賴燁鈐

甲狀腺乳頭狀癌BRAFv600E基因突變探究

賴燁鈐

目的分析BRAFv600E基因突變能否作為甲狀腺乳頭狀癌患者臨床病理學(xué)特征的預(yù)后判斷。方法從各大知名數(shù)據(jù)庫(kù)中篩選2014年3月前的有關(guān)檢測(cè)是否發(fā)生BRAFv600E基因突變的甲狀腺乳頭狀癌患者的文獻(xiàn), 參照紐卡斯?fàn)?- 渥太華量表對(duì)文獻(xiàn)質(zhì)量進(jìn)行評(píng)分, 本研究選擇文獻(xiàn)質(zhì)量3~5星的文獻(xiàn)(滿分9星), 并提取文獻(xiàn)中的可靠數(shù)據(jù), 采用RevMan5.1對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行Meta分析。結(jié)果共篩選出23 篇文獻(xiàn), 共有2771例甲狀腺乳頭狀癌患者(均進(jìn)行過(guò)BRAFv600E基因突變檢測(cè))納入甲狀腺乳頭狀癌臨床病理學(xué)特征和BRAFv600E基因突變的關(guān)系的分析。發(fā)生BRAFv600E基因突變率為25%~84%, 平均發(fā)生BRAFv600E基因突變的比例為54.7%。經(jīng)過(guò)Meta分析還顯示BRAFv600E基因突變與患者性別、年齡>45周歲或是平均年齡、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無(wú)顯著聯(lián)系(P>0.05)；BRAFv600E基因突變與甲狀腺外浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、高TNM分期有關(guān)(OR=2.17、1.96、2.42, P<0.01)。結(jié)論根據(jù)對(duì)BRAFv600E基因突變與中國(guó)甲狀腺乳頭狀癌患者臨床病例特征進(jìn)行Meta分析發(fā)現(xiàn), BRAFv600E基因突變可以在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、甲狀腺外浸潤(rùn)、高TNM分期等方面對(duì)中國(guó)患者做出預(yù)后評(píng)估。但需要說(shuō)明的是, 遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移檢測(cè)技術(shù)尚不成熟, 沒有比較簡(jiǎn)單的方法可以檢測(cè)出患者是否發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移, 所以本研究關(guān)于BRAFv600E基因突變與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的觀點(diǎn)仍然有待商榷, 希望可以有更多類似的研究或更多的相關(guān)數(shù)據(jù)可以進(jìn)一步驗(yàn)證。

甲狀腺乳頭狀癌；BRAFv600E；Meta分析；基因突變

近年有越來(lái)越多的人患有甲狀腺惡性腫瘤［1］。在甲狀腺惡性腫瘤患者中最多的是甲狀腺乳頭狀癌, 而BRAFv600E基因突變則可以影響甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)生和發(fā)展。最近研究發(fā)現(xiàn)［2］, 在良性病變組織或者是正常甲狀腺組織中都沒有BRAFv600E基因突變, 但是在27%~90%的甲狀腺乳頭狀癌會(huì)發(fā)現(xiàn)BRAFv600E基因突變, 并且已有研究顯示許多患者的臨床病理學(xué)特征與BRAFv600E基因突變有關(guān), BRAFv600E基因突變影響了患者的年齡、甲狀腺外浸潤(rùn)、高TNM分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等, 這些因素都有助于甲狀腺乳頭狀癌的預(yù)后判斷［3-5］。目前對(duì)于BRAFv600E基因突變對(duì)甲狀腺癌乳頭狀癌預(yù)后判斷的有效性尚有爭(zhēng)議, 雖然國(guó)外有學(xué)者得出了BRAFv600E基因突變與甲狀腺患者的臨床病理學(xué)特征明顯相關(guān)的結(jié)論, 但是目前針對(duì)中國(guó)患者國(guó)內(nèi)尚無(wú)深入研究［6-10］。本文據(jù)此對(duì)已有的相關(guān)研究結(jié)果進(jìn)行Meta分析, 希望可以找到BRAFv600E基因突變與甲狀腺乳頭狀癌患者的預(yù)后判斷之間是否存在一定的關(guān)系, 為甲狀腺癌患者的治療提供治療建議。

