徐建華，肖紅波，程玉花，王瑜，張桂玲，呂金雷，邵毅

（1.南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院 腎內(nèi)科，江西 南昌 330006；2.北京大學(xué)深圳醫(yī)院 腎內(nèi)科，廣東 深圳 518036；3.南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院 眼科，江西 南昌 330006）

吡非尼酮對大鼠腎間質(zhì)纖維化的防治作用研究*

徐建華1，肖紅波2，程玉花1，王瑜1，張桂玲1，呂金雷1，邵毅3

（1.南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院 腎內(nèi)科，江西 南昌 330006；2.北京大學(xué)深圳醫(yī)院 腎內(nèi)科，廣東 深圳 518036；3.南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院 眼科，江西 南昌 330006）

目的 研究吡非尼酮（PFD）對大鼠腎間質(zhì)纖維化的作用及其作用機(jī)制，為臨床使用吡非尼酮提供理論依據(jù)。方法 24只標(biāo)準(zhǔn)雄性SD大鼠，隨機(jī)分為3組：正常組（NC組）、模型組（M組）及吡非尼酮治療組（S組）。M組及S組行左側(cè)輸尿管結(jié)扎術(shù)，復(fù)制腎間質(zhì)纖維化模型。S組予吡非尼酮250 mg/（kg·d）灌胃，NC組及M組大鼠予等量1%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃。分別于手術(shù)后第1、3、5、7天處死各組大鼠各2只，取梗阻側(cè)腎臟。HE染色觀察各組腎組織病理變化，實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）檢測結(jié)締組織生長因子（CTGF）mRNA表達(dá)水平，Western blot檢測轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）及α-平滑肌激動(dòng)蛋白（α-SMA）的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果 NC組未顯示腎纖維化，M組顯示大鼠腎間質(zhì)纖維化及炎癥細(xì)胞浸潤。NC組TGF-β、α-SMA蛋白表達(dá)均較低，M組TGF-β、α-SMA蛋白及CTGF mRNA表達(dá)較NC組均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），且隨著梗阻時(shí)間延長，各物質(zhì)表達(dá)量增高，但第7天M組及S組上述物質(zhì)表達(dá)量較第5天減少，且M組與S組之間表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；S組上述物質(zhì)各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)則較M組均減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 吡非尼酮可能通過抑制大鼠腎組織TGF-β和CTGF的表達(dá)進(jìn)而減少成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞，減少細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的沉積，發(fā)揮抗腎纖維化作用。

吡非尼酮；單側(cè)輸尿管梗阻；腎間質(zhì)纖維化；結(jié)締組織生長因子；轉(zhuǎn)化生長因子-β；α-平滑肌肌動(dòng)蛋白

纖維化過程是組織損傷后的一種病理生理過程，是指由各種致病因子所致結(jié)締組織異常增生，如果損傷因素長期不能去除，纖維化的長期持續(xù)存在最終將導(dǎo)致器官的結(jié)構(gòu)改變和功能減退。腎小管間質(zhì)纖維化（tubulointerstitial fibrosis，TIF），是各種致病病因引起進(jìn)行性腎損害的主要病理特征，是導(dǎo)致終末期腎?。╡nd-stage renal disease，ESRD）的根本病理改變之一，是多種腎疾病發(fā)展至終末期腎衰竭的共同病理特征[1]，TIF的出現(xiàn)往往預(yù)示著預(yù)后不良，可以作為腎功能惡化的一個(gè)十分準(zhǔn)確的預(yù)測指標(biāo)，其程度與腎功能減退密切相關(guān)[2]。阻斷腎纖維化的形成及其發(fā)展，就能有效地阻止慢性腎病的進(jìn)展及腎衰竭的發(fā)生。但是目前對纖維化疾病的治療僅限于非特異性抗炎藥物、免疫抑制劑及糖皮質(zhì)激素等的應(yīng)用，臨床上尚缺乏真正用于治療纖維化過程的有效藥物。吡非尼酮（Pirfenidone，PFD）是目前已經(jīng)證實(shí)的少數(shù)可延緩甚至逆轉(zhuǎn)纖維化的藥物之一。已有實(shí)驗(yàn)證實(shí)其能阻止甚至逆轉(zhuǎn)細(xì)胞外基質(zhì)（extrac ellular matrix，ECM）的積聚，能夠有效地延緩肺纖維化、肝纖維化、青光眼術(shù)后濾過道瘢痕化等的進(jìn)展[3-4]，但是關(guān)于其在腎間質(zhì)纖維化中的作用報(bào)道甚少。本研究以單側(cè)輸尿管梗阻復(fù)制腎間質(zhì)纖維化模型，探討其作用及可能的機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及試劑

