郭喜 廖遠(yuǎn)泉 沈繼龍

·綜述·

糖化血紅蛋白實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)及方法學(xué)進(jìn)展

郭喜 廖遠(yuǎn)泉 沈繼龍

糖化血紅蛋白A1c（Haemoglobin A1c，HbA1c）是人體血液中葡萄糖與血紅蛋白β鏈N-末端纈氨酸（βN-1-去氧果糖基血紅蛋白）殘基以共價(jià)鍵結(jié)合的穩(wěn)定的一類化合物。目前HbA1c是評(píng)價(jià)糖尿病患者長(zhǎng)期血糖控制狀況的“金標(biāo)準(zhǔn)”，在糖尿病治療及其并發(fā)癥監(jiān)測(cè)中具有重要價(jià)值。臨床實(shí)驗(yàn)室采用的HbA1c檢測(cè)技術(shù)方法達(dá)30 多種。根據(jù)其實(shí)驗(yàn)原理一般分為兩類：一類是基于糖基化與非糖基化血紅蛋白所攜帶的電荷不同，如離子交換層析法、電泳法；另一類是基于糖基化與非糖基化血紅蛋白的化學(xué)結(jié)構(gòu)不同，如免疫法、酶免法以及親和層析法等。論述了糖化血紅蛋白A1c實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)及方法學(xué)評(píng)價(jià)新的進(jìn)展。

糖化血紅蛋白 糖尿病 生物化學(xué) 診斷 實(shí)驗(yàn)室技術(shù)和方法

糖化血紅蛋白A1c（Haemoglobin A1c，HbA1c）是人體血液中葡萄糖與血紅蛋白β鏈N-末端纈氨酸（βN-1-去氧果糖基血紅蛋白）殘基以共價(jià)鍵結(jié)合的一類穩(wěn)定的化合物。多年來的隨訪和流行病學(xué)研究表明，HbA1c≥6.5%作為糖尿病篩查和臨床診斷的閾值，對(duì)評(píng)估進(jìn)展性視網(wǎng)膜病變風(fēng)險(xiǎn)具有重要價(jià)值，是評(píng)價(jià)糖尿病患者長(zhǎng)期血糖控制狀況的“金標(biāo)準(zhǔn)”，也是本病治療和并發(fā)癥監(jiān)測(cè)的重要指標(biāo)[1]。然而，我國HbA1c的研究和應(yīng)用起步較晚，且尚未實(shí)現(xiàn)臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化。HbA1c 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)和方法多種多樣，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室之間檢驗(yàn)結(jié)果可比性存在較大的差異。影響HbA1c檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的因素較多[2]、研究亦不夠深入，因而，限制了HbA1c作為糖尿病早期診斷指標(biāo)在我國的廣泛應(yīng)用。本文旨就糖化血紅蛋白實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)及其方法學(xué)研究新進(jìn)展予以論述，以期提升我國HbA1c實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)水平，加快HbA1c實(shí)驗(yàn)室臨床檢驗(yàn)融入國際標(biāo)準(zhǔn)化的進(jìn)程。

1 糖化血紅蛋白的定義

1.1 糖化血紅蛋白（Glycated hemoglobin）與臨床 糖基化血紅蛋白是伊朗學(xué)者Rahbar 等應(yīng)用瓊脂糖凝膠電泳分析的方法，率先從糖尿病患者血液中發(fā)現(xiàn)的、異常升高的一種血紅蛋白組分，HbA1c是血液葡萄糖對(duì)HbA的非遺傳修飾的產(chǎn)物[3.4]。這一發(fā)現(xiàn)奠定了糖化血紅蛋白檢測(cè)診斷糖尿病研究的基礎(chǔ)。

