黃金龍 劉思敏 羅賢宇 梁文豪 邢德剛

(廣東藥科大學(xué)，廣東 廣州 510006)

腸易激綜合征患者腸道目標(biāo)菌群分析

黃金龍 劉思敏1羅賢宇2梁文豪2邢德剛2

(廣東藥科大學(xué)，廣東 廣州 510006)

目的 探討腸易激綜合征(IBS)患者與健康者腸道菌群的差異。方法 對46例病患的腸道菌群進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，與20例正常健康者腸道菌群進(jìn)行對比。結(jié)果 IBS組和對照組均未找到已知的特異致病菌。IBS組腸道菌群中乳酸桿菌、雙歧桿菌的菌落數(shù)與對照組相比顯著減少，腸球菌的菌落數(shù)顯著增加(P<0.05)；大腸桿菌、真菌與對照組相比無顯著差異(P>0.05)。結(jié)論 IBS與腸道菌群失調(diào)有相關(guān)性，來該院治療的IBS患者存在腸道菌群失調(diào)。

腸易激綜合征；腸道菌群

腸易激綜合征(IBS)是一種常見的功能性腸道疾病。研究報(bào)道，IBS是一種世界范圍內(nèi)的多發(fā)病，影響了世界 20%的人口〔1〕。廣州的流行病學(xué)調(diào)查表明用羅馬標(biāo)準(zhǔn)判斷的有IBS癥狀者約占人群的5.6%。不但顯著降低了這些患者的生活質(zhì)量，還給社會帶來了沉重的經(jīng)濟(jì)壓力〔2〕。本研究通過傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)法分析IBS 患者的腸道菌群。

1 資料與方法

1.1 對象 2015年3月至2016年8月在廣東藥學(xué)院第二附屬醫(yī)院消化科門診就診的IBS患者46例，采用羅馬Ⅱ診斷標(biāo)準(zhǔn)，排除腸道器質(zhì)性病變。其中男19例，女27例，年齡18～61歲。全部無發(fā)熱腹瀉史、胃腸手術(shù)史，未使用過抗生素，無慢性肝病、糖尿病、甲亢病史及小腸或結(jié)腸慢性炎癥史。對照組為廣東藥學(xué)院第二附屬醫(yī)院體檢健康者。

1.2 方法 稱取標(biāo)本，加入生理鹽水稀釋，標(biāo)本稀釋呈梯度系列10-1、10-2、10-3、10-4、10-5，連同原液共6個(gè)稀釋度。取上述標(biāo)本系列稀釋液分別接種至大腸桿菌(EMB)、腸球菌(腸球菌瓊脂)、真菌(玫瑰紅鈉瓊脂)、雙歧桿菌(BBL瓊脂培養(yǎng)基)、乳酸桿菌(LBS瓊脂)選擇性培養(yǎng)基平板上。將BBL、LBS培養(yǎng)基放在35℃、CO2濃度是5%的孵育箱中培養(yǎng)48 h；將EMB、腸球菌、玫瑰紅培養(yǎng)基直接放在孵育箱中培養(yǎng)24 h，一般腸桿菌培養(yǎng)18 h。菌落經(jīng)涂片、革蘭染色鑒定，細(xì)菌確定后，根據(jù)平板上的活菌計(jì)數(shù)以及稀釋度，按照活菌計(jì)數(shù)公式計(jì)算。活菌集落計(jì)算公式(CFU/ml)=(標(biāo)本質(zhì)量+稀釋量)/標(biāo)本質(zhì)量×稀釋度×菌落個(gè)數(shù)(或×10)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 菌落培養(yǎng) 雙歧桿菌和乳酸桿菌屬革蘭陽性桿菌，中等大腸桿菌，兩端圓、無芽孢、著色不均勻，形態(tài)呈多樣性；腸球菌屬革蘭陽性球菌，菌體圓形或卵圓形、單個(gè)或排列成雙；大腸桿菌屬革蘭陰性，無芽孢、粗短桿狀、端呈圓形；真菌菌體圓形或卵圓形，較細(xì)菌大、著色不均勻。

2.2 兩組腸道菌群比較 兩組均是未找到已知的特異致病菌。IBS組乳酸桿菌、雙歧桿菌的菌落數(shù)顯著低于對照組(P<0.05)；腸球菌的菌落數(shù)顯著高于對照組(P<0.05)；兩組大腸桿菌、真菌無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組腸道菌群的比較±s)

