陳麗+馬書玉

（牡丹江友搏藥業(yè)有限責(zé)任公司）

摘 要：目的：結(jié)合文獻(xiàn)方法及中美藥典方法，通過方法學(xué)研究，建立可操作性更強(qiáng)的測(cè)定阿立哌唑片有效阿立哌唑含量的分析方法。方法：高效液相色譜法。色譜柱為ODS-A色譜柱（46mm×25cm，5？滋m）；流動(dòng)相A為：乙腈和0.05%三氟乙酸（10：90），流動(dòng)性B為乙腈和0.05%三氟乙酸（90：10），進(jìn)行梯度洗脫；流速：1.2ml/min，進(jìn)樣量：20μl，紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)設(shè)為254nm；色譜柱柱溫設(shè)為35℃。結(jié)果：有效成分阿立哌唑進(jìn)樣量在0.5186～5.1860μg與峰面積呈良好的線性關(guān)系（r=0.9999），加樣回收率為100.47%，RSD為1.08%；結(jié)論：本方法測(cè)定阿立哌唑片含量準(zhǔn)確、重復(fù)性較好，可操作性及方便性由于現(xiàn)藥典方法，可以成為阿立哌唑片含量測(cè)定方法。

關(guān)鍵詞：阿立哌唑片；高效液相色譜法；含量測(cè)定

阿立哌唑是一種新型的非典型抗精神分裂癥藥物，對(duì)DA能神經(jīng)系統(tǒng)具有雙向調(diào)節(jié)作用，是DA遞質(zhì)的穩(wěn)定劑。與D2、D3、5-HT1A和5-HT2A受體有很高的親和力。通過對(duì)D2和5-HT1A受體的部分激動(dòng)作用及對(duì)5-HT2A受體的拮抗作用來產(chǎn)生抗精神分裂癥作用的。用于治療各類型的精神分裂癥?？勺鳛橹匦砸钟粽系K，抽動(dòng)障礙和與自閉癥相關(guān)的煩躁的附加治療。國(guó)外臨床試驗(yàn)表明，對(duì)精神分裂癥的陽(yáng)性和陰性癥狀均有明顯療效，也能改善伴發(fā)的情感癥狀，降低精神分裂癥的復(fù)發(fā)率。

本文參考了國(guó)內(nèi)外多篇文獻(xiàn)及歐美藥典標(biāo)準(zhǔn)，最終建立了適宜仿制制劑的，可靠穩(wěn)定的阿立哌唑定量方法。

1 儀器與材料

高效液相色譜儀：Thermo UltiMate3000型，電子分析天平：梅特勒XS205。阿立哌唑?qū)φ掌?（批號(hào) 100776-200501）由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。流動(dòng)相用乙腈為色譜純；三氟乙酸為分析純；水為超純水；樣品為公司自制阿立哌唑片。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件[1]：

色譜柱：Inertsil ODS-A（46mm×25cm，5？滋m）；柱溫：35℃

流動(dòng)相：流動(dòng)相A為：乙腈和0.05%三氟乙酸（10：90），流動(dòng)性B為乙腈和0.05%三氟乙酸（90：10）。梯度洗脫配比情況如下：0至2min流動(dòng)相A：80%；2至10min流動(dòng)相A：80%→65%；10至20min流動(dòng)相A：65%→10%；20至25min流動(dòng)相A：10%；25至26min流動(dòng)相A：10%→80%；26至35min流動(dòng)相A：80%。

波長(zhǎng)：254nm

流速：1.2ml/min，進(jìn)樣量：20μl

2.2 稀釋劑、對(duì)照品儲(chǔ)備液與對(duì)照品溶液的制備

稀釋劑：乙腈：甲醇：水：乙酸 （30：10：60：1）

對(duì)照品儲(chǔ)備液：稱取阿立哌唑?qū)φ掌?03.72mg，置100mL量瓶中，并記錄，加入稀釋劑使溶解并定容至刻度，制得1mg/ml的對(duì)照品儲(chǔ)備液，并注意避光保存。精密量取上述儲(chǔ)備液對(duì)照品1ml置10ml容量瓶中，加稀釋劑至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液制備：取阿立哌唑片10片，研細(xì)，精密稱取約相當(dāng)于阿立哌唑10mg的粉末，置100mL容量瓶中，加入稀釋劑適量，超聲處理10分鐘，放冷，加稀釋劑至刻度后，搖勻，濾過，作為供試品溶液。