此后，美國糖尿病控制及并發(fā)癥試驗(yàn)（Diabetes Control and Complications Trial，DCCT）和英國前瞻性糖尿病研究（UK Prospective Diabetes Study，UKPDS）通過先后大樣本的糖尿病流行病學(xué)研究，認(rèn)為糖尿病通過治療控制平均血糖和HbA1c水平，能夠有效地治療糖尿病，顯著降低糖尿病患者視網(wǎng)膜病變、腎臟疾病，以及神經(jīng)病變等并發(fā)癥的發(fā)生及其嚴(yán)重程度。而且，糖尿病終末事件的發(fā)生率均有隨著HbA1c的增高而增加的趨勢(shì)，提示糖尿病患者并發(fā)癥的減少與HbA1c的降低密切相關(guān)。因此，HbA1c實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)以及臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化和實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理備受關(guān)注。

1.2 糖化血紅蛋白的定義 國際臨床化學(xué)與醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室聯(lián)盟（C-NPU）所定義的糖化血紅蛋白應(yīng)概括為“人體血液中葡萄糖與血紅蛋白 β鏈N-末端纈氨酸（βN-1-去氧果糖基血紅蛋白）殘基以共價(jià)鍵結(jié)合的穩(wěn)定的一類化合物”，其化學(xué)結(jié)構(gòu)通常為具有一個(gè)特定六肽的血紅蛋白分子[5.6]，全名：血紅蛋白β鏈（血液）-N-（1-去氧果糖-1基） 血紅蛋白β鏈[7]。

2 糖化血紅蛋白實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)和方法 HbA1c檢測(cè)技術(shù)及方法根據(jù)實(shí)驗(yàn)原理一般分為兩類：一類是基于糖基化與非糖基化血紅蛋白所攜帶的電荷不同，如離子交換層析法、電泳法；另一類是基于糖基化與非糖基化血紅蛋白的化學(xué)結(jié)構(gòu)不同，如免疫法、酶免法及親和層析法等。對(duì)于臨床檢驗(yàn)，方法所指的應(yīng)是其分析系統(tǒng)，主要由所使用的儀器、試劑和校準(zhǔn)物組成。鑒于不同的檢測(cè)技術(shù)實(shí)驗(yàn)原理不同，所檢測(cè)的糖化血紅蛋白組分亦不同。因此，臨床應(yīng)用和實(shí)驗(yàn)室定量檢測(cè)的應(yīng)該是HbA1c組分，或者相當(dāng)于HbA1c組分[7-9]。

2.1 離子交換層析技術(shù)（Ion exchange chromatography）基于不同組分電荷的差異進(jìn)行分離[8-13]。微柱法檢測(cè)技術(shù)由Trivelli 率先應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)。但微柱技術(shù)受到多種因素的影響或干擾（如PH 值、溫度、血脂、膽紅素等），雖幾經(jīng)改善，其仍會(huì)受到血紅蛋白變異體（HbS、HbC、HbE）、氨基甲?；耙阴；t蛋白等的影響。目前手工微柱檢測(cè)方法已較少應(yīng)用、漸趨淘汰。

目前，多采用高通量的高效液相色譜（ high performance liquid chromatography，HPLC）或低壓系統(tǒng) HPLC 技術(shù)。美國糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃（National Glycohaemoglobin Standardization Program，NGSP）參考實(shí)驗(yàn)室亦采用Bio-Rex 70 陽離子交換樹脂HPLC作為HbA1c檢測(cè)的參考方法。葡萄糖與血紅蛋白的β鏈N 末端Val 連接后降低了等電點(diǎn)，在pH 中性環(huán)境下，HbA1c所攜帶的正電荷較未糖基化血紅蛋白的正電荷相對(duì)較少，可以通過HPLC 技術(shù)將其與其他組分（如HbA1b、HbA1a、HbF、HbA0、）予以分離。HPLC技術(shù)已被IFCC列為HbA1c標(biāo)準(zhǔn)化參考系統(tǒng)的參考方法，亦是檢測(cè)及分析HbA1c 技術(shù)的“金標(biāo)準(zhǔn)”[10.11]。因?yàn)樵摍z驗(yàn)技術(shù)快速、簡(jiǎn)便、精巧、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，已廣受臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)者的青睞。但需要高端的專用儀器，檢驗(yàn)成本較高。

