孫學亮　季延濱　白東清

摘要：通過蝦青素與不同載體（磷脂、維生素E）的組合方式，研究蝦青素混合物對鸚鵡魚著色和生化指標的影響。以540尾1齡健康的鸚鵡魚[體質量為（8.23±0.52）g]為研究對象，試驗時間為30 d。試驗分為3個組：A組為添加1%蝦青素+0.3%維生素E；B組為添加1%蝦青素+0.3%磷脂；C組為對照組（未添加任何色素和載體）。結果表明，與對照組相比，A、B組均使鸚鵡魚的體色顯著變紅；蝦青素混合物對鸚鵡魚具有一定的抗氧化能力，A、B、C組SOD活性均存在顯著差異，其中A組的SOD活性顯著高于C組的SOD活性，C組的SOD活性又顯著高于B組的SOD活性；A、B、C組CAT活性由高到低依次為A組﹥B組﹥C組；A、C組的MDA含量顯著低于B組的MDA含量，A、C組間差異不顯著。由此可見，A組的抗氧化效果最好。蝦青素混合物對血清中ALT、AST活性也存在差異：A、B組血清中的ALT、AST活性均顯著低于C組的ALT、AST活性，A、B 2組差異不顯著?？傊?，飼料中添加蝦青素與維生素E、磷脂這2種載體的組合方式對鸚鵡魚著色與生長效果較好。

關鍵詞：鸚鵡魚；著色；生化指標；蝦青素；磷脂；抗氧化；血清

中圖分類號： S963.73+5文獻標志碼： A

文章編號：1002-1302（2017）14-0143-03

鸚鵡魚別稱鸚嘴魚，屬動物界脊椎動物門脊椎動物亞門鱸形目鸚嘴魚科，是由紅魔鬼父本和紫紅火口母本雜交得到的新品種，體色決定其觀賞價值和經濟價值。

近年來，增色劑在觀賞魚的養(yǎng)殖中被廣泛應用。何培民等把螺旋藻添加到飼料中來投喂錦鯉，隨著螺旋藻投喂量的增加，錦鯉體色逐漸加深[1]。在基礎飼料中添加類胡蘿卜素喂養(yǎng)珍珠瑪麗魚、紅劍尾魚，它們的體色明顯艷麗[2]。蝦青素是水產養(yǎng)殖上被廣泛應用的一種類胡蘿卜素著色劑[3]。蝦青素具有抗氧化、預防腫瘤、提高免疫力、提高肌肉性能等許多重要的生理功能。金征宇等將蝦青素應用于羅氏沼蝦中，效果十分明顯，改善了羅氏沼蝦的體色、提高了蝦殼中類胡蘿卜素的含量[4]；謝劍華等研究發(fā)現(xiàn)，蝦青素可顯著提高日本沼蝦的免疫力[5]。蝦青素在金魚等觀賞魚類[6]及真鯛[7]、金頭鯛[8]、北極紅點鮭[9]、虹鱒[10]、大西洋鮭[11]等食用魚類均有著色作用。

本試驗將蝦青素與磷脂、維生素E組合形成蝦青素混合物，揭示其對鸚鵡魚著色和生化指標的影響規(guī)律，旨在探索蝦青素的最適添加量以及合理搭配，并以此指導生產，為以后的研究奠定理論基礎。

1材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1試驗用魚

鸚鵡魚，體質量為（8.23±0.52）g，外觀正常，體質健壯，共540尾。分別放在藍色長方形塑料箱（70 cm×50 cm×50 cm）中，每箱60尾。暫養(yǎng)3 d，使其適應試驗環(huán)境，減少應激反應。暫養(yǎng)期間水溫為28～32 ℃。

1.1.2試驗藥物

蝦青素（添加含量為1%，鄭州華仁醫(yī)藥有限公司）、磷脂（添加含量為0.3%，北京源華美磷脂科技有限公司）、維生素E（添加含量為0.3%，鄭州四陽化工產品有限公司）。

1.2試驗方法

1.2.1試驗方法

按照飼料中所添加的載體不同，試驗設3組，分別為A、B、C，每組設3個重復，分別放在藍色塑料箱中，每箱60尾，實際水體積為120 L。其中，A組表示添加1%蝦青素+0.3%維生素E；B組表示添加1%蝦青素+03%磷脂；C組表示對照（基礎飼料，未添加任何色素和載體）。水溫保持在（30±2）℃，每日投喂3次，日投餌量為體質量的4%～7%，試驗時間為30 d。

