羅源　楊慶斌

[摘要]目的探討慢性阻塞性肺疾病患者急性加重期治療中CD64指數(shù)的作用。方法選取我院2014年10月～2015年11月門(mén)診及住院治療50例COPD急性加重期患者，作為AECOPD組研究對(duì)象，其中男28例，女22例，年齡（66.8±8.5歲），另選既往曾我科明確診斷COPD，但目前處于穩(wěn)定期患者46例（COPD組）及健康者22例作為對(duì)照組，檢測(cè)CD64、CRP、WBC計(jì)數(shù)進(jìn)行分析比較。結(jié)果AECOPD組中CD64指數(shù)相比健康人群組更高，且比COPD穩(wěn)定期組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；AECOPD治療前后的CD64指數(shù)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，治療7天組低于治療3天組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。結(jié)論CD54可以作為慢性阻塞性肺疾病患者急性加重期治療效果評(píng)價(jià)指標(biāo)之一。

[關(guān)鍵詞]慢性阻塞性肺疾??；CD64指數(shù)；急性加重期；臨床

[中圖分類(lèi)號(hào)]R563.9

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B

[文章編號(hào)]2095-0616（2016）23-226-03

慢性阻塞性肺疾病屬于呼吸科疾病中的常見(jiàn)病癥，以咳嗽、咳痰、活動(dòng)后氣喘為主要癥狀，患者咳嗽、咳痰、氣喘加重，即處于急性加重期，這一階段是患者來(lái)院就診的主要階段。急性加重期主要有由于細(xì)菌感染引起，目前評(píng)價(jià)感染嚴(yán)重程度的常用指標(biāo)是白細(xì)胞計(jì)數(shù)及CRP，但兩種指標(biāo)敏感性及特異性均不是很高。研究發(fā)現(xiàn)，在細(xì)菌感染時(shí)，中性粒細(xì)胞表面上的CD64分子會(huì)明顯增加。本研究試圖通過(guò)觀察研究對(duì)象外周血中CD64的表達(dá)情況，分析疾病不同階段與正常人群中CD64指數(shù)差異，探討CD64指數(shù)在該疾病急性加重期治療當(dāng)中存在的價(jià)值。

1.資料及方法

1.1一般資料

選取我院2014年10月～2015年11月門(mén)診及住院治療50例AECOPD患者，其中男，女例數(shù)分別為28例，22例，患者平均年齡（66.8±8.8）歲。COPD組患者46例，男女例數(shù)分別為21、25例，患者平均年齡（67.2±7.3）歲。健康體檢組患者22例，男女例數(shù)分別為13、9例，患者平均年齡（65.9±6.9）歲。所有患者均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病分會(huì)在2013年制定的《慢性阻塞性肺疾病診治指南》中的疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)。研究排除患者中合并心血管疾病、免疫風(fēng)濕病及內(nèi)分泌疾病患者，并排除1個(gè)月內(nèi)進(jìn)行糖皮質(zhì)激素治療患者及妊娠者。另選既往曾我科明確診斷COPD，但目前處于穩(wěn)定期患者46例及健康者22例進(jìn)行對(duì)照研究，兩組資料無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集COPD組與AECOPD組均為門(mén)診或住院初24～48h內(nèi)患者，健康體檢組則為當(dāng)天體檢的人群，在這世間短內(nèi)對(duì)研究對(duì)象采集5mL空腹靜脈血，取其中的2mL全血進(jìn)行10min的3000r/min離心，分離血清檢測(cè)CRP；對(duì)血液標(biāo)本中的2mL靜脈血進(jìn)行肝素抗凝，檢測(cè)標(biāo)本采集4h內(nèi)其中中性粒細(xì)胞表面的CD64分子水平；1mL靜脈血抗凝后進(jìn)行血常規(guī)測(cè)定。AECOPD組在抗感染、平喘治療后第3天及第7天分別檢測(cè)CD64、CRP、WBC計(jì)數(shù)。

1.2.2儀器及試劑

研究中進(jìn)行CD64指數(shù)檢測(cè)的流式細(xì)胞儀選用美國(guó)BD FACS Calibur，由美國(guó)VERITY SOFTWARE HOUSE提供檢測(cè)的配套分析軟件，CD64檢測(cè)試劑采用美國(guó)TRILLIUMDIAGNOSTICS LLC生產(chǎn)的試劑；采取DATA公司的BN ProSpec全自動(dòng)特定蛋白儀進(jìn)行CRP檢測(cè)；采用日本東亞公司sysmex-XE 2100型血液分析儀進(jìn)行血常規(guī)指標(biāo)的檢測(cè)；CRP檢測(cè)選用DATA公司的配套試劑；血常規(guī)檢測(cè)選用日本東亞公司配套試劑。