依照2.1項(xiàng)色譜條件進(jìn)行測(cè)定。

2.4 方法學(xué)驗(yàn)證

2.4.1 線性關(guān)系考察

精密量取2.2項(xiàng)下的對(duì)照品溶液儲(chǔ)備液0.25ml，0.5ml，1ml，1.5ml，2.0ml，2.5ml置10ml容量瓶中，分別加稀釋劑溶解至刻度，搖勻，制成25，50，100，150，200，250μg/ml的線性關(guān)系考察用對(duì)照品溶液。按2.1色譜條件進(jìn)行測(cè)定并記錄色譜圖，以峰面積A為縱坐標(biāo)，以對(duì)照品溶液濃度C為橫坐標(biāo)，制得標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程：A=0.3428C+0.3127 r=0.9999。結(jié)果：阿立哌唑濃度在25.93～259.30μg/ml（進(jìn)樣體積20μl），即進(jìn)樣量在0.5186～5.1860μg范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.4.2 精密度試驗(yàn)

精密量取2.2項(xiàng)下阿立哌唑?qū)φ掌啡芤阂勒丈鲜錾V條件連續(xù)進(jìn)樣6針，每針20μl，記錄色譜圖，以峰面積A為考察指標(biāo)，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD值，應(yīng)小于2%。試驗(yàn)結(jié)果見表2。

結(jié)果：阿立哌唑?qū)φ掌啡芤哼B續(xù)進(jìn)樣6次，峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD值小于2%，表明精密度良好。

2.4.3 重復(fù)性試驗(yàn)

按照2.3項(xiàng)下供試品溶液制備方法，取同一批次阿立哌唑片樣品（規(guī)格10mg）平行制備6份供試品溶液，取對(duì)照品溶液及供試品溶液各20μl分別進(jìn)樣，記錄色譜圖，外標(biāo)一點(diǎn)法，計(jì)算阿立哌唑的含量，結(jié)果：6份平行樣品的阿立哌唑含量RSD值為0.92%，低于于2%表明供試品處理方法可靠穩(wěn)定。

2.4.4 回收率試驗(yàn)

取阿立哌唑片10片，研細(xì)，精密稱取約相當(dāng)于阿立哌唑5mg的粉末9份，分別置100mL容量瓶中，加入阿立哌唑?qū)φ掌穬?chǔ)備液溶液4ml，5ml，6ml各三份，再加入稀釋劑適量，超聲處理10分鐘，放冷，加稀釋劑至稀釋刻度后，搖勻，濾過，作為供回收率試驗(yàn)用的供試品溶液。經(jīng)過0.45μm濾膜，分別精密量取本項(xiàng)下供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，外標(biāo)法計(jì)算含量和加樣回收率。結(jié)果：低濃度回收率分別為：101.69%、99.58%、101.14%，平均回收率100.80%；中濃度回收率分別為：99.07%、101.93%、99.19%，平均回收率100.06%；高濃度回收率分別為：99.94%、99.93%、101.77%，平均回收率100.55%。三個(gè)濃度9個(gè)供試品回收率數(shù)據(jù)的平均值為100.47，RSD為1.08%。

結(jié)論：阿立哌唑的加樣回收率在99.07%～101.93%之間，三個(gè)濃度9個(gè)供試品回收率數(shù)據(jù)的平均值為100.47，RSD為1.08%，表明該方法準(zhǔn)確可靠。

2.5 樣品測(cè)定

采用上述建立的方法對(duì)公司自制的四批阿立哌唑片樣品的含量進(jìn)行測(cè)定，以通過實(shí)際測(cè)定進(jìn)一步證明方法可行性。四批阿立哌唑片樣品的含量測(cè)定結(jié)果分別為：10.02mg/片、10.03mg/片、10.01mg/片、9.99mg/片。符合含量要求。表檢驗(yàn)方法可靠。

3 討論

本文旨在建立可測(cè)定阿立哌唑片有效成份阿立哌唑含量的分析方法。在試驗(yàn)前對(duì)中國(guó)藥典方法和美國(guó)藥典方法進(jìn)行了比較。通過方法學(xué)對(duì)比試驗(yàn)，認(rèn)為美國(guó)藥典色譜條件更加可靠。首先，阿立哌唑不穩(wěn)定，在色譜流動(dòng)相系中美國(guó)藥典為三氟乙酸可能對(duì)阿立哌唑有保護(hù)作用或是改善分離效果。另外，阿立哌唑見光不穩(wěn)定，需要注意避光操作。再有，美國(guó)藥典色譜柱為ODS-A，，中國(guó)藥典并未強(qiáng)調(diào)使用ODS，只說明填料為十八烷基鍵合硅膠。實(shí)際上，普通十八烷基鍵合硅膠柱與ODS（美國(guó)藥典L1）還是有一定區(qū)別的。本次試驗(yàn)依據(jù)美國(guó)藥典的方法制定，通過試驗(yàn)證明該方法可以用于阿立哌唑片有效成份阿立哌唑含量的測(cè)定。

參考文獻(xiàn)

[1]美國(guó)藥典.USP38-NF33 S2.