全碧波

（南陽醫(yī)學高等?？茖W校，河南南陽473000）

映山紅總黃酮對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用

全碧波

（南陽醫(yī)學高等專科學校，河南南陽473000）

目的探討映山紅總黃酮對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用。方法選擇SD大鼠75只，分為假手術組、模型組、高劑量組、中劑量組、低劑量組，假手術組和模型組分別給予同體積生理鹽水灌胃，高、中、低劑量組分別給予映山紅總黃酮25.00mg/kg、12.50mg/kg、6.25mg/kg灌胃。建立心肌缺血再灌注損傷模型，缺血30分鐘，再灌注120分鐘。觀察各組心肌梗死范圍，測定血清乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶、丙二醛、超氧化物歧化酶水平。結果模型組心肌梗死范圍大于假手術組，高、中、低劑量組心肌梗死范圍均小于模型組，差異有顯著性（P＜0.05）。高、中、低劑量組乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶、超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量分別與模型組差異顯著（P＜0.05）。結論映山紅總黃酮對大鼠心肌缺血再灌注損傷有保護作用，可能與其抗氧化作用有關。

映山紅總黃酮；大鼠；心肌缺血再灌注損傷；保護作用

冠脈血管狹窄或阻塞導致心肌缺血缺氧，臨床給予相關藥物或介入治療，使阻塞或狹窄的血管再通，血流恢復，當血流恢復后，心肌可發(fā)生再灌注損傷[1，2]。心肌缺血再灌注損傷中，氧化損傷是主要原因。映山紅總黃酮是映山紅的主要有效成分，具有抗氧化作用。本文通過觀察映山紅總黃酮對大鼠心肌缺血再灌注損傷的影響，探討其對大鼠缺血再灌注損傷心肌的保護機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

選擇健康雄性SD大鼠75只，平均體重（200±15）g，由華中科技大學動物實驗中心提供。

1.2 藥品和試劑

映山紅總黃酮由安徽省合肥市合源醫(yī)藥科技有限公司提供，現(xiàn)用現(xiàn)配，以生理鹽水注射液配制。血清乳酸脫氫酶試劑盒、磷酸肌酸激酶試劑盒、丙二醛試劑盒、超氧化物歧化酶試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。實驗所用其他試劑或化學藥品均來自國內(nèi)廠家。

1.3 動物模型和分組

根據(jù)文獻報道的相關步驟，建立大鼠心肌缺血再灌注模型。采用20%烏拉坦成功麻醉大鼠后，行氣管插管及人工呼吸。在大鼠左側第四肋間實施開胸手術，剪開心包，大面積暴露心肌，將無創(chuàng)縫合針、6/0絲線置于左冠脈前降支的起始部位下方2mm處，備用。結扎冠脈，觀察心肌顏色改變及心電圖導聯(lián)ST段抬高情況，如ST段抬高0.1 mV或T波高聳，同時心肌由鮮紅色變?yōu)榘导t色，提示大鼠心肌缺血再灌注損傷模型造模成功。結扎冠脈引起缺血，缺血時間為30分鐘，之后再灌注120分鐘。75只大鼠隨機分為假手術組、模型組、高劑量組、中劑量組、低劑量組。假手術組和模型組給予同體積生理鹽水灌胃，高、中、低劑量組給予映山紅總黃酮灌胃（分別取映山紅總黃酮25.00mg/kg、12.50mg/kg、6.25mg/kg，以生理鹽水注射液稀釋到3m l），連續(xù)給藥7天，末次給藥24小時后造模。實驗結束后，取頸總動脈血，離心后去血清置－20℃保存待測；馬上取出大鼠心臟。

1.4 觀察指標

1.4.1 心肌梗死范圍參考鄭曙云等報道[3]的方法測定心肌梗死區(qū)濕重、心肌濕重計算心肌梗死范圍。心肌梗死區(qū)范圍=梗死區(qū)濕重/心肌濕重×100%。

1.4.2 血清乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶、丙二醛、超氧化物歧化酶水平血清乳酸脫氫酶、丙二醛、超氧化物歧化酶水平測定步驟和方法依據(jù)試劑盒說明書操作。

1.5 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 18.0進行統(tǒng)計學分析，進行單因素方差分析或t檢驗，P＜0.05表示差異有顯著性。

2 結果

2.1 各組大鼠缺血再灌注損傷后心肌梗死范圍測定結果

模型組梗死區(qū)濕重大于假手術組，高、中、低劑量組梗死區(qū)濕重小于模型組，差異有顯著性（P＜0.05）；模型組心肌梗死范圍大于假手術組，高、中、低劑量組心肌梗死范圍小于模型組，差異有顯著性（P＜0.05），見表1。