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：24只標(biāo)準(zhǔn)雄性SD大鼠，體重150～180 g（購自南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部）。術(shù)前檢查均無全身病變。主要試劑：PDF（P2116；美國Sigma公司），1%羧甲基纖維素鈉溶液，小鼠抗大鼠α-SMA單克隆抗體（美國Abcam公司），轉(zhuǎn)化生長因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）抗體（美國Abcam公司），辣根酶標(biāo)記山羊抗小鼠IgG（北京中山金橋生物技術(shù)有限公司）。Trizol總RNA抽提試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒，實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR）試劑盒（北京全式金生物技術(shù)有限公司），qRT-PCR引物（上海生工生物工程股份有限公司）。

1.2 動(dòng)物模型的分組、復(fù)制及取材

1.2.1 模型的分組和復(fù)制 24只標(biāo)準(zhǔn)雄性SD大鼠，每籠6只，于標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境常規(guī)喂養(yǎng)，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為正常組（NC組，n=8），模型組（M組，n=8）及PFD治療組（S組，n=8）。M組及S組大鼠均在8%水合氯醛腹腔注射麻醉下接受手術(shù)，于左側(cè)腹部取一長約3 cm縱行切口，逐層分離，暴露腎臟及膀胱，沿著腎臟膀胱走向?qū)ふ逸斈蚬?，分離并結(jié)扎左側(cè)輸尿管，關(guān)閉腹腔。各組大鼠正常飲食、進(jìn)水。S組大鼠自手術(shù)當(dāng)天起給予PFD 250 mg/（kg·d）灌胃，PFD溶于1%羧甲基纖維素鈉溶液。NC組及M組大鼠自手術(shù)當(dāng)天起給予等量1%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃。分別于手術(shù)后第1、3、5及7天處死各組大鼠各2只。

1.2.2 取材 處死前稱大鼠體重，用8%水合氯醛腹腔注射麻醉，取左側(cè)腎臟，去除包膜和結(jié)締組織，洗凈，瀝干血跡，迅速置于液氮中過夜，次日轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱保存，備HE染色、Western blot及qRT-PCR檢測用。所有實(shí)驗(yàn)步驟通過動(dòng)物倫理委員會(huì)同意。

1.3 腎組織病理形態(tài)學(xué)觀察

取出的腎組織經(jīng)10%中性甲醛固定，常規(guī)包埋，按3μm的厚度行連續(xù)切片，行HE染色。

1.4 qRT-PCR檢測梗阻側(cè)腎組織中結(jié)締組織生長因子（CTGF）mRNA表達(dá)水平

分別取M組及S組大鼠腎組織100 mg，按總RNA提取試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書分別提取各組總RNA及逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA模板，取2μl cDNA用于qRT-PCR反應(yīng)。qRT-PCR所用引物序列見表1，β-actin mRNA作為內(nèi)參照。qRT-PCR反應(yīng)條件：預(yù)變性94℃30 s，變性94℃5 s，退火60℃，40個(gè)循環(huán)，每次實(shí)驗(yàn)設(shè)3復(fù)孔，獨(dú)立實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。SDS軟件分析cDNA擴(kuò)增的相對表達(dá)量，實(shí)時(shí)定量PCR儀（ABI7500）檢測出相對表達(dá)量RQ值（RQ值=2-Ct）用于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

