劉綱毅+歐紅娟+容亓

【摘要】 目的 通過比對分析國產(chǎn)科美板式化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)與羅氏電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)測定糖類抗原199（Ca199）、糖類抗原125（Ca125）、糖類抗原153（Ca153）、總前列腺特異性抗原（tPSA）的檢測結(jié)果，進而對國產(chǎn)科美板式化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)進行方法學(xué)評價。

方法 用科美板式化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)和羅氏cobas E602免疫分析系統(tǒng)按項目分組分別檢測80份臨床血清樣本，以羅氏cobas E602分析系統(tǒng)為參考系統(tǒng)，對科美板式化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)進行比對分析，計算兩系統(tǒng)檢測結(jié)果之間的靈敏度、特異度、兩者檢測符合率等指標，對兩系統(tǒng)的檢測結(jié)果做相關(guān)回歸分析，并采用Kappa統(tǒng)計對兩系統(tǒng)檢測結(jié)果的一致性進行分析。

結(jié)果 科美板式化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)（Y）與羅氏cobas免疫分析系統(tǒng)（X）的相關(guān)回歸方程和相關(guān)系數(shù)為：tPSA（y=1.067x-0.798，r=0.973），Ca199（y=0.450x+4506，r=0.913），Ca125（y=0.151x+48.29，r=0.779），Ca153（y=0.794x+11.12，r=0.740）；兩系統(tǒng)結(jié)果的靈敏度、特異度、符合率及一致性強度為： Ca199（靈敏度97.44%，特異度95.12%，符合率96.25%，Kappa=0.902，最強一致性），tPSA（靈敏度95.56%，特異度85.71%，符合率91.25%，Kappa=0.800，高度一致性），Ca153（靈敏度81.63%，特異度9355%，符合率86.25%，Kappa=0.706，高度一致性），Ca125（靈敏度67.80%，特異度100%，符合率91.25%，Kappa=0.518，中度一致性）。

結(jié)論 科美板式化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)與羅氏cobas E602電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)的檢測結(jié)果相關(guān)性一般，檢測Ca199、tPSA、Ca153的結(jié)果一致性較好，而Ca125需要修正參考區(qū)間以取得與羅氏cobas E602分析系統(tǒng)更好的結(jié)果一致性。

【關(guān)鍵詞】 板式化學(xué)發(fā)光免疫分析；腫瘤標志物；免疫檢測系統(tǒng)；比對研究

中圖分類號：R730.43 文獻標識碼：A DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2017.03.007

【Abstract】 Objective To evaluate the methodology of domestic Kemei chemiluminescence immunoassay system through comparing and analyzing test results of carbohydrate antigen 199（CA199），carbohydrate antigen 125（CA125），carbohydrate antigen 153（CA153） and total prostate specific antigen（tPSA） detected by Kemei chemiluminescence immunoassay system and Roche electrochemiluminescence immunoassay system.

Methods 80 clinical serum samples grouped according to projects were detected by Roche Cobas E602 chemiluminescence system and Kemei plate chemical immunoassay system，respectively.Roche Cobas E602 analysis system was treated as reference system，and then testing results were compared with those of Kemei plate chemical detection system.And then，sensitivity，specificity，detection compliance rate and other indicators between the testing results of the two systems were calculated，regression analysis was carried out on the results of the two systems，and Kappa statistics was used for analyzing the consistency and relationship of testing results of the two systems.

Results The regression equation and correlation coefficient of each indicator of Kemei plate chemiluminescence analysis system（Y） and Roche Cobas E602 immunoassay system（X） were：tPSA （y=1.067x-0.798，r=0.973），Ca199 （y=0.450x+45.06，r=0.913），Ca125 （y=0.151x+48.29，r=0.779），Ca153 （y=0.794x+11.12，r=0.740）.The sensitivity，specificity，detection compliance rate and consistency strength of two the system were：Ca199（sensitivity 97.44%，specificity 95.12%，detection compliance rate 96.25% and Kappa=0.902，with the strongest consistency），tPSA（sensitivity 95.56%，specificity 85.71%，detection compliance rate 91.25%，Kappa=0.800，with high consistency），Ca153（sensitivity 81.63%，specificity 93.55%，detection compliance rate 86.25%，Kappa=0.706，with high consistency），Ca125（sensitivity 67.80%，specificity 100%，detection compliance rate 91.25%，Kappa=0.518，with moderate consistency）.