1 材料與方法

1.1 文獻(xiàn)來(lái)源 選擇研究對(duì)象為中國(guó)甲狀腺乳頭狀癌患者,組織標(biāo)準(zhǔn)排除細(xì)針穿刺抽取活體組織標(biāo)本, 主要為新鮮或石蠟切片的組織切片。文獻(xiàn)主要來(lái)源于2014年3月前根據(jù)定義選擇標(biāo)準(zhǔn)檢索于維普數(shù)據(jù)庫(kù)、PubMed、Embase、中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)、中國(guó)知網(wǎng)和萬(wàn)方的期刊文獻(xiàn)中篩選的數(shù)據(jù)。中文檢索的關(guān)鍵字為“甲狀腺”、“乳頭狀”、“BRAF”；外文檢索的關(guān)鍵詞為“thyroid”、“papillary”、“neoplasms/tumor/ cancer/carcinoma”、“China/Chinese”為搜索關(guān)鍵詞。并結(jié)合手工檢索的方式獲取文獻(xiàn)。文獻(xiàn)的中提取的資料主要包括研究的名稱、文獻(xiàn)發(fā)表年份、BRAFv600E基因突變的探測(cè)方法和檢測(cè)結(jié)果(陽(yáng)性率)、患者的基本個(gè)人信息(性別、年齡)、腫瘤大小、組織亞型、甲狀腺外浸潤(rùn)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM 分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。

1.2 方法 篩選出的文獻(xiàn)均進(jìn)行BRAFv600E基因突變檢測(cè)(不限制基因突變的檢測(cè)方法)應(yīng)用多種檢測(cè)方法的文獻(xiàn)僅選擇最優(yōu)檢測(cè)法。排除無(wú)效數(shù)據(jù)描述, 選擇能夠提供無(wú)突變患者及有BRAF突變患者的臨床病理學(xué)特征的臨床數(shù)據(jù), 重復(fù)數(shù)據(jù)采用時(shí)間線上最早的數(shù)據(jù)。

1.3 文獻(xiàn)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 本研究篩選文獻(xiàn)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)參考紐卡斯?fàn)?渥太華量表(the Newcastle-Ottawa Scale, NOS)對(duì)研究人群的選擇(selection)、暴露因素的測(cè)量(exposure)和組間可比性(comparability)的三個(gè)模塊對(duì)觀察性研究的質(zhì)量進(jìn)行評(píng)價(jià), 采用星級(jí)系統(tǒng)半量化評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn), 以上每項(xiàng)3顆星, 滿分9星。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用RevMan5.1軟件進(jìn)行Meta分析。計(jì)數(shù)資料采用RR或OR, 結(jié)果采用95%CI表示；質(zhì)疑性檢驗(yàn)采用Q檢驗(yàn)。P<0.01表示統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)具有異質(zhì)性, 采用隨機(jī)效應(yīng)模型；P>0.01表示統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)具有同質(zhì)性, 采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析。Meta分析的檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。發(fā)表偏倚檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 在規(guī)定時(shí)間內(nèi)共檢索出23篇文獻(xiàn), 參照紐卡斯?fàn)?- 渥太華量表對(duì)文獻(xiàn)質(zhì)量的評(píng)分結(jié)果均在3~5星水平, 認(rèn)為文獻(xiàn)質(zhì)量基本可靠。共有2771例甲狀腺乳頭狀癌患者進(jìn)行BRAFv600E基因突變檢測(cè), 患者發(fā)生BRAFv600E基因突變率為25%~84%, 總突變率為54.7%。見表1。

表1 BRAFv600E基因突變率統(tǒng)計(jì)

2.2 Meta分析結(jié)果顯示, BRAFv600E基因突變與甲狀腺外浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、高 TNM 分期(Ⅲ期和Ⅳ期)有關(guān)系(P<0.05)。而 BRAFv600E基因突變與性別、平均年齡(或年齡>45周歲)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)(P>0.05)。以上所有偏倚檢驗(yàn)P>0.05被認(rèn)為結(jié)果無(wú)發(fā)表偏倚。

