ulcer index,p H of gastric juice,the content of prostaglandin E2(PGE2)and cyclooxygenase 2(COX-2)in serum and the histological examination of stomach were calculated or measured in each group. Results Compared with the blank control group,the organ index and ulcer index increased.However,the pH decreased,and concentration of PGE2and COX-2 in the model group also decreased(all P<0.05).In the naringin groups,the organ index and ulcer index decreased,but the pH increased,and the concentration of PGE2and COX-2 in serum also increased(all P<0.05),while the action was enhanced with the dose of naringin. Conclusion Naringin had some therapeutic effect on aspirin gastric ulcer of mouse.

        Key words:naringin;gastric ulcer;aspirin;mouse

        胃潰瘍是消化系統(tǒng)常見的一種慢性疾病,而小鼠阿司匹林胃潰瘍是常用的藥物誘發(fā)型動物模型之一[1-2]。阿司匹林是非甾體類抗炎藥,它通過降低環(huán)加氧酶的活性,使前列腺素的生成量減少。前列腺素能減弱胃酸的分泌和胃黏液的生成,導致侵襲因素增加,黏膜保護作用削弱,從而誘發(fā)胃潰瘍[3]。有關文獻報道,柚皮苷在鎮(zhèn)靜、抗動脈粥樣硬化、降血脂、調(diào)節(jié)血糖、解痙鎮(zhèn)痛等方面有著很好的治療作用[4-5]。為探究柚皮苷對小鼠阿司匹林胃潰瘍的作用,現(xiàn)研究報道如下。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 實驗動物 Balb-c小鼠共 60只,體質(zhì)量(20±2)g,由河南科技大學動物中心提供,動物許可證號:SCXK(鄂)2010-0007。

        1.1.2 藥物與試劑 柚皮苷:西安沃森生物科技有限公司,藥品純度98%,批號:20161018。阿司匹林:江蘇平光制藥有限責任公司,每片 25 mg,批號:20170118。雷尼替丁:上?,F(xiàn)代哈森(商丘)藥業(yè)有限公司,批號:20170304。Mouse PGE2ELISA KIT:上海羽朵生物科技有限公司,批號:YD-M30446,有效期:201709。Mouse COX-2 ELISA KIT:上海羽朵生物科技有限公司,批號:YD-M22341,有效期:201709。

        1.1.3 實驗器材 FRESCO21離心機(上海巴玖實業(yè)有限公司),XSP-3雙目生物顯微鏡(上海普丹光學儀器有限公司),Epoch酶標儀(美國,Moleculor Device公司),PHS-3C型pH計(上海儀電科學儀器股份有限公司),F(xiàn)A2204B分析天平(上海精科天美科學儀器有限公司),TEC2500病理組織漂烘儀(常州市郝思琳醫(yī)用儀器有限公司),RM2235輪轉(zhuǎn)式切片機(上海歐啟電子科技有限公司),TEC-2800型包埋機(廈門邁凱倫精瑞儀器有限公司)。

        1.2 實驗方法

        1.2.1 動物分組與給藥 Balb-C小鼠60只,按參考文獻報道分組[1-3],隨機分為空白組(生理鹽水),模型組,陽性對照組(雷尼替丁50 mg·kg-1),柚皮苷低劑量組(60 mg·kg-1),柚皮苷高劑量組(240 mg·kg-1),每組 12只。

        1.2.2 動物模型 小鼠連續(xù)灌胃10 d,空白組和模型組用蒸餾水灌胃。在第5天時除空白組外用阿司匹林(200 mg·kg-1)造模,連續(xù)造模 5 d[6-8]。

        1.2.3 觀察指標 末次給藥后禁食不禁水24 h,小鼠摘眼球取血,然后脫椎處死,沿腹中線打開腹腔結扎賁門、幽門后剪取胃組織,沿胃大彎剪開胃腔,用2 mL的生理鹽水洗出胃液及胃容物,用pH計進行胃酸酸度測定。然后將胃潰瘍面朝上平鋪在載玻片上,將載玻片放在格子紙上,與格子線對齊并用高分辨率相機拍照。然后用電子天平將胃稱重計算臟器指數(shù)。最后將稱好的胃放入10%的甲醛中固定以便進行病理切片的制作。根據(jù)臟器指數(shù)=臟器質(zhì)量(g)/小鼠體質(zhì)量(100 g),計算出小鼠胃的臟器指數(shù)。采用單盲法,根據(jù) Guth標準計算潰瘍指數(shù)和抑制率,按潰瘍或糜爛面積計分:每3個點狀潰瘍(黏膜缺損小1 mm或出血性糜爛小點,稱為點狀潰瘍)計1分;條狀出血:以游標卡尺測量潰瘍面的最大長徑和垂直于最大長徑的最大寬徑,二者的乘積即為潰瘍指數(shù)。寬為1 mm者每1 mm長計為1分,2 mm寬者每1 mm長為2分;3 mm寬者每1 mm長為3分。潰瘍抑制率/% =(損傷模型組潰瘍指數(shù)—給藥組潰瘍指數(shù))/損傷模型組潰瘍指數(shù) ×100[9-13]。