表1 β-actin及CTGF引物序列

1.5 Western blot檢測TGF-β和α-SMA蛋白的表達(dá)

取液氮保存的腎組織，使用RIPA蛋白裂解液提取總蛋白，并用BCA法檢測蛋白濃度。取30μg蛋白樣品變性后經(jīng)8%SDS-PAGE電泳3 h，200 mA轉(zhuǎn)膜90 min至NC膜上，5%脫脂牛奶室溫封閉1 h，分別用鼠抗大鼠TGF-β單抗（1∶1 000）、鼠抗大鼠α-SMA多抗（1∶100）、鼠抗大鼠β-actin單抗（1∶2 500）4℃孵育過夜，辣根過氧化物酶標(biāo)記抗鼠IgG二抗（1∶1 000）室溫1 h，洗膜后ECL顯色成像。相同實(shí)驗(yàn)條件重復(fù)3次。以β-actin為內(nèi)參照，通過計(jì)算目標(biāo)蛋白與β-actin蛋白的灰度比值進(jìn)行半定量分析。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多時(shí)間點(diǎn)比較采用重復(fù)測量設(shè)計(jì)的方差分析，同一時(shí)間點(diǎn)組間比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠實(shí)驗(yàn)過程中生活狀態(tài)的比較

NC組大鼠反應(yīng)靈敏、食欲佳、睡眠良好；手術(shù)后3 d，M組大鼠毛色開始逐漸變黃、色澤變黯淡、反應(yīng)遲鈍、食量下降、體重增加慢、自覺活動(dòng)減少，梗阻時(shí)間越長，表現(xiàn)越明顯；S組上述表現(xiàn)處于NC組及M組之間。

2.2 腎臟病理變化

HE染色顯示NC組大鼠腎小管間質(zhì)無明顯纖維化，M組大鼠自第1天開始即有較為明顯的間質(zhì)增生、纖維化、炎癥細(xì)胞浸潤等，提示本次實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛷?fù)制成功，可行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。S組腎間質(zhì)纖維化和炎癥細(xì)胞浸潤較M組減少。見附圖。

2.3CTGF mRNA相對表達(dá)量

qRT-PCR結(jié)果顯示，行單側(cè)輸尿管結(jié)扎術(shù)后第1、3、5及7天，M組及S組大鼠CTGF mRNA表達(dá)采用重復(fù)測量設(shè)計(jì)的方差分析，結(jié)果：第1、3及5天CTGF mRNA表達(dá)量有差異（F=19.721，P=0.046），隨著梗阻時(shí)間越長，表達(dá)量越高，但第7天M組與S組表達(dá)量減少，且兩組之間表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=0.127，P=0.739）。見表2。

2.4 各組TGF-β及α-SMA蛋白表達(dá)水平

正常組大鼠腎臟中僅有少量TGF-β、α-SMA表達(dá)，單側(cè)輸尿管結(jié)扎術(shù)后，M組及S組大鼠TGF-β及α-SMA蛋白表達(dá)采用重復(fù)測量設(shè)計(jì)的方差分析，結(jié)果：①與NC組比較，TGF-β第1、3及5天表達(dá)有差別（F=35.341，P=0.025），α-SMA第1、3、5及7天表達(dá)有差別（F=34.357，P=0.026），梗阻時(shí)間越長，表達(dá)量越高；②S組與M組比較，TGF-β第1、3及5天表達(dá)量降低（F=8.742，P=0.039），α-SMA第1、3及5天表達(dá)量降低（F=8.233，P=0.042）；③第7天TGF-β及α-SMA S組與M組之間表達(dá)趨勢無差別（F= 1.157和2.749，P=0.343和0.173）。見表3。