1.3CD64的檢測(cè)方法

采用流式專(zhuān)用管并做好標(biāo)記，在每支試管中分別加如50uL的混合抗體；并在試管中加入50uL抗凝全血，混合均勻后于室溫避光靜置15min；靜置后加入1mL溶血素，并混合均勻，于室溫避光環(huán)境保存15min；待標(biāo)本完全溶血后，向其中加入熒光微球溶液5uL，通過(guò)振蕩方式混合均勻；直接上機(jī)分析未經(jīng)洗滌的細(xì)胞，采用流式細(xì)胞儀分析檢測(cè)。CRP采用免疫比濁法檢測(cè)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析處理數(shù)據(jù)，對(duì)數(shù)據(jù)采取Pearson相關(guān)分析與方差分析，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1AECOPD組、COPD組及健康體檢組D64指數(shù)和CR.P檢測(cè)結(jié)果

AECOPD組、COPD組及健康體檢組CD64指數(shù)和CRP檢測(cè)結(jié)果比較，AECOPD組中CD64指數(shù)相比健康人群組更高，且比COPD穩(wěn)定期組高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。見(jiàn)表1。

2.2 AECOPD組治療前、治療后第3天及治療后第7天CD64指數(shù)和CRP檢測(cè)結(jié)果

AECOPD組治療前、治療后第3天及治療后第7天CD64指數(shù)和CRP檢測(cè)結(jié)果比較，治療前后的CD64指數(shù)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，治療7天組低于治療3天組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），見(jiàn)表2。

3.討論

呼吸系統(tǒng)中慢性阻塞性肺疾病是常見(jiàn)一種，該病急性加重期多由于細(xì)菌感染導(dǎo)致，需要住院治療，每年人均住院治療費(fèi)用較高，給國(guó)家及患者帶來(lái)較重經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。CD64分子屬于新發(fā)現(xiàn)的穿膜糖蛋白，其相對(duì)分子質(zhì)量在72000，屬于高親和力IgG受體，能夠結(jié)合IgG并于體內(nèi)實(shí)現(xiàn)飽和。這一分子主要可見(jiàn)于巨噬細(xì)胞中、樹(shù)突狀細(xì)胞中及單核細(xì)胞中，很少于外周血中性粒細(xì)胞中表達(dá)。CD64是連接患者體內(nèi)體液免疫與細(xì)胞免疫間關(guān)系的紐帶，對(duì)于細(xì)胞吞噬清除免疫復(fù)合物、抗原遞呈及釋放炎癥介質(zhì)過(guò)程中具有關(guān)鍵效用。通過(guò)大量研究發(fā)現(xiàn)，在中性粒細(xì)胞中的CD64分子具有高敏感、高特異性，常作為感染性疾病的早期標(biāo)志物，能夠與自身免疫性疾病情況區(qū)分開(kāi)，并可表現(xiàn)出抗菌藥物應(yīng)用的治療效果，對(duì)于判定術(shù)后合并感染與否效果突出，應(yīng)用前景良好。正常情況該分子于中性粒細(xì)胞的表面具有較低表達(dá)水平，但感染后受到脂多糖等刺激后中性粒細(xì)胞上的（3）64表達(dá)量明顯增加。Allen等發(fā)現(xiàn)，病毒感染與非感染性炎癥反應(yīng)并不會(huì)造成中性粒細(xì)胞表面CD64水平的增加，這說(shuō)明CD64的表達(dá)水平升高對(duì)于細(xì)菌感染來(lái)講存在較高的特異性。Davis等對(duì)細(xì)菌感染患者100例做出研究，發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞表面CD64分子表達(dá)情況無(wú)論是敏感性還是特異性均比CRP、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及ESR等指標(biāo)更佳，說(shuō)明可將CD64指數(shù)當(dāng)中判斷細(xì)菌感染的重要指標(biāo)。張曉微等將成人患者1 15例劃分兩組，分別是細(xì)菌感染組與非細(xì)菌感組，研究患者外周血的中性粒細(xì)胞表面CD64分子檢出陽(yáng)性率，研究結(jié)果表明，細(xì)菌感染組患者的CD64分子檢測(cè)陽(yáng)性率明顯更高，而其靈敏度在92%、特異度在82%，充分說(shuō)明CD64指數(shù)檢測(cè)能夠當(dāng)做判斷細(xì)菌感染患者的敏感性與特異性是否過(guò)高的重要指標(biāo)。

本研究通過(guò)比較COPD急性加重期、穩(wěn)定期及健康人群CD64表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)COPD急性加重期患者CD64較COPD穩(wěn)定期及健康人群明顯升高（P<0.01），CD64在COPD穩(wěn)定期組及健康人群組表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，同時(shí)在AECOPD組患者治療前、治療第3、7天后CD64明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），同時(shí)治療后7天CD64明顯低于治療后3天，為我們判斷COPD患者急性加重期感染程度及評(píng)判治療后效果提供了新的標(biāo)志物。

總之，流式細(xì)胞儀檢測(cè)中性粒細(xì)胞CD64作為一種快捷、方便、敏感性高、特異性好的檢測(cè)方法，對(duì)COPD急性加重期的病情判斷及治療效果評(píng)價(jià)有一定幫助，值得臨床推廣使用。