Conclusion The detection results of Kemei plate chemiluminescence immunoassay system and Roche Cobas E602 electrochemiluminescence immunoassay system have no significantly correlation，Ca199，tPSA and Ca153 levels of these two systems have good consistency，however，the reference interval of Ca125 is still needed to modify to achieve better consistency with Roche Cobas E602.

【Key words】 plate chemiluminescence immunoassay；tumor markers；immunoassay analysis system；comparative study

腫瘤是嚴重威脅人類健康的高發(fā)病率和高死亡率性疾病，隨著環(huán)境惡化、社會節(jié)奏加快，腫瘤發(fā)病率和死亡率呈逐年升高趨勢，世界衛(wèi)生組織（WHO）的報告表明，在未來20年，全球每年癌癥預(yù)估發(fā)病病例將由2012年的1400萬上升至2200萬，同期死亡病例將從每年820萬上升到每年1300萬[1]。大量研究和防治資料證實，早期診斷和早期治療是降低腫瘤病死率、改善患者預(yù)后的有效手段，錯過了早期最佳治療時機，腫瘤治療效果較差[2]。因此，長期以來用于腫瘤早期診療的腫瘤標志物（Tumor marker，TM）是人們關(guān)注的焦點。目前，大部分醫(yī)院都在體檢項目中加入腫瘤標志物檢測用于腫瘤疾病的早期預(yù)警，對于大批量的篩查樣本，如果使用國外檢測系統(tǒng)，檢測成本太高，而北京科美生物技術(shù)有限公司開發(fā)的板式化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)可檢測大部分腫瘤標志物項目。本實驗室擬采用該檢測系統(tǒng)進行糖類抗原125（Ca125）、糖類抗原199（Ca199）、糖類抗原153（Ca153）、總前列腺特異性抗原（tPSA）等項目的體檢樣本測定，現(xiàn)對該系統(tǒng)的檢測結(jié)果進行比對分析。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

參考檢測系統(tǒng)：羅氏cobas E602型全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其配套的校準品、試劑，質(zhì)控物為朗道免疫質(zhì)控品。（2）待評檢測系統(tǒng)：北京科美CC1500型板式化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其配套的校準品、試劑，質(zhì)控物為朗道免疫質(zhì)控品。

1.2 樣品

采用2015年4月在本院就診的門診及住院就診患者的新鮮標本，患者不區(qū)分年齡、性別、疾病，按項目Ca199、Ca125、Ca153、tPSA分別收集當日在參考檢測系統(tǒng)（羅氏）上檢測的樣本，樣本濃度范圍涵蓋低、中、高值，每個項目每天采集20份，連續(xù)采集4天，每個項目80份樣本，共分析320份樣本，血清無溶血、黃疸、脂血。

1.3 樣本檢測流程

按項目Ca199、Ca125、Ca153、tPSA分別收集在參考檢測系統(tǒng)（羅氏）上檢測的樣本，各項目樣本濃度范圍涵蓋低、中、高值，對采集到的血清同時在待評檢測系統(tǒng)（科美）上，按項目Ca199、Ca125、Ca153、tPSA分別進行檢測，兩檢測系統(tǒng)的操作過程嚴格按照儀器標準規(guī)程和試劑說明書執(zhí)行，每批次檢測都在質(zhì)控在控情況下完成。

1.4 檢測結(jié)果的判斷

依據(jù)待評檢測系統(tǒng)（科美）與參考檢測系統(tǒng)（羅氏）各自結(jié)果判斷標準進行判斷，在各自檢測系統(tǒng)參考區(qū)間內(nèi)的結(jié)果為陰性，在各自檢測系統(tǒng)參考區(qū)間外的結(jié)果陽性。

1.5 方法學(xué)比較 因兩系統(tǒng)檢測方法學(xué)差異較大，檢測結(jié)果除進行相關(guān)回歸分析外，同時依據(jù)兩檢測系統(tǒng)各自結(jié)果判斷標準進行定性判斷后再進行一致性分析。同一樣本，當待評系統(tǒng)與參考系統(tǒng)檢測結(jié)果均為陽性（或陰性）時，視為兩者結(jié)果一致，反之視為不一致。計算兩系統(tǒng)檢測結(jié)果之間的靈敏度、特異度、兩者檢測符合率等指標，采用Kappa統(tǒng)計對兩系統(tǒng)檢測結(jié)果的一致性進行分析，并對兩系統(tǒng)的檢測結(jié)果做相關(guān)回歸分析。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 采用Excel 2007軟件對兩系統(tǒng)的檢測結(jié)果進行相關(guān)回歸分析，并計算兩系統(tǒng)檢測結(jié)果之間的靈敏度、特異度、兩者檢測符合率等指標；采用SPSS 19.0軟件計算兩系統(tǒng)的Kappa值，并用Kappa值評估兩系統(tǒng)結(jié)果的一致性強度：Kappa值<0.00的一致性強度為弱，Kappa值0.00～0.20的一致性強度為輕，Kappa值0.21～0.40的一致性強度為尚好，Kappa值0.41～0.60的一致性強度為中度，Kappa值0.61～0.80的一致性強度為高度，Kappa值0.81～1.00的一致性強度為強。