1.2.2血清和組織勻漿的制備

試驗結束后，每箱隨機抽取10尾采血，采取尾部抽血，于4 500 r/min、4 ℃下離心30 min，取血清備用。

取200 mg左右的肝胰臟在冰冷的生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙試干，用移液器加入9倍于組織塊質量的預冷勻漿介質（0.86%的生理鹽水），在勻漿器中進行勻漿，用勻漿管在冰水中勻漿15 min，于4 500 r/min、4 ℃下離心15 min，取上清液備用。

1.2.3測定的指標

超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，簡稱SOD）活性、丙二醛（malondialdehyde，簡稱MDA）含量、過氧化氫酶（catalase，簡稱CAT）、谷草轉氨酶（aspartate aminotransferase，簡稱AST/GOT）、丙氨酸轉氨酶（alanine aminotransferase，簡稱ALT/GPT）活性、類胡蘿卜素含量的測定試劑盒，均由南京建成生物工程研究所生產；總蛋白含量的測定試劑盒由中生北控生物科技有限公司生產。

用便攜式色差儀HP-2132分別測量試驗前后的血鸚鵡的亮度（L*）、紅色（a*）、黃色（b*），每箱隨機抽取10尾。測量前擦干魚體表面附著的水，根據儀器測量魚體的背部得出數據。

1.3數據統(tǒng)計

采用Excel常規(guī)處理數據后，利用SPSS 13.0軟件進行方差分析。本試驗所有數據均以“平均值±標準差”（x[TX-*5]±s）表示。

2結果與分析

2.1蝦青素混合物對鸚鵡魚抗氧化能力的影響

由表1可知，A組（1%蝦青素+0.3%維生素E）的SOD活性顯著高于B（1%蝦青素+0.3%磷脂）、C（對照）組的SOD活性，C組SOD活性顯著高于B組的SOD活性，A、B、C組的SOD活性均存在顯著差異，A組的SOD活性最高；A、B、C組的CAT活性均存在顯著差異，A組的CAT活性最高，顯著高于B、C組的CAT活性，B組的CAT活性顯著高于C組的CAT活性；A、C組的MDA含量顯著低于B組的MDA含量，A、C組的MDA含量差異不顯著。

2.2蝦青素混合物對血清中ALT、AST活性的影響

由表2可知，A、B、C組血清中ALT活性由低到高的順序為A組﹤B組﹤C組，其中C組血清中ALT活性顯著高于A、B組的ALT活性，A、B組間ALT活性差異不顯著；A、B、C組血清中AST活性由高到低的順序C組﹥B組﹥A組，其中C組血清中AST活性顯著高于A、B組的AST活性，A、B組間血清中AST活性差異不顯著。

2.3蝦青素混合物對鸚鵡魚類胡蘿卜素含量的影響

由表3可知，在肝胰臟中，C組的類胡蘿卜素含量顯著低于A、B組的類胡蘿卜素含量，A、B組間類胡蘿卜素含量差異不顯著；在肌肉中，C組的類胡蘿卜素含量最低，顯著低于A、B組的類胡蘿卜素含量，A、B組間類胡蘿卜素含量差異不顯著；在皮膚中，3組的類胡蘿卜素的含量由高到低依次為A組﹥B組﹥C組，其中A、B組的類胡蘿卜素含量分別顯著高于C組的類胡蘿卜素含量，A、B組間類胡蘿卜素含量差異不顯著。由此可以看出，3種組織中A、B組的類胡蘿卜素含量均顯著高于對照組。3種組織中著色效果比較，由易到難的順序為肝胰臟﹥皮膚﹥肌肉，說明肌肉相比其他2種組織更不易著色，肝胰臟最容易著色。

2.4蝦青素混合物對鸚鵡魚體表色素的影響

由表4可知，A、B、C組間鸚鵡魚體表的L*值均存在顯著差異，其中A組的L*值顯著高于B、C組的L*值，C組的L*值顯著高于B組的L*值；鸚鵡魚體表的a*最大值出現(xiàn)在A組，C組的a*值顯著低于A、B組的a*值，A、B組差異不顯著；A、B、C組間鸚鵡魚體表的b*值均存在顯著差異，其中B組的b*值顯著高于A、C組的b*值，A組的b*值顯著高于C組的b*值。由此可知，蝦青素與維生素E組合形成的蝦青素混合物能夠使鸚鵡魚顯著變紅，著色效果較好。

