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        紫外分光光度法測(cè)定辣木酒總黃酮含量

        2017-04-24 07:59:20郎定常盧斌鄧亞紅何昆王用普何翠容
        釀酒科技 2017年4期
        關(guān)鍵詞:辣木酒樣蘆丁

        郎定常,盧斌,鄧亞紅,何昆,王用普,何翠容

        (四川省酒類(lèi)科研所,四川成都610017)

        紫外分光光度法測(cè)定辣木酒總黃酮含量

        郎定常,盧斌,鄧亞紅,何昆,王用普,何翠容

        (四川省酒類(lèi)科研所,四川成都610017)

        建立紫外分光光度計(jì)測(cè)定辣木酒中總黃酮含量的方法。酒樣直接與NaNO2、A l(NO3)3、NaOH發(fā)生反應(yīng),在波長(zhǎng)510 nm處測(cè)定吸光度值。方法的平均回收率為104.38%,酒樣總黃酮含量測(cè)定值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.97%,該方法操作簡(jiǎn)便,穩(wěn)定性好,可運(yùn)用于辣木酒總黃酮含量的測(cè)定。

        辣木酒;總黃酮;分光光度法

        辣木(Moringa oleifera)來(lái)源于印度北部,是一種熱帶多功能植物,生長(zhǎng)迅速,營(yíng)養(yǎng)豐富,被譽(yù)為“生命之樹(shù)”“植物中的鉆石”,辣木的葉片含礦物質(zhì)[1]、維生素[2]、氨基酸[3]、黃酮[4]等多種物質(zhì),其中黃酮類(lèi)化合物具有重要的生物活性功能,如抗氧化、抗腫瘤、保護(hù)心血管[5]等。為促進(jìn)四川省白酒產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)型升級(jí),調(diào)整產(chǎn)品結(jié)構(gòu),四川省酒類(lèi)科研所與峨眉雪芽酒業(yè)有限公司聯(lián)合研制開(kāi)發(fā)辣木系列養(yǎng)生酒,黃酮類(lèi)物質(zhì)的含量是此產(chǎn)品養(yǎng)生功能的重要指標(biāo)之一,本文對(duì)酒樣總黃酮的測(cè)定方法進(jìn)行深入探討。

        目前鮮有關(guān)于辣木酒總黃酮測(cè)定的相關(guān)報(bào)道,本實(shí)驗(yàn)以辣木酒為研究對(duì)象,確定檢測(cè)波長(zhǎng)與顯色反應(yīng)的平衡時(shí)間點(diǎn),研究不同樣品處理方法對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響,通過(guò)測(cè)定回收率驗(yàn)證方法的準(zhǔn)確度,建立辣木酒總黃酮含量的測(cè)定方法,為產(chǎn)品質(zhì)量控制提供依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 材料、試劑及儀器

        樣品:酒樣,市售。

        儀器設(shè)備:INESA 752N紫外分光光度計(jì),0.0001 g電子天平。

        5%NaNO2溶液:稱(chēng)取2.5 g NaNO2(分析純),加適量蒸餾水溶解并定容至50m L,現(xiàn)配現(xiàn)用。

        10%Al(NO3)3溶液:稱(chēng)取5.0 g Al(NO3)3(分析純),加適量蒸餾水溶解并定容至50 m L,現(xiàn)配現(xiàn)用。

        4%NaOH溶液:稱(chēng)取4.0 g NaOH(分析純),加適量蒸餾水溶解并定容至100m L。

        256μg/m L蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確稱(chēng)取已烘至恒重的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)0.0128 g,加50%乙醇水溶液超聲溶解,轉(zhuǎn)移至50m L容量瓶,定容到刻度,搖勻備用。

        1.2 測(cè)定方法

        1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

        吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液0.00、2.00 m L、4.00 m L、6.00m L、8.00m L、10.00m L,分別置于50m L容量瓶(蘆丁質(zhì)量相當(dāng)于0、512μg、1024μg、1536μg、2048μg、2560μg),按如下步驟進(jìn)行顯色反應(yīng):加入2.0m L的5%NaNO2溶液,搖勻,放置6 min;加2.0 m L 10%A l(NO3)3溶液,搖勻,放置6 m in;加20.0m L的4%NaOH溶液;加水定容至刻度搖勻,靜置28min后,于波長(zhǎng)510 nm處測(cè)定紫外吸收值,以吸光度A為縱坐標(biāo),樣品質(zhì)量為橫坐標(biāo),得到回歸方程y=0.0002x-0.0002,線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)R2= 0.9997。