2 結(jié) 果

2.1 比對檢測結(jié)果相關(guān)性分析 待評檢測系統(tǒng)（科美）與參考檢測系統(tǒng)（羅氏）對Ca199、Ca125、Ca153、tPSA檢測結(jié)果的相關(guān)性分析見圖1，相關(guān)回歸方程及相關(guān)系數(shù)r為tPSA（y=1.067x-0.798，r=0.973），Ca199（y=0.450x+45.06，r=0.913），Ca125（y=0.151x+48.29，r=0.779），Ca153（y=0.794x+11.12，r=0.740）。

2.2 比對檢測結(jié)果一致性分析 待評檢測系統(tǒng)（科美）與參考檢測系統(tǒng)（羅氏）對Ca199、Ca125、Ca153、tPSA檢測結(jié)果的靈敏度、特異度、兩者檢測符合率、Kappa統(tǒng)計及一致性強度為：Ca199（靈敏度97.44%，特異度95.12%，符合率96.25%，Kappa=0.902，最強一致性），tPSA（靈敏度95.56%，特異度85.71%，符合率91.25%，Kappa=0.800，高度一致性），Ca153（靈敏度81.63%，特異度93.55%，符合率86.25%，Kappa=0.706，高度一致性），Ca125（靈敏度67.80%，特異度100%，符合率91.25%，Kappa=0.518，中度一致性）。

3 討 論

腫瘤標志物是一類能反映腫瘤發(fā)生、發(fā)展，監(jiān)測腫瘤療效的物質(zhì)的總稱，廣泛用于良惡性腫瘤的鑒別和早期診斷，以及腫瘤的療效觀察。Ca125、Ca199、Ca153、tPSA是其中應(yīng)用較廣的腫瘤標志物，用于相關(guān)腫瘤的早期診斷、療效觀察等。Ca125是一種大分子糖蛋白，用于卵巢癌的診斷及療效觀察，并且在肺癌、乳腺癌、卵巢癌、胃癌患者Ca125陽性率分別為58.6%、63.7%、66.7%、62.5%[3]。Ca199是一種類糖脂，在成人的胰、胃、肺中濃度較低，是一種與腺癌高度相關(guān)的抗原物質(zhì)，胃癌伴轉(zhuǎn)移和胰腺癌Ca199增高尤為明顯，對消化系統(tǒng)惡性腫瘤診斷優(yōu)于其他腫瘤標志物[4]。Ca153是乳腺相關(guān)抗原，存在于多種腺癌細胞內(nèi)，在乳腺癌患者體內(nèi)顯著升高。大量臨床研究資料證實，Ca153是治療后監(jiān)測乳腺癌復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的較好指標[5～6]；另外Ca153也存在于肺腺癌內(nèi)，肺癌患者的Ca153靈敏度低下，僅為17.2%[3]；但有文獻指出，Ca153測定對肺良性疾病患者假陽性率低，故血清Ca153異常升高，則基本可以判斷為肺癌[7]。tPSA絕大部分來源于前列腺，具有器官特異性，有助于前列腺增生、前列腺炎和前列腺癌的早期診斷、監(jiān)測治療效果及判斷預(yù)后等?；贑a199、Ca125、Ca153、tPSA良好的腫瘤相關(guān)性，大部分醫(yī)院把其列入體檢項目，用于高危人群的體檢篩查。

目前，用于檢測Ca199、Ca125、Ca153、tPSA的儀器系統(tǒng)眾多，各方面檢測性能指標優(yōu)越的儀器系統(tǒng)多為國外進口儀器系統(tǒng)，羅氏cobas E602電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)是其中最優(yōu)秀的儀器系統(tǒng)之一，但儀器、試劑、耗材成本昂貴，不適合大批量樣本篩查，而北京科美板式化學(xué)發(fā)光免疫檢測系統(tǒng)把標記抗原或抗體包被在固相反應(yīng)孔內(nèi)，利用辣根過氧化物酶催化魯米諾化學(xué)發(fā)光原理顯示抗原抗體反應(yīng)，在保證精密度較好、準確度較高、線性范圍較寬等較優(yōu)異的性能情況下，還能大大降低試劑和耗材成本，并且操作模式靈活，既能適用儀器自動化也能手工完成試驗，適合大批量樣本檢測及經(jīng)濟效益較小的醫(yī)院開展腫瘤標志物檢測項目。