3 討論

甲狀腺惡性腫瘤最多見的就是甲狀腺乳頭狀癌, 因而甲狀腺乳頭狀癌也成為研究的熱點(diǎn), 關(guān)于檢測(cè)患者是否發(fā)生BRAFv600E基因突變的相關(guān)研究也越來(lái)越多, 但是對(duì)于BRAFv600E基因突變檢測(cè)是否能夠?qū)谞钕偃轭^狀癌患者進(jìn)行預(yù)后判斷仍然有爭(zhēng)議［11］。國(guó)外已經(jīng)有研究對(duì)各國(guó)的患者做出類似的Meta分析, 而本研究只針對(duì)中國(guó)甲狀腺乳頭狀癌患者進(jìn)行分析, 對(duì)中國(guó)患者未來(lái)的治療更有臨床價(jià)值［11-13］。

研究結(jié)果表明在不同國(guó)家的臨床檢測(cè)出BRAFv600E基因突變率不同, 可能的主要原因是BRAFv600E基因突變?cè)诜N族間存在差異, 中國(guó)檢測(cè)為陽(yáng)性結(jié)果的比例普遍低于美國(guó)和韓國(guó), 高于其他的亞洲和歐洲國(guó)家［14-17］。

關(guān)于突變指標(biāo)主要是參照業(yè)內(nèi)的公認(rèn)標(biāo)準(zhǔn), 因?yàn)榧谞钕偃轭^狀癌患者一般不會(huì)在短時(shí)間內(nèi)死亡, 所以不能以復(fù)發(fā)率或是死亡率作為預(yù)后估計(jì), 目前在學(xué)術(shù)界主要把患者的性別年齡, 如年齡≥45周歲或者<10周歲的男性患者, 伴有淋巴結(jié)、甲狀腺外浸潤(rùn)和高的臨床分析與預(yù)后有關(guān)［18］。根據(jù)本研究結(jié)果得出BRAFv600E基因突變是中國(guó)甲狀腺乳頭狀癌患者關(guān)于甲狀腺外浸潤(rùn)、高TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和多灶性的預(yù)后評(píng)估指標(biāo)［19］。

本研究結(jié)果未發(fā)現(xiàn)BRAFv600E基因突變與患者性別之間的關(guān)系, 有研究顯示, 相比女性患者, BRAFv600E基因突變更常見于男性患者身上。但是在本研究中僅篩選出一篇相關(guān)文獻(xiàn)認(rèn)為BRAFv600E基因突變和患者性別有關(guān), 但是納入該文獻(xiàn)進(jìn)行Meta分析后仍然沒有得出BRAFv600E基因突變和患者性別之間的關(guān)系。關(guān)于年齡, 結(jié)果顯示無(wú)論是大于或等于45周歲的患者還是就所有患者的平均年齡來(lái)看, 都與BRAFv600E基因突變無(wú)明顯關(guān)系, 與Li 等 的 Meta 分析結(jié)果一致。

另外, 研究顯示BRAFv600E基因突變與甲狀腺外浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期等均有關(guān)(OR>1, P<0.05)［20］。本研究結(jié)果顯示發(fā)生BRAFv600E基因突變的甲狀腺乳頭狀癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率54%明顯高于未突變組的36%(P<0.05), BRAFv600E基因突變會(huì)影響甲狀腺乳頭狀癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率。所以根據(jù)本研究結(jié)果, 本文建議對(duì)于發(fā)現(xiàn)BRAFv600E基因突變的甲狀腺淋巴瘤的患者應(yīng)該可以采取更為積極的治療方案可以減少治療后的復(fù)發(fā), 應(yīng)當(dāng)及時(shí)的進(jìn)行頸部淋巴結(jié)清掃術(shù)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果還顯示, 遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移與BRAFv600E基因突變無(wú)關(guān)(P>0.05)。但是許多有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的甲狀腺乳頭狀癌患者會(huì)檢測(cè)不到遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移, 因?yàn)檫h(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的檢測(cè)技術(shù)尚不成熟,目前還沒有比較簡(jiǎn)單的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的方法, 所以關(guān)于BRAFv600E基因突變是否確實(shí)與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān), 還需要更多的研究和數(shù)據(jù)結(jié)果來(lái)支持。