表2 腎組織CTGF mRNA表達(dá)變化 （n=8，±s）

表2 腎組織CTGF mRNA表達(dá)變化 （n=8，±s）

注：1）與第1天M組比較，P＜0.05；2）與相同時(shí)間M組比較，P＜0.05

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附圖 各組腎組織病理變化 （HE，×200）

表3 各組腎組織TGF-β、α-SMA蛋白相對表達(dá)量 （n=8，±s）

表3 各組腎組織TGF-β、α-SMA蛋白相對表達(dá)量 （n=8，±s）

注：1）NC組比較，P＜0.05；2）與相同時(shí)間M組比較，P＜0.05

T G F -β α -S M A組別第7天N C組 1 . 0 0 0 ± 0 . 0 0 0 1 . 0 0 0 ± 0 . 0 0 0 1 . 0 0 0 ± 0 . 0 0 0 1 . 0 0 0 ± 0 . 0 0 0 1 . 0 0 0 ± 0 . 0 0 0 1 . 0 0 0 ± 0 . 0 0 0 1 . 0 0 0 ± 0 . 0 0 0 1 . 0 0 0 ± 0 . 0 0 0 M組 2 . 2 8 0 ± 0 . 4 5 21） 2 . 6 3 8 ± 0 . 4 7 01）2 . 9 2 8 ± 0 . 7 0 21）2 . 3 9 6 ± 0 . 5 4 31）2 . 2 1 3 ± 0 . 4 7 41）3 . 8 6 8 ± 1 . 1 4 51）5 . 8 3 1 ± 1 . 4 0 01）4 . 0 4 2 ± 1 . 1 4 31）S組 1 . 1 0 7 ± 0 . 5 2 92） 1 . 7 0 9 ± 0 . 2 6 41）2）1 . 5 5 0 ± 0 . 4 8 01）2）2 . 9 7 2 ± 0 . 7 5 21）1 . 3 0 9 ± 0 . 2 9 01）2）3 . 6 3 ± 1 . 0 2 31）2）3 . 1 1 8 ± 0 . 8 1 61）2）2 . 7 7 ± 0 . 6 7 81）第1天第3天第5天第7天第1天第3天第5天

3 討論

纖維化主要病理改變?yōu)槠鞴俳M織內(nèi)纖維結(jié)締組織增多，ECM沉積，實(shí)質(zhì)細(xì)胞減少，持續(xù)進(jìn)展可致器官結(jié)構(gòu)破壞和功能減退，乃至衰竭，嚴(yán)重威脅人類健康和生命。任何引起ECM合成增加以及降解減少的因素都能夠?qū)е翬CM的沉積。腎小管間質(zhì)纖維化是各種腎病進(jìn)展至終末期的共同通路，也是判斷預(yù)后的關(guān)鍵指標(biāo)，延緩腎間質(zhì)纖維化的進(jìn)展是治療各種腎疾病、改善預(yù)后的有效方法[5]。

腎間質(zhì)纖維化的發(fā)生機(jī)制較為復(fù)雜，至今尚未明確，TGF-β是參與多種纖維化過程的中樞因子，能夠促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖和生長，增加膠原的合成以及減少ECM的降解。而CTGF是實(shí)現(xiàn)TGF-β主要纖維化效應(yīng)的下游介質(zhì)。ITO等[6]觀察到，腎間質(zhì)纖維化病變區(qū)內(nèi)CTGF mRNA表達(dá)和肌成纖維細(xì)胞同步增加。TGF-β可以通過多種途徑誘導(dǎo)CTGF的表達(dá)，實(shí)現(xiàn)其纖維化效應(yīng)。FAN等[7]觀察到，TGF-β可刺激體外培養(yǎng)的人近曲小管上皮細(xì)胞發(fā)生表型轉(zhuǎn)化而轉(zhuǎn)變?yōu)榧〕衫w維細(xì)胞，并可以高表達(dá)CTCF并增加ECM的合成[8]。肌成纖維細(xì)胞是間質(zhì)細(xì)胞外基質(zhì)持續(xù)增加的主要來源細(xì)胞[9]，在TGF-β刺激下，體外培養(yǎng)的腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞可以高表達(dá)CTCF并增加ECM的合成。黃海長等[10]證明CTGF可直接誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞。肌成纖維細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)的α-SMA是其活躍的標(biāo)志性抗原[11]，α-SMA能較好地反映腎間質(zhì)纖維化程度，其數(shù)量與腎間質(zhì)纖維化程度密切相關(guān)，可作為判斷預(yù)后的良好指標(biāo)。張春等[12]研究提示，CTGF可能通過與胞膜上特定配體結(jié)合，啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，促進(jìn)了α-SMA基因的轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而增加了α-SMA蛋白合成。