        1.2.2 樣品測(cè)定

        量取4.00 m L酒樣作為顯色的反應(yīng)液。按照1.2.1的方法進(jìn)行顯色反應(yīng),測(cè)定得到樣品吸光度值A(chǔ)。

        1.2.3 空白試驗(yàn)

        量取4.00m L酒樣置于50m L容量瓶中,按照1.2.1的操作,其中10%Al(NO3)3溶液用蒸餾水代替,測(cè)定得到吸光度值A(chǔ)0,以A-A0作為樣品吸光度,從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查出或用回歸方程計(jì)算出樣品溶液中總黃酮的質(zhì)量m。

        1.2.4 計(jì)算公式

        式中:m——樣品溶液中總黃酮的質(zhì)量,μg;v——酒樣體積,m L。

        2 結(jié)果與討論

        2.1 最大吸收波長(zhǎng)的選擇

        黃酮分子含有鄰二酚羥基,與NaNO2作用生成鄰二醌類(lèi)物質(zhì),在堿性條件下,與A l3+絡(luò)合反應(yīng)生成有色物質(zhì),該物質(zhì)在500 nm處附近具有最大吸收波長(zhǎng)。取待測(cè)液在480~540 nm隨同空白掃描,結(jié)果見(jiàn)圖1,待測(cè)液的最大吸收峰出現(xiàn)在510 nm,故選擇510 nm為測(cè)試波長(zhǎng)。

        圖1 最大吸收波長(zhǎng)

        2.2 顯色反應(yīng)平衡時(shí)間的測(cè)定

        按照1.2.1的方法處理樣品,記錄隨時(shí)間延長(zhǎng)紫外吸光度的變化,結(jié)果見(jiàn)圖2。反應(yīng)前28min,樣品吸光度呈不斷下降的趨勢(shì);28~36m in吸光度值趨于一致,36m in之后吸光度開(kāi)始緩慢降低。反應(yīng)初期顯色絡(luò)合物逐漸形成,吸光度隨之發(fā)生變化;反應(yīng)平衡時(shí)絡(luò)合物形成,吸光度相對(duì)穩(wěn)定;繼續(xù)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,絡(luò)合物易分解,吸光度發(fā)生變化,導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確[6]。本實(shí)驗(yàn)中,顯色反應(yīng)時(shí)間在28~36m in之間達(dá)到平衡,這與已經(jīng)報(bào)道的銀杏酒[7]、蓮子酒[8]的平衡時(shí)間有差異,可能是辣木酒含有其他物質(zhì)或黃酮的種類(lèi)不同等原因造成的。為使反應(yīng)完全,提高測(cè)定效率,縮短測(cè)定時(shí)間,本試驗(yàn)樣品選擇放置時(shí)間為28m in。

        圖2 樣品吸光度隨時(shí)間的變化

        2.3 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)及回歸方程的建立

        按照1.2.1的方法,以蘆丁對(duì)照液的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。結(jié)果見(jiàn)圖3,得到線(xiàn)性回歸方程y=0.0002x-0.0002,線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)R2=0.9997。該參數(shù)大于0.9990,說(shuō)明此方法測(cè)定的吸光度值在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)濃度范圍內(nèi)與總黃酮的質(zhì)量成正相關(guān)。

        圖3 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

        2.4 樣品處理

        由于黃酮類(lèi)化合物的醇溶性大于水溶性,故選用甲醇或者乙醇作為提取溶劑;同時(shí)辣木酒樣的酒精度為45%vol,據(jù)此本實(shí)驗(yàn)選擇如下的樣品處理方式。一是90℃水浴蒸干酒樣,用75%甲醇溶液或者75%乙醇溶液溶解蒸干物,蒸餾水定容后通過(guò)顯色反應(yīng)測(cè)定總黃酮的含量;二是酒樣無(wú)需處理,利用顯色反應(yīng)直接測(cè)定。每種樣品制備方式測(cè)定3個(gè)樣,測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。

        用75%的甲醇或75%的乙醇溶解蒸干物,測(cè)定數(shù)據(jù)的重復(fù)性不好,穩(wěn)定性不高,主要是由于凝固在蒸發(fā)皿上的固體物質(zhì)呈黏稠的膠狀,不易溶解。乙醇溶液對(duì)蒸干物的溶解性不如甲醇溶液,延長(zhǎng)2種溶液對(duì)蒸干樣品的處理時(shí)間,總黃酮的測(cè)定數(shù)值變大;但甲醇具有揮發(fā)性和毒性,延長(zhǎng)樣品前處理時(shí)間,增加操作難度。