本研究也做了偏倚檢驗(yàn), 檢驗(yàn)結(jié)果是無(wú)明顯發(fā)表偏倚。需要說(shuō)明的是本研究因?yàn)槭艿綐颖緮?shù)量較小的限制, 進(jìn)行亞組分析的有效信息少, 選取的臨床病理學(xué)特征有限, 仍然有待于大樣本的實(shí)驗(yàn)和更多的實(shí)驗(yàn)做出進(jìn)一步的研究才能得到更可靠的結(jié)果。

綜上所述, 根據(jù)本次對(duì)甲狀腺乳頭狀癌患者發(fā)生BRAFv600E基因突變的和未發(fā)生基因突變患者的Meta分析顯示,患者的BRAFv600E基因突變率為25%~84%, 總突變率為54.7%, BRAFv600E基因突變與甲狀腺乳頭狀癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、甲狀腺外浸潤(rùn)、高TNM分期等臨床病理學(xué)特征有關(guān)(P<0.05)。認(rèn)為BRAFv600E基因突變是患者甲狀腺炎的保護(hù)因素, 應(yīng)當(dāng)對(duì)發(fā)生BRAFv600E基因突變的甲狀腺乳頭狀癌患者采取淋巴結(jié)清掃術(shù)等更為積極的治療方式。此外BRAFv600E基因突變可以作為甲狀腺乳頭狀患者的預(yù)后估計(jì)。本研究因?yàn)闃颖居邢? 因此還有待于更多更高質(zhì)量關(guān)于BRAFv600E基因突變的甲狀腺乳頭狀癌患者的研究的發(fā)表。

［1］ 楊敬, 嚴(yán)淑萍, 龔艷萍, 等.BRAF~(V600E)基因突變與中國(guó)甲狀腺乳頭狀癌患者臨床病理學(xué)特征間關(guān)系的Meta分析.華西醫(yī)學(xué), 2016(3):467-479.

［2］ 徐爍, 孟憲瑛, 逄仁柱, 等.Ki-67和BRAF基因突變與甲狀腺乳頭狀癌侵襲性關(guān)系的研究進(jìn)展.吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版), 2016, 42(6):1259-1262.

［3］ Liu W, Asa SL, Ezzat S.1alpha, 25-Dihydroxyvitamin D3 targets PTEN-dependent fibronectin expression to restore thyroid cancer cell adhesiveness.Molecular Endocrinology, 2005, 19(9):2349-2357.

［4］ 尹香利, 張國(guó)昌, 李鋒, 等.MASA-PCR檢測(cè)甲狀腺乳頭狀癌中BRAFV600E點(diǎn)突變的研究.石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自科版), 2005, 23(5):551-555.

［5］ Gu YH, Harada S, Kato T, et al.Increased incidence of extrathyroidal congenital malformations in Japanese patients with congenital hypothyroidism and their relationship with Down syndrome and other factors.Thyroid, 2009, 19(8):869-879.

［6］ Gao W, Liu L, Ye G, et al.Prognostic Prediction of BRAF~(V600E) and its Relationship with Sodium Iodide Symporter in Classic Variant of Papillary Thyroid Carcinomas// 浙江省外科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì).2014:919-926.

［7］ Wang X, Sun DR, Chen Z, et al.RAF may induce cell proliferation through hypermethylation of tumor suppressor gene promoter in gastric epithelial cells.Cancer Science, 2009, 100(1):117-125.

［8］ 李小強(qiáng), 張惠箴, 蔣智銘, 等.甲狀腺乳頭狀癌中BRAF基因的表達(dá)及意義.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志, 2012, 28(9):991-995.

［9］ 濮亞斌, 李剛強(qiáng).甲狀腺乳頭狀癌中BRAFV600E基因異常的臨床意義.實(shí)用癌癥雜志, 2013, 28(3):246-248.

［10］ 王煒, 黎向紅, 章銀輝, 等.BRAF基因V600E突變?cè)诩谞钕俨∽冎械谋磉_(dá).中華腫瘤雜志, 2011, 33(5):354-357.