與對照組比較:1)P<0.05

3 討 論

IBS潛在的病理生理機(jī)制至今尚未完全清楚，但胃腸道動(dòng)力異常、內(nèi)臟感覺過敏、腦-腸軸功能改變、輕度炎性反應(yīng)、精神社會因素和腸道菌群都可能單獨(dú)或聯(lián)合發(fā)揮作用，加重IBS癥狀。近年來腸道菌群被認(rèn)為是影響IBS病理生理的重要因素之一〔3〕。研究表明，IBS患者黏膜菌群和糞便菌群不同于正常人〔4〕。IBS患者不但糞便菌群明顯改變，而且不同類型的IBS患者糞便菌群組成也不同〔5～7〕。以往關(guān)于IBS患者類便菌群和黏膜菌群的研究中，由于釆取的研究方法、研究對象存在差異，導(dǎo)致研究結(jié)果也出現(xiàn)不一致性，甚至有的研究結(jié)果相互矛盾〔8〕。地域性差異可能是導(dǎo)致IBS患者腸道菌群出現(xiàn)特異性變化的原因之一，只有明確就診IBS患者具體的腸道菌群情況，在臨床診治過程中才能采取針對性治療方案。

本研究中大腸桿菌的變化與Madden〔9〕研究結(jié)果一致，與Si等〔10〕研究結(jié)果不同。通過分析IBS患者具體的腸道菌群變化，深入探討腸道菌群與IBS相關(guān)性，可以為深入了解IBS發(fā)病機(jī)制和治療提供新的思路，也為臨床制定治療IBS具體方案提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 李 莉，熊理守.腸易激綜合征流行病學(xué)調(diào)查〔J〕.中華消化雜志，2015；35(7)：446-50.

2 尉秀清，陳旻湖，王錦輝，等.廣州市居民腸易激綜合癥及功能性便秘的流行病學(xué)調(diào)查〔J〕.中華內(nèi)科雜志，2001；40(8)：517-20.

3 高 峻，李兆中，等.腸易激綜合癥的病因研究進(jìn)展〔J〕.國外醫(yī)學(xué)消化系疾病分冊，2002；22(2)：87-9.

4 Rajilic-Stojanovic M，Smidt H，de Vos WM.Diversity of the human gastrointestinal tract microbiota revisited〔J〕.Environ Microbiol，2007；9(9)：2125-36.

5 Maxion-Bergemann S，Thielecke F，Abel F，etal.Costs of irritable bowel syndrome in the UK and US〔J〕.Pharmacoeconomics，2006；24(1)：21-37.

6 Kassinen A，Krogius-Kurikka L，Makivuokko H，etal.The fecal microbiota of rritable bowel syndrome patients differs significantly from that of healthy ubjects〔J〕.Gastroenterology，2007；133(1)：24-33.

7 Durban A，Abellan JJ，Jimenez-Hernandez N，etal.Structural alterations of faecal nd mucosa-associated bacterial communities in irritable bowel syndrome〔J〕.Environ Microbiol Rep，2012；4(2)：242-7.

8 Carroll IM，Rjngel-Kulka T，Keku TO，etal.Molecular analysis of the luminal-and mucosal-associated intestinal microbiota in diarrhea-predominant irritable bowel syndrome〔J〕.Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol，2011；301(5)：G799-807.

9 Madden J.The intestinal microbiota and probiotics in irritablebowel syndrome.Scandinavian〔J〕.Food Nutri Res，2004；48(1)：32-6.

10 Si JM，Yu YC，F(xiàn)an YJ.Intestinal microecology and quality of life in irritable bowel syndrome patients〔J〕.World J Gastroenterol，2004；10(12)：1802-5.

〔2016-11-09修回〕

(編輯 袁左鳴)

廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目資助 (No.2013B021800270)

邢德剛(1969-)，男，教授，主要從事胃腸動(dòng)力學(xué)研究。

黃金龍(1975-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事消化內(nèi)科研究。

R694.13

A

1005-9202(2017)05-1173-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.05.062

1 廣東藥科大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院 2 廣東藥科大學(xué)基礎(chǔ)學(xué)院