        表1 不同樣品制備方式對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響

        樣品直接測(cè)定結(jié)果的重現(xiàn)性好,操作方便,測(cè)定過(guò)程中不會(huì)涉及有毒試劑,綜上選擇酒樣不經(jīng)處理,直接測(cè)定。

        2.5 準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)

        為驗(yàn)證方法的準(zhǔn)確度,對(duì)辣木酒進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn)。取辣木酒樣品6份,每2份1組,共3組。分別精確加入蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液1.00m L、1.26m L、1.51m L,按照1.2.1的方法進(jìn)行顯色反應(yīng),在波長(zhǎng)510 nm下測(cè)定結(jié)果(見(jiàn)表2)。由表2可知,加標(biāo)樣的平均回收率為104.38%,表明方法的回收率良好,滿(mǎn)足定量分析要求。

        2.6 精密度實(shí)驗(yàn)

        取同一批次辣木酒酒樣,按照1.2.1的顯色方法測(cè)得吸光度值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算得到辣木酒總黃酮含量,結(jié)果見(jiàn)表3。同一個(gè)樣品測(cè)定結(jié)果RSD為1.97%,表明該方法對(duì)測(cè)定辣木酒中總黃酮含量的精密度較高,滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)要求。

        3 結(jié)論

        本研究建立辣木酒中總黃酮含量的測(cè)定方法,在測(cè)定波長(zhǎng)為510 nm下,辣木酒樣無(wú)需處理,直接進(jìn)行顯色反應(yīng),反應(yīng)時(shí)間在28~36m in之間達(dá)到平衡,吸光度值相對(duì)穩(wěn)定。在此條件下測(cè)定樣品回收率為104.38%,酒樣中總黃酮測(cè)定結(jié)果的RSD值為1.97%,測(cè)定方法操作簡(jiǎn)便,結(jié)果可靠,為辣木酒控

        表2 辣木酒中總黃酮回收率實(shí)驗(yàn)

        制質(zhì)量提供參考依據(jù),對(duì)辣木酒的保健性能指標(biāo)提供數(shù)據(jù)支持。

        表3 樣品中總黃酮含量測(cè)定的結(jié)果

        [1]任廣旭,伊素芹,張鴻儒,等.辣木功效的研究現(xiàn)狀[J].食品研究與開(kāi)發(fā),2016,37(16):228-231.

        [2]馬李一,余建興,張重權(quán),等.不同干燥方法對(duì)辣木葉營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的影響[J].食品科學(xué),2008,29(9):302-304.

        [3]初雅潔,符史關(guān),龔加順.云南不同產(chǎn)地辣木葉成分的分析比較[J].食品科學(xué),2016,37(2):178-182.

        [4]羅曉波,汪開(kāi)毓,吉莉莉,等.辣木葉的價(jià)值及其開(kāi)發(fā)利用研究進(jìn)展[J].開(kāi)發(fā)與利用,2016,32(11):84-88.

        [5]劉一杰,薛永常.植物黃酮類(lèi)化合物的研究進(jìn)展[J].中國(guó)生物工程雜志,2016,36(9):81-86.

        [6]蘇銀法.雪蓮酒中總黃酮的含量測(cè)定[J].海峽藥學(xué),2002, 14(4):51-52.

        [7]吳婷,張麗.分光光度法測(cè)定銀杏酒中總黃酮的含量[J].南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2005,21(2):129-130.

        [8]吳燦,夏延斌,唐鑫.分光光度法測(cè)定蓮子酒中的總黃酮[J].農(nóng)產(chǎn)品加工(學(xué)刊),2013(4):48-50.

        Determ ination of Total FlavonoidsContent in Moringa oleifera Liquor by Spectrophotometry

        LANGDingchang,LU Bin,DENGYahong,HEKun,WANGYongpu and HECuirong
        (Sichuan Research Institute of A lcoholic Drinks,Chengdu,Sichuan 610017,China)

        A method for determ ining flavonoids content in Moringa oleifera liquor by spectrophotometry had been developed.Wine samples directly reacted w ith NaNO2,A l(NO3)3and NaOH,and the absorbance valuewasmeasured atwavelength of 510 nm.The average recovery of suchmethod was104.38%and RSD was1.97%.Suchmethod was simple to operatew ith good stability,and suitable for the determ ination of total flavonoids content in Moringa oleifera liquor.

        Moringa oleifera liquor;total flavonoids;spectrophotometry

        TS262.91;TS261.7

        A

        1001-9286(2017)04-0103-03

        10.13746/j.njkj.2017009

        2017-01-13

        郎定常,男,高級(jí)工程師,四川省酒類(lèi)科研所副所長(zhǎng),主要從事酒類(lèi)研究工作。

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