羅俊霞，賈 冬，范 知，趙建波

（1.鄭州市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測流通中心，河南 鄭州 450006；2.鄭州市農(nóng)業(yè)信息中心，河南 鄭州 450006 ；3.鄭州市園藝工作站，河南 鄭州 450006）

隨著社會的發(fā)展和生活水平的提高，人們對食品安全品質(zhì)的要求越來越高。為此，國家在2002年啟動了無公害農(nóng)產(chǎn)品行動計(jì)劃，從中央到地方，各地紛紛成立了農(nóng)產(chǎn)品檢測機(jī)構(gòu)，加強(qiáng)對農(nóng)產(chǎn)品的檢測監(jiān)管；同時，為了保障各檢測機(jī)構(gòu)出具檢測結(jié)果的可靠性，各級農(nóng)業(yè)部門及認(rèn)監(jiān)委都加大了對檢測機(jī)構(gòu)的考核力度，對各機(jī)構(gòu)的檢測能力進(jìn)行檢測能力驗(yàn)證。目前，蔬菜水果中農(nóng)藥殘留的檢測，多數(shù)檢測人員都沿用農(nóng)業(yè)部的方法[1]來進(jìn)行處理，但是要想將檢測結(jié)果做到準(zhǔn)確，順利通過各級的能力驗(yàn)證，需要在檢測過程中把握幾個關(guān)鍵步驟，做好質(zhì)量控制。筆者長期從事農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的檢測工作，結(jié)合歷年來在農(nóng)業(yè)部、河南省的檢測能力驗(yàn)證中遇到的問題，總結(jié)出幾點(diǎn)注意事項(xiàng)，以期對檢測工作者有所幫助。

1 造成檢測結(jié)果出現(xiàn)誤差的因素

1.1 人為造成的誤差

檢測人員的技術(shù)和素質(zhì)是影響檢測質(zhì)量的重要因素。檢測人員在檢測的過程中，出現(xiàn)操作誤差的情況是常有的。不同人員在前處理、上機(jī)或判斷上存在一定的差異。所以，如果操作人員未能嚴(yán)格按照相關(guān)的規(guī)范進(jìn)行執(zhí)行的話，很容易導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)誤差。另外，在很大程度上還與工作人員的工作態(tài)度以及熟練度有關(guān)。

1.2 前處理過程中的誤差

檢測結(jié)果的可靠與否跟前處理的過程息息相關(guān)，譬如前處理過程中使用的器具如果沒有清洗干凈，會對所檢測的樣品造成污染，導(dǎo)致定量誤差或?qū)Χㄐ栽斐筛蓴_，而定性錯誤；如果前處理過程中所使用的量器不精密，則會造成測定結(jié)果出現(xiàn)較大的定量誤差，從而對測定結(jié)果造成較大的影響。

1.3 上機(jī)測定過程中的錯誤或者誤差

儀器和設(shè)備是影響測定結(jié)果的重要因素。儀器和設(shè)備的穩(wěn)定和規(guī)范是檢測結(jié)果質(zhì)量保證的關(guān)鍵，因此在農(nóng)藥殘留的測定過程中要重視儀器設(shè)備的維護(hù)和保養(yǎng)，保證儀器設(shè)備在檢測過程中處于最佳狀態(tài)，保證檢測結(jié)果的可靠性。

2 提高蔬菜農(nóng)藥殘留檢測過程中質(zhì)量控制的關(guān)鍵環(huán)節(jié)和應(yīng)該采取的措施

2.1 加強(qiáng)檢測隊(duì)伍素質(zhì)建設(shè)，不斷提高檢測質(zhì)量

為了更好地確保實(shí)驗(yàn)分析過程中的準(zhǔn)確度，應(yīng)該對檢測人員進(jìn)行必要的培訓(xùn)，同時應(yīng)該明確檢測人員的職責(zé)，提升檢測人員的檢測能力。同時，檢測人員應(yīng)嚴(yán)格要求自己，及時更新專業(yè)知識，提高檢測業(yè)務(wù)水平。做到人員精、素質(zhì)高、能力強(qiáng)，提高檢測人員的綜合能力。