        1.3 統(tǒng)計學處理 應用 SPSS 17.0進行數(shù)據(jù)處理,所得數(shù)據(jù)均用均值 ±標準差)表示,組間比較采用方差分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

        2 結果

        2.1 柚皮苷對小鼠胃指數(shù)的影響 與空白組比較,模型組胃指數(shù)增大(P<0.05);與模型組比較,雷尼替丁、柚皮苷高、低劑量組對小鼠的胃指數(shù)差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表 1。

        2.2 柚皮苷對小鼠胃液p H級潰瘍指數(shù)的影響 與空白組比較,模型組pH減小,酸度和潰瘍指數(shù)增大(均 P<0.05);與模型組比較,雷尼替丁、柚皮苷高低劑量組的胃液p H均升高、潰瘍指數(shù)明顯降低(均P<0.05),見表 1。

        2.3 柚皮苷對小鼠血清PGE2、COX-2的影響 與空白組比較,模型組血清中 PGE2、COX-2下降(均P<0.05);陽性對照組 PGE2、COX-2無變化;柚皮苷低劑量組的 PGE2、COX-2顯著升高,且與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義(均 P<0.05);柚皮苷高劑量組的PGE2、COX-2略有升高,與柚皮苷低劑量組比較,差異無統(tǒng)計學意義,見表1。

        2.4 胃組織大體觀和鏡下觀 沿胃大彎剪開,空白組胃黏膜完好;模型組胃黏膜出現(xiàn)嚴重損傷,有明顯的糜爛和出血點;陽性對照組、柚皮苷高、低劑量組的胃組織損傷不明顯。鏡下觀察可見模型組小鼠胃黏膜出現(xiàn)明顯的損傷,胃黏膜結構破壞。陽性對照組和柚皮苷高低劑量組小鼠的胃黏膜充血減輕,未見出血點和糜爛,潰瘍減輕,見圖1-2。

        表1 柚皮苷對小鼠阿司匹林性胃潰瘍的影響(n=12,x±s)

        圖1 各組小鼠胃黏膜形態(tài)

        圖2 各組小鼠胃組織病理學形態(tài)(HE,×100)

        3 討論

        阿司匹林通過降低環(huán)加氧酶的活性,使前列腺素減少,減弱胃酸的分泌及胃黏液的生成,從而誘發(fā)胃潰瘍。柚皮苷在柚皮中含量豐富,是柚皮中的有效成分。本組結果,模型組胃指數(shù)增大;pH減小,酸度增大;潰瘍指數(shù)增大;胃組織充血明顯,有散在出血點等顯示阿司匹林通過胃酸直接破壞以及黏膜保護屏障的削弱造成胃潰瘍模型[8-9]。柚皮苷組胃指數(shù)減小,胃液pH增大,潰瘍指數(shù)明顯降低以及胃組織學改善等,顯示柚皮苷對小鼠胃潰瘍有保護作用。

        從血清中 PGE2的結果分析,模型組 PGE2和COX-2顯著下降;柚皮苷低劑量組的PGE2和COX-2顯著升高,與模型組比較有顯著性差異;柚皮苷高劑量組的PGE2和COX-2升高,與柚皮苷低劑量組比較,差異無統(tǒng)計學意義。陽性對照組PGE2和COX-2無顯著升高,說明阿司匹林導致胃潰瘍的一個因素是通過減少PGE2而實現(xiàn)的;從陽性對照組與模型組的比較中可以看出,雷尼替丁在治療胃潰瘍的過程中可能不是通過增加PGE2的濃度而實現(xiàn)的;柚皮苷在低劑量時可以增加血清中PGE2的濃度,從而發(fā)揮對胃潰瘍的治療作用[14-15]。

        綜上所述,非甾體抗炎藥阿司匹林會引發(fā)胃潰瘍,它是通過降低PGE2、COX-2的含量,增加胃酸的分泌而導致胃潰瘍的發(fā)生。低劑量的柚皮苷可能通過增加PGE2和COX-2,減少胃內(nèi)酸度和增加胃黏膜的保護作用來發(fā)揮對胃潰瘍的治療作用,低劑量的柚皮苷對于胃潰瘍的治療作用效果顯著。但高劑量的柚皮苷雖然對胃潰瘍有一定的治療作用,但沒有低劑量的柚皮苷效果顯著。

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        Protective Effect of Naringin on Mouse Aspirin Gastric Ulcer

        WANG Shu-ying,WANG Tian-qi,ZHU Lin-miao,MA Nan,XIE Rui,HU Meng-qiang
        (Medical College,Henan University of Science and Technology,Luoyang 471023,China)

        R285.5;R573.1

        A

        1672-688X(2017)03-0172-03

        10.15926/j.cnki.issn1672-688x.2017.03.004

        河南科技大學大學生科研訓練計劃項目(2016117)

        2017-06-12

        河南科技大學醫(yī)學院,河南洛陽471023

        王淑英(1965—),女,河南洛陽人,教授,從事神經(jīng)藥理學研究。

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