目前，對于器官纖維化，尚無效果特別肯定的藥物，主要仍是使用激素及免疫抑制劑，但其效果甚微，且副作用較大。PFD是一種新型抗纖維化藥物，屬于一種羥基吡啶，化學(xué)名為5-甲基-1苯基-2 [1H]-吡啶酮，分子量為185.2，具有廣譜的抗纖維化作用，其在多種器官纖維化中均被證實(shí)有良好的抗纖維化作用，IYER等[13]用博來霉素誘導(dǎo)的肺纖維化倉鼠證實(shí)PFD可以抑制纖維化肺組織的脯氨酸羥化酶的活性，減少羥脯氨酸的生成，抑制Ⅰ型、Ⅲ型膠原基因的轉(zhuǎn)錄，減少肺膠原的含量。GARCIA等[14]證實(shí)PFD可明顯抑制肝硬化大鼠的Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅳ型膠原mRNA的表達(dá)，血中羥脯氨酸水平下降，明顯改善肝纖維化，SHIMIZU等[15]通過切除大鼠5/6腎臟復(fù)制慢性腎衰竭模型，并飼喂PFD，可使殘余腎皮質(zhì)中的Ⅰ型、Ⅳ型膠原mRNA和羥脯氨酸水平下降，與對照組相比，纖維化程度明顯減輕。PFD抗纖維化的主要機(jī)制被認(rèn)為是[16]：①抑制TGF-β過度表達(dá)。TGF-β是參與多種纖維化過程的中樞因子，對炎癥具有放大作用，是單核巨噬細(xì)胞強(qiáng)有力的趨化劑，活化的巨噬細(xì)胞可以分泌TGF-β，TGF-β可以通過正反饋的形式誘導(dǎo)自身的合成和分泌，故TGF-β在整個(gè)纖維化的病理生理過程中保持高水平。研究證實(shí)PFD能夠減少肺、腎等器官成纖維細(xì)胞TGF-β表達(dá)，并與膠原合成和基質(zhì)減少相關(guān)。②清除活性氧（ROS）。在纖維化發(fā)病過程中的早期炎癥階段，炎癥細(xì)胞產(chǎn)生的髓過氧化物酶、超氧化物歧化酶可以催化過氧化物形成ROS。ROS可引起脂質(zhì)過氧化反應(yīng)、放大炎癥反應(yīng)，使體內(nèi)蛋白及酶變性、DNA氧化損傷；此外，它還可以作為細(xì)胞內(nèi)重要信使，活化多條信號(hào)通路，間接引起組織損傷。幾乎所有纖維化都與氧化應(yīng)激有關(guān)。PFD可清除體內(nèi)ROS，減輕纖維化程度。③抑制腫瘤壞死因子TNF-α的生成，減輕炎癥反應(yīng)。TNF-α主要由活化的單核/巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，是重要的炎癥因子，可以引起和加重炎癥反應(yīng)，引起組織的損傷，啟動(dòng)組織修復(fù)及纖維化過程。研究證實(shí)，吡非尼酮可以在翻譯水平上抑制巨噬細(xì)胞TNF-α的生成。