2.2 做好前處理中質(zhì)量的控制，避免樣品被污染

2.2.1 玻璃器皿等前處理器具的清洗

前處理過程中使用的所有的玻璃器皿，包括均質(zhì)機(jī)的刀頭的清洗非常重要，其直接影響著檢測結(jié)果的準(zhǔn)確與否，如果這些玻璃器皿清洗不干凈，則會導(dǎo)致檢測結(jié)果定性的錯誤和定量的不準(zhǔn)確。而在生物學(xué)試驗(yàn)中所使用的玻璃器皿或者塑料器皿清潔與否直接影響試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，如果器皿被污染或者不干凈，會導(dǎo)致較大的試驗(yàn)誤差，甚至?xí)霈F(xiàn)相反的試驗(yàn)結(jié)果，導(dǎo)致試驗(yàn)失敗[2-3]，所以在試驗(yàn)之前必須保證玻璃器皿清洗干凈，根據(jù)不同的測定內(nèi)容選取不同的清洗方法，在進(jìn)行蔬菜中農(nóng)藥殘留的測定時，最好在試驗(yàn)之前用有機(jī)溶劑將所用的玻璃器皿進(jìn)行清洗之后烘干或者晾干[4-5]。

2.2.2 玻璃器皿的選取與校正

實(shí)驗(yàn)室使用的移液管、滴定管和容量瓶等精密量器，可以分為A級和B級，其中A級的準(zhǔn)確度比B級高，表1是滴定管計(jì)量要求[6]。

由表1知，在前處理過程中使用A級的移液管、容量瓶等精密的量器，對最終的檢測結(jié)果造成的誤差最小。但是，玻璃器皿在使用時間較長之后，可能會造成其精密度下降，所以，在進(jìn)行樣品前處理之前要對這些精密量器進(jìn)行校正，選取準(zhǔn)確度較高的量器進(jìn)行定容和量取液體。

2.3 上機(jī)測定

2.3.1 樣品定性

有條件的單位如果有液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，可以在對樣品進(jìn)行提取之后對較小體積樣品用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀或者氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行準(zhǔn)確定性，否則可以購買DB-5（VF-5）系列弱極性的毛細(xì)色譜柱和DB-17（DB1701；VF-17）系列中等極性的毛細(xì)管色譜柱，用雙柱進(jìn)行定性，以免造成定性錯誤。

在用電子捕獲檢測器（ECD）檢測菊酯類農(nóng)藥殘留時，氰戊菊酯和氟氨氰菊酯分別都是2個色譜峰，在VF-5色譜柱上，氟氨氰菊酯的第1個色譜峰在氰戊菊酯的2個色譜峰之間，第2個色譜峰和氰戊菊酯的第2個色譜峰幾乎是重疊的；而在VF-17色譜柱上，則這2種物質(zhì)的分離效果較好。2種物質(zhì)在VF-5和VF-17色譜柱上的色譜圖見圖1～2。

由圖1知，氰戊菊酯在VF-5的色譜柱上的保留時間分別為13.405 min和13.979 min，氟氨氰菊酯在VF-5色譜柱上的保留時間分別為13.763 min和13.986 min，氟氨氰菊酯的第1個色譜峰在氰戊菊酯的2個色譜峰之間，而氟氨氰菊酯的第2個色譜峰同氰戊菊酯的第2個色譜峰分不開，幾乎完全重疊；由圖2知，在VF17色譜柱上氰戊菊酯和氟氨氰菊酯的保留時間分別為13.316 min和13.830 min、12.119 min和12.304 min，2種物質(zhì)在VF-17色譜柱上可以完全分離，所以用VF-17色譜柱對這兩種物質(zhì)進(jìn)行定量，可以避免氟氨氰菊酯和氰戊菊酯疊加造成的定量上的誤差。

電子捕獲檢測器是一個半通用型的檢測器[7]，很多有機(jī)磷類的物質(zhì)在電子捕獲檢測器上面都有響應(yīng)，比如毒死蜱，在農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[1]里毒死蜱是用火焰光度檢測器進(jìn)行測定的，但毒死蜱在電子捕獲檢測器上也有響應(yīng)，很多文獻(xiàn)都有用電子捕獲檢測器進(jìn)行毒死蜱測定的報(bào)道[8-11]，而毒死蜱和三唑酮在VF-17上的色譜柱是分不開的，如果在電子捕獲檢測器上用中等極性的色譜柱（VF-17）對三唑酮進(jìn)行定量，樣品里如果同時含有毒死蜱就會對三唑酮的定量造成誤差。毒死蜱和三唑酮在VF-17色譜柱、電子捕獲檢測器上的色譜圖見圖3。由圖3可知，毒死蜱、三唑酮在VF-17色譜柱上的保留時間分別是6.44 min、6.41 min，二者完全分不開。所以，如果用中等極性的色譜柱、電子捕獲檢測器檢出了三唑酮，一定要慎重對待。