科美板式化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)（后稱科美系統(tǒng)）與羅氏cobas E602免疫分析系統(tǒng)（后稱羅氏系統(tǒng)）為兩種完全不同的檢測方法學(xué)，科美系統(tǒng)為固相反應(yīng)，羅氏系統(tǒng)為液相反應(yīng)，本次試驗就科美系統(tǒng)與羅氏系統(tǒng)的檢測結(jié)果的相關(guān)性和一致性進行比對研究。從圖1的相關(guān)性散點圖可以看出，兩系統(tǒng)因方法學(xué)差異較大，其相關(guān)性較差，僅tPSA的相關(guān)系數(shù)（r）達到0.973，說明科美系統(tǒng)tPSA與羅氏系統(tǒng)的檢測結(jié)果有較好的相關(guān)性，其余Ca199、Ca125、Ca153的相關(guān)系數(shù)（r）都較低，特別是Ca125和Ca153的相關(guān)系數(shù)r<0.90，相關(guān)性很差，說明兩系統(tǒng)檢測Ca125、Ca153結(jié)果沒有可比性；同時從散點圖可以看出，Ca199在小于300 U/ml濃度時，有一定相關(guān)性，大于300 U/ml濃度時，兩系統(tǒng)無可比性，Ca125也出現(xiàn)同樣的情況，經(jīng)分析，考慮科美系統(tǒng)為固相反應(yīng)，在高濃度樣本時，反應(yīng)的效率沒有液相反應(yīng)的效率高，故高濃度樣本，兩系統(tǒng)結(jié)果差異較大。因兩系統(tǒng)檢測結(jié)果差異較大，相關(guān)性不佳，在評價結(jié)果一致性時，采用各自檢測系統(tǒng)的參考區(qū)間判斷陽性或陰性結(jié)果后，再對定性結(jié)果進行Kappa統(tǒng)計分析，兩系統(tǒng)在檢測Ca199、Ca125、Ca153、tPSA等項目中，Ca199的Kappa值為0.902，一致性強度為最強，靈敏度、特異度和兩者檢測符合率都達到95%以上，而Ca153、tPSA的一致性強度為高度，一致性尚可，Ca125的一致性強度最弱，一致性強度為中度。雖然科美系統(tǒng)檢測Ca199、Ca125、Ca153、tPSA的結(jié)果與羅氏系統(tǒng)相關(guān)性一般，但不同系統(tǒng)建立各自的參考區(qū)間可解決方法學(xué)差異的問題，此觀點與勾宗蓉等[8]觀點一致。在本研究中，Ca199在科美系統(tǒng)與羅氏系統(tǒng)的相關(guān)性一般，但經(jīng)過參考區(qū)間判斷的定性結(jié)果一致性卻最強，而tPSA在相關(guān)性分析中顯示，兩系統(tǒng)結(jié)果有較好的相關(guān)性，但在一致性分析中顯示，一致性強度次之，而科美系統(tǒng)的Ca125沒有設(shè)置滿意的參考區(qū)間，與羅氏系統(tǒng)結(jié)果的一致性強度僅為中度一致，可見不同檢測系統(tǒng)建立正確的參考區(qū)間非常重要。

綜上所述，科美板式化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)檢測Ca199、tPSA、Ca153的結(jié)果與羅氏cobas E602電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)的相關(guān)性一般，按參考區(qū)間判讀定性結(jié)果一致性較好，而科美系統(tǒng)Ca125項目尚需要修正參考區(qū)間以取得與羅氏系統(tǒng)更好的結(jié)果一致性。臨床醫(yī)務(wù)工作者在應(yīng)用Ca199、tPSA、Ca153、Ca125時，應(yīng)注意檢測方法及參考區(qū)間，在監(jiān)測患者療效情況時只能采用同一檢測系統(tǒng)，避免不同檢測系統(tǒng)結(jié)果差異對臨床診療造成的錯誤判斷。

參 考 文 獻

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（收稿日期：2017-02-15 修回日期：2017-04-21）

（編輯：潘明志）