在相同梗阻時(shí)間下M組TGF-β、α-SMA的蛋白表達(dá)及CTGF mRNA表達(dá)均高于S組，但第7天M組及S組上述物質(zhì)表達(dá)量較第5天減少，且M組與S組之間表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示PFD可能通過抑制CTGF的表達(dá)而減少以α-SMA為活化標(biāo)志的腎間質(zhì)肌成纖維細(xì)胞的數(shù)量和表達(dá)，減少細(xì)胞外基質(zhì)的合成，從而延緩腎間質(zhì)纖維化的進(jìn)展，該治療在早期可顯著緩解腎組織纖維化，但梗阻時(shí)間越長，腎臟積水越明顯，腎實(shí)質(zhì)破壞越明顯，藥物作用較前有所下降。

PFD作為一種新型的抗纖維化藥物，其對于纖維化疾病的預(yù)防和治療作用機(jī)制研究還不是十分透徹，與此同時(shí)，PFD與腎增生性疾病的研究目前尚處于初級(jí)階段，因此，進(jìn)一步探究PFD在腎疾病的應(yīng)用具有十分重要的意義。研究表明，PFD具有良好的穿透性，同時(shí)具有作用廣泛、副作用小的特點(diǎn)，這使得PFD能夠更好地應(yīng)用于其他纖維增生性疾病，為臨床治療提供新的思路和希望，具有極大的應(yīng)用前景。

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（張蕾 編輯）

Effect of Pirfenidone on renal interstitial fibrosis in rats*

Jian-hua Xu1,Hong-bo Xiao2,Yu-hua Cheng1,Yu Wang1, Gui-ling Zhang1,Jin-lei Lü1,Yi Shao3
(1.Department of Nephrology,the First Affiliated Hospital of Nanchang University,Nanchang, Jiangxi 330006,China 2.Department of Nephrology,Shenzhen Hospital of Peking University, Shenzhen,Guangdong 518036,China;3.Department of Ophthalmology,the First Affiliated Hospital of Nanchang University,Nanchang,Jiangxi 330006,China)

Objective To investigate the effect of Pirfenidone(PFD)on renal interstitial fibrosis in rat model of unilateral ureteral occlusion(UUO)and to reveal the anti-fibrosis mechanism of PFD.Methods Twenty-four standard male SD rats were randomly divided into three groups:normal control group(N),UUO model group(M)and Pirfenidone treated group(S).The rats of the M and S groups underwent left urethral ligation to make the renal interstitial fibrosis model.The S group was given PFD 250 mg/(kg·d)for gavage,meanwhile the N and M groups were given 1%sodium carboxymethyl cellulose solution for gavage.Two rats were sacrificed from each group on day 1,3,5 and 7 after UUO operation,the kidney of the obstructive side was taken for further research.In each group,pathological changes were observed by HE staining,qRT-PCR was applied to detect the mRNA expression of connective tissue growth factor(CTGF),Western bolt was applied to detect the protein expressions of TGF-β and α-SMA.Results There was obvious renal interstitial fibrosis in the M group.Compared with the N group,the expressions of TGF-β and α-SMA proteins and the mRNA expression of CTGF were significantly increased in the M group(P＜0.05).Compared with the M group,the expressions of above parameters in the S group were decreased significantly(P＜0.05).The level of TGF-β was positively correlated with the level of α-SMA (P＜0.05). Conclusions Pirfenidone has anti-fibrosis effect on rat UUO model by inhibiting renal TGF-β and CTGF expressions,which may control the fibroblast transformation and reduce the extracellular matrix deposition in the renal tissue.

Pirfenidonde;unilateral ureteral obsrtruction;renal interstitial fibrosis;connective tissue growth factor; tranforming growth factor beta

R-332

A

2016-12-15

國家自然科學(xué)基金（No：81400372，81660129）；全國臨床醫(yī)藥研究專項(xiàng)基金（No：L2012052）；廣東省自然科學(xué)基金（No：S2013040015040）；江西省自然科學(xué)基金青年基金（No：20132BAB215004,20114BAB215036）

呂金雷，E-mail：lvjinlei97@163.com，Tel：13064127385

徐健華現(xiàn)工作單位為江西省直醫(yī)療門診部，330046

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.19.001

1005-8982（2017）19-0001-06