表1 各組大鼠缺血再灌注損傷后心肌梗死范圍比較（±s）

表1 各組大鼠缺血再灌注損傷后心肌梗死范圍比較（±s）

注：與假手術組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05

組別梗死區(qū)濕重（g）0.005±0.003 0.331±0.024a0.254±0.041b0.167±0.038b0.098±0.061bn假手術組模型組低劑量組中劑量組高劑量組15 15 15 15 15心肌濕重（g）0.651±0.024 0.659±0.037 0.664±0.025 0.671±0.042 0.660±0.032心肌梗死范圍（%）0.07±0.01 47.12±2.17a34.33±3.04b28.42±2.08b19.34±3.14b

2.2 各組大鼠血清乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶、超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量測定結果

模型組大鼠血清乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶活性高于假手術組，差異有顯著性（P＜0.05）；高、中、低劑量組血清乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶活性低于模型組，差異有顯著性（P＜0.05）；模型組大鼠丙二醛含量高于假手術組，差異有顯著性（P＜0.05）；高、中、低劑量組丙二醛含量分別低于模型組，差異有顯著性（P＜0.05）；模型組超氧化物歧化酶活性低于假手術組，差異有顯著性（P＜0.05）；高、中、低劑量組超氧化物歧化酶活性高于模型組，差異有顯著性（P＜0.05），見表2。

表2 各組乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶、超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量測定結果（±s）

表2 各組乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶、超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量測定結果（±s）

注：與假手術組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05

組別磷酸肌酸激酶（U/L）48.6±12.3 198.7±23.8a171.4±15.9b124.9±10.8b79.3±14.2b假手術組模型組低劑量組中劑量組高劑量組丙二醛（nmol/ml）0.65±0.12 3.54±0.45a2.83±0.37b2.08±0.41b1.32±0.36b乳酸脫氫酶（U/L）1 242.1±263.1 3158.3±158.7a2563.9±147.5b2019.6±205.8b1 601.5±163.4b超氧化物歧化酶（NU/mg）59.6±10.7 29.3±11.4a35.8±9.7b41.6±6.8b50.7±8.9b

3 討論

心肌梗死在祖國醫(yī)學中被稱為心脈瘀阻、心氣衰微，與患者氣虛、氣滯、血瘀、痰飲有關。心肌梗死是冠脈血流被阻斷而引起供血區(qū)域心肌缺血缺氧性壞死，屬于急癥[4，5]。心肌梗死經(jīng)臨床治療后冠脈再通，而冠脈再通可引起心肌缺血再灌注損傷。在對心肌缺血再灌注損傷的研究中發(fā)現(xiàn)，氧化損傷起著重要作用，心肌缺血后可產(chǎn)生氧自由基，使心肌細胞受損，進一步加重損傷。所以，心肌缺血再灌注損傷是心肌梗死后的重要病理生理過程，減輕心肌缺血再灌注損傷對改善患者預后起著重要作用。

映山紅即杜鵑花，具有和血、調(diào)經(jīng)、祛風濕功效。映山紅總黃酮是其有效成分[6]。研究表明，映山紅總黃酮具有抗氧化以及抑制細胞鈣超載、抑制一氧化氮的作用[7]。本研究結果顯示，模型組心肌梗死范圍顯著大于假手術組，而高、中、低劑量組心肌梗死范圍顯著小于模型組，說明映山紅總黃酮有助于減輕大鼠心肌缺血再灌注損傷程度；模型組血清乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶水平顯著高于假手術組，而高、中、低劑量組血清乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶水平分別低于模型組，說明映山紅總黃酮對缺血再灌注損傷大鼠心肌產(chǎn)生保護作用；模型組血清超氧化物歧化酶水平低于假手術組，高、中、低劑量組血清超氧化物歧化酶活性高于模型組，而模型組血清丙二醛含量高于假手術組，高、中、低劑量組血清丙二醛含量分別低于模型組，說明映山紅總黃酮能夠提高缺血再灌注大鼠心肌抗氧化損傷能力，減輕氧化損傷程度。可以認為，映山紅總黃酮對大鼠心肌缺血再灌注損傷有保護作用，可能與其抗氧化作用有關。

[1]邵瑩，吳啟南，周婧，等.淡竹葉黃酮對大鼠心肌缺血/再灌注損傷的保護作用[J].中國藥理學通報，2013，29（2）：241-247.

[2]任小宇，孫桂波，張強，等.三七莖葉皂苷對大鼠離體心臟缺血/再灌注損傷的保護作用[J].中國藥理學通報，2012，28（1）：92-96.

[3]鄭曙云，徐建國，趙振中.參附注射液對大鼠心肌缺血再灌注損傷的影響[J].中國中西醫(yī)結合雜志，2004，24（6）：541-543.

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[5]于洪艷，朱丹，丁寧.丹紅注射液預處理對心肌缺血/再灌注損傷大鼠心肌細胞凋亡的影響[J].中醫(yī)臨床研究，2015，6（13）：3-5.

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