［11］ 臧循雄, 陳建武, 林宏獻(xiàn), 等.甲狀腺乳頭狀癌BRAFV600E基因突變的研究.現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué), 2009, 21(12):1296-1297.

［12］ 李靜明, 李鳳玲, 苗秀蘭.812名甲狀腺疾病普查分析.中華實(shí)用中西醫(yī)雜志, 2005(16):751.

［13］ 江曉燊, 解乃昌.甲狀腺乳頭狀癌BRAFV600E突變蛋白質(zhì)的表達(dá)及意義.廣東醫(yī)學(xué), 2013, 34(6):931-933.

［14］ 胡傳祥, 趙靜, 于洋, 等.甲狀腺乳頭狀癌碘攝入與BRAFV600E突變的相關(guān)性研究.中華普通外科雜志, 2015, 30(9):687-691.

［15］ 高慶軍, 張偉, 王南鵬, 等.BRAF~(V600E)突變和cN0期甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)性研究.臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志, 2015(23):2048-2052.

［16］ 徐曉琴, 王旭紅, 荊結(jié)線.BRAFV600E基因突變與甲狀腺乳頭狀癌的相關(guān)性研究進(jìn)展.中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志, 2016, 51(8):630-634.

［17］ 劉樂(lè).BRAFV600E基因突變與NIS啟動(dòng)子甲基化在甲狀腺乳頭狀癌中的研究.中南大學(xué), 2013.

［18］ 戴詠玲, 李北寧, 努爾曼·麥麥提祖農(nóng), 等.BRAF基因突變與甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究.中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新, 2011, 8(31):29-30.

［19］ 李振杰, 王顏剛.甲狀腺乳頭狀癌中BRAFV600E點(diǎn)突變的研究.中國(guó)中醫(yī)藥咨訊, 2010, 2(9):144-145.

［20］ 王?，? 金美善, 馬洪喜, 等.甲狀腺乳頭狀微小癌中survivin、galectin-3、TPO蛋白表達(dá)與BRAFV600E基因突變關(guān)系的研究.中國(guó)免疫學(xué)雜志, 2014(11):1462-1466.

Investigation of BRAFv600Egene mutation in papillary thyroid carcinoma

LAI Ye-qian.
Department of Thyroid Surgery, Meizhou City People’s Hospital, Meizhou 514021, China

ObjectiveTo analyze the feasibility of BRAFv600Egene mutation as prognosis judgment for clinical pathological characteristics in papillary thyroid carcinoma patients.MethodsRelated literature of BRAFv600Egene mutation detection in papillary thyroid carcinoma patients before March 2014 were screened from major databases, and Newcastle-Ottawa scale was applied to grade the literature.Literature selected in this study graded 3~5 stars (9 stars as full mark), and authentic data were taken into Meta analysis by RevMan5.1.ResultsThere were totally 23 selected literature, including 2771 patients with papillary thyroid carcinoma (all

BRAFv600Egene mutation detection) in analysis of relationship between clinical pathological characteristics and BRAFv600Egene mutation in papillary thyroid carcinoma.Incidence of BRAFv600Egene mutation was 25%~84%, with mean incidence of BRAFv600Egene mutation as 54.7%.Meta analysis showed no obvious relationship between BRAFv600Egene mutation and patients gender, >45 years old or mean age, and distant metastasis (P>0.05).BRAFv600Egene mutation showed its relationship with exterior thyroid infiltration, lymphatic metastasis and high TNM staging (OR=2.17, 1.96, 2.42, P<0.01).ConclusionMeta analysis of BRAFv600Egene mutation and clinical pathological characteristics in Chinese papillary thyroid carcinoma patients showed prognosis evaluation by BRAFv600Egene mutation for lymphatic metastasis, exterior thyroid infiltration and high TNM staging.It’s necessary to note that due to undeveloped distant metastasis detection technique, there is no easy detection method for occurrence of distant metastasis in patients.Therefore, the viewpoint of relationship between BRAFv600Egene mutation and distant metastasis in this study requires more discuss and further verification by more research and data.

Papillary thyroid carcinoma; BRAFv600E; Meta analysis; Gene mutation

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.10.012

2017-03-27］

514021 梅州市人民醫(yī)院甲狀腺外科