表1 滴定管計(jì)量要求

圖1 氰戊菊酯和氟氨氰菊酯在VF-5的色譜柱、電子捕獲檢測器上的色譜

圖2 氰戊菊酯和氟氨氰菊酯在VF-17色譜柱、電子捕獲檢測器上的色譜

2.3.2 上機(jī)時進(jìn)樣口襯管的選擇和處理

各個廠家的進(jìn)樣口襯管都有很多種不同的型號，除了襯管的外形不同決定了襯管的型號不同之外，襯管是否經(jīng)惰性化處理是決定定量結(jié)果準(zhǔn)確與否的重要因素，因?yàn)槎栊曰幚淼囊r管對農(nóng)藥不會有吸附作用，所以用這種襯管定量農(nóng)藥，誤差不會太大。而硅烷化處理的襯管在使用之后一般都要用各種水、丙酮、乙腈等溶劑進(jìn)行逐步清洗，清洗的次數(shù)越多越干凈，則襯管里面的活性點(diǎn)位越多，對農(nóng)藥的吸附越大，造成通過色譜柱進(jìn)入檢測器的農(nóng)藥的量相對減少，以至于對其定量造成較大誤差，誤差較大的農(nóng)藥主要有甲胺磷、氧化樂果等分子量較小的農(nóng)藥。

對于沒有經(jīng)硅烷化處理的襯管，在進(jìn)行檢測時一般用比較干凈的樣品，也就是說用沒有檢出農(nóng)藥的樣品基質(zhì)來飽和襯管上的活性點(diǎn)位，以消除襯管對農(nóng)藥的吸附。一般用番茄、黃瓜、辣椒、西葫蘆等沒有檢出農(nóng)藥的樣品基質(zhì)，在儀器穩(wěn)定好之后，進(jìn)10針左右的這樣的樣品。具體進(jìn)針的次數(shù)根據(jù)自己的經(jīng)驗(yàn)用氧化樂果或者甲胺磷的峰高來進(jìn)行判斷，待氧化樂果、甲胺磷的峰高恢復(fù)正常再測定待檢樣品。

2.3.3 充分考慮基質(zhì)對農(nóng)藥殘留定量的影響

在基質(zhì)對有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測結(jié)果的影響方面，黃寶勇等[12-20]做了大量的研究，不同的蔬菜基質(zhì)對同一種農(nóng)藥殘留定量的影響是不同的，在相同的蔬菜基質(zhì)中不同的農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)也不一樣，同時，相同的農(nóng)藥，相同的基質(zhì)，其濃度的大小不同其基質(zhì)效應(yīng)也有可能不同[13-15]，那么為了消除基質(zhì)對農(nóng)藥殘留定量的影響，在進(jìn)行蔬菜中農(nóng)藥殘留的測定時，最好用對應(yīng)的相對干凈的樣品基質(zhì)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品的配置。2.3.4 制備相近濃度的陽性添加樣品，進(jìn)行檢測結(jié)果校正

圖3 三唑酮和毒死蜱在VF-17色譜柱、電子捕獲檢測器上的色譜

質(zhì)量控制是對檢測定量結(jié)果進(jìn)行控制的關(guān)鍵[21-25]，添加陽性樣品、計(jì)算添加回收率，由此對檢測結(jié)果進(jìn)行校正是保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的一個關(guān)鍵步驟[26]，這也是每一位檢測工作者在日常的檢測工作中所應(yīng)該注意的一個細(xì)節(jié)。尤其是在測定能力驗(yàn)證的樣品時，先對樣品進(jìn)行粗略的定量，根據(jù)這個量進(jìn)行陽性樣品的制備，再根據(jù)陽性樣品的添加量和實(shí)際測定量計(jì)算出添加回收率，由此對樣品的測定值進(jìn)行校正，保證了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠。

3 小結(jié)

在進(jìn)行蔬菜農(nóng)藥殘留測定的過程中，要想得到準(zhǔn)確可靠的檢測結(jié)果，檢測人員必須有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)態(tài)度和高度的思想覺悟，認(rèn)識到檢測分析工作的重要性，同時還要熟練掌握質(zhì)量控制的各種方法，檢測過程中所應(yīng)注意的關(guān)鍵環(huán)節(jié)也應(yīng)該了然于胸，并在檢測工作中不斷分析和總結(jié)，做好質(zhì)量控制，把握關(guān)鍵步驟，提高檢測分析工作的質(zhì)量，使分析結(jié)果準(zhǔn)確、有效。此外，由于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的操作條件對檢測結(jié)果也有一定的影響，因此實(shí)驗(yàn)室內(nèi)一定要保持整潔、封閉，同時加強(qiáng)通風(fēng)、防火，預(yù)防化學(xué)試劑爆炸等事故的發(fā)生。

[1]蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留檢測方法,中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn):NY/T 761-2008:2008[S/OL].[2017-02-06].http://www.csres.com/detail/191872.html.

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