3討論

3.1蝦青素混合物對鸚鵡魚抗氧化能力的影響

SOD、CAT是生物體內2種相互關聯(lián)的抗氧化酶，可使生物機體免受氧化傷害[12]。同時測定MDA的含量常?？梢苑从硻C體內脂質過氧化的程度，間接反映出細胞損傷的程度[13]。本試驗中A組SOD、CAT活性最高，MDA含量最低，說明蝦青素具有很好的抗氧化能力。裴素蕊等分別在凡納濱對蝦、斑節(jié)對蝦的飼料中添加蝦青素，均證實蝦青素具有很強的抗氧化能力[14-15]。維生素E是動物體內阻斷自由基鏈反應的脂溶性抗氧化劑之一，能使組織器官免受自由基損傷，具有很強的抗氧化效果[16-17]。周立斌等研究結果表明，在美國紅魚飼料中維生素E的適宜添加量為1 028 mg/kg，具有一定的抗氧化效果[18]。關于黃顙魚的研究中，在維生素E的添加量為125、175 mg/kg時，血漿中丙二醛（MDA）含量顯著降低（P<005），SOD活性比不添加組略高[19]。蔡中華等研究結果表明，維生素E不僅本身具有抗氧化功能，還可誘導機體顯著增加SOD產生的能力，并顯著降低氧化代謝產物MDA含量[20]。

綜上所述，由于蝦青素和維生素E均能提高SOD、CAT的活性并且同時抑制MDA含量的增加，因此蝦青素與維生素E組合形成的蝦青素混合物（A組）對鸚鵡魚的抗氧化性能力較強，效果較好。

3.2蝦青素混合物對鸚鵡魚血清中生化指標的影響

ALT、AST被廣泛用作肝臟損害的標志物。AST、ALT是反映肝臟健康狀態(tài)最敏感的酶學指標，對肝病的診斷治療具有重要價值。本試驗結果表明，A、B組血清中的的ALT、AST活性均顯著低于C組的ALT、AST活性，A、B組間的ALT、AST活性無顯著差異。飼料中添加蝦青素和維生素E對血清中ALT、AST活性的影響十分明顯，說明蝦青素和維生素E對肝臟有一定的保護作用。裴俊鵬等將蝦青素加入到小鼠的飼料中發(fā)現(xiàn)，蝦青素可以降低小鼠血清中ALT、AST活性，從而改善乙醇性肝損傷[21]。Nakano等用添加了10.87 g/kg蝦青素的飼料飼喂虹鱒后，顯著降低了血清ALT、AST的活性，從而起到保護虹鱒肝臟的作用[22]。

3.3蝦青素混合物對鸚鵡魚著色指標的影響

魚類的體色主要由類胡蘿卜素決定，與其生理狀態(tài)和環(huán)境因素也有關系。魚類自身不能合成類胡蘿卜素，只能從食物中吸收、沉淀和轉化。影響魚類著色的原因有很多，包括魚類遺傳特性、所處的環(huán)境、喂食的飼料以及魚類自身的生理狀態(tài)等。

結果表明，鸚鵡魚在肝臟、肌肉以及皮膚中A、B組的類胡蘿卜素含量均顯著高于C組的類胡蘿卜素含量，A、B組間無顯著差異，說明飼料中添加蝦青素和載體對鸚鵡魚類胡蘿卜素含量的影響十分明顯，蝦青素與維生素E、磷脂分別組合形成的蝦青素混合物使鸚鵡魚類胡蘿卜素含量較高。綜上所述，用蝦青素混合物喂養(yǎng)的鸚鵡魚中類胡蘿卜素含量均高于基礎飼料，同時鸚鵡魚中類胡蘿卜素含量由高到低依次為肝胰臟﹥皮膚﹥肌肉，說明肝臟和皮膚更容易著色。王海英等研究表明，添加蝦青素可顯著提升鸚鵡魚的體色，而添加螺旋藻對其體色影響不大[23]。張曉紅等研究表明，隨著在飼料中蝦青素添加量的增加，鸚鵡魚皮膚類胡蘿卜素含量逐漸升高[24]。劉金海報道，維生素E對鸚鵡魚著色也具有一定的幫助[25]。結果說明，蝦青素對鸚鵡魚的著色效果更好。

鸚鵡魚體表的L*值由大到小依次為A組﹥C組﹥B組，說明使用添加蝦青素和維生素E的飼料喂養(yǎng)的鸚鵡魚體表亮度明顯高于其他2組，蝦青素和維生素E混合的飼料喂養(yǎng)的鸚鵡魚亮度更高。A、B組鸚鵡魚體表的a*值均顯著高于C組的a*值，說明使用A、B組的飼料喂養(yǎng)的鸚鵡魚顏色更紅，添加了蝦青素的飼料著色效果更好；B組鸚鵡魚體表的b*值顯著高于A、C組的b*值，說明添加蝦青素和磷脂載體的飼料效果更顯著，相比其他2組顏色更偏黃一些。

4結論

蝦青素與維生素E載體組合形成的混合物對鸚鵡魚有較強的抗氧化能力，蝦青素對鸚鵡魚具有一定的抗氧化作用，對鸚鵡魚的著色效果較好。蝦青素與維生素E、磷脂這2種載體組成的混合物對鸚鵡魚的肝臟具有一定的保護作用。

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