國內(nèi)學(xué)者較早采用基于HPLC原理的糖化血紅蛋白分析儀測(cè)定商品質(zhì)控物和臨床患者樣本，并對(duì)三種不同儀器的檢測(cè)結(jié)果間的偏差進(jìn)行了評(píng)價(jià)[12]，結(jié)果證實(shí)全自動(dòng)糖化血紅蛋白分析儀檢測(cè)結(jié)果之間無顯著偏差，不同儀器之間檢測(cè)結(jié)果偏差的絕對(duì)值不大于0.5 % HbA1c，屬于臨床可接受范圍。

此外，也有應(yīng)用美國BIO–RAD D–10 HbA1c 分析儀，采用HPLC對(duì)臨床全血標(biāo)本進(jìn)行了HbA1c檢測(cè)，并對(duì)所使用儀器進(jìn)行了驗(yàn)證[13]。結(jié)果表明，線性驗(yàn)證物采用的Bio-Rad 公司提供的Lyphochek Hemoglobin A1C Linearity Set HbA1C 線性校準(zhǔn)品的實(shí)際檢測(cè)值，目標(biāo)值的線性回歸方程為 y=1.008x+0.023，相關(guān)系數(shù)r2=0.999；臨床標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果均通過性能驗(yàn)證，符合臨床檢測(cè)技術(shù)要求。

2.2 親和層析技術(shù)（Affinity chromatography） 根據(jù)HbA1c與非糖基化血紅蛋白化學(xué)結(jié)構(gòu)的不同，利用生物大分子能夠與其相應(yīng)的專一配基分子可逆結(jié)合的原理，將其配基通過共價(jià)鍵牢固地結(jié)合于固相載體上，組成一親和吸附系統(tǒng)。該技術(shù)為Mallia 等研發(fā)。

硼酸能夠與整合在血紅蛋白分子上葡萄糖的順位二醇基作可逆結(jié)合反應(yīng)，使用間- 氨基苯磺酸瓊脂糖，將血液樣本加注到層析柱后，所有的糖化血紅蛋白（HbA1 旁鏈糖化的血紅蛋白即總糖化血紅蛋白）均可以與硼酸陰離子的特殊反應(yīng)結(jié)合，形成可逆的多羥基復(fù)合物；而非糖化的血紅蛋白先期被洗脫，再應(yīng)用山梨醇分離已與硼酸結(jié)合的復(fù)合物；并將全部糖化血紅蛋白予以洗脫，其檢測(cè)結(jié)果為“總糖化血紅蛋白”。經(jīng)換算可以得到HbA1c值，與NGSP的HPLC參考方法具有較好的相關(guān)性。陽離子高效液相色譜法檢測(cè)HbA1c的結(jié)果可能受多種血紅蛋白變異體的影響[14]，但硼酸鹽親和層析法（如Primus Trinity Ultra 2、PDQ 等檢測(cè)系統(tǒng)）基本不會(huì)受其影響，或者較少受到影響[15]；且具有操作簡(jiǎn)單、快速，抗FBiL、CBiL、Hb、乳糜微粒等干擾的能力強(qiáng)，檢測(cè)結(jié)果精密度高等優(yōu)點(diǎn)。

2.3 免疫檢測(cè) （Immunoassay）基于抗原-抗體免疫學(xué)結(jié)合原理，采用單克?。ɑ蚨嗫寺。┛贵w特異性識(shí)別糖化血紅蛋白β鏈N 末端最后4 ～ 6個(gè)氨基酸所組成的抗原表位，結(jié)合化學(xué)比色或比濁法，以糖化血紅蛋白為標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定HbA1c的含量，并檢測(cè)血紅蛋白的量，據(jù)此計(jì)算HbA1c在血紅蛋白中的百分比例。該檢測(cè)技術(shù)可以識(shí)別GLU附著在Hb的β鏈N 末端8個(gè)氨基酸的抗原位點(diǎn)的單克隆抗體，采用酶免疫（EIA）/放射免疫 （RIA）等方法進(jìn)行檢測(cè)。具有較高的精密度，且與多種檢測(cè)方法具有較好的相關(guān)性，與IFCC參考系統(tǒng)所推薦的一級(jí)參考物質(zhì)檢測(cè)結(jié)果的參考范圍（2.85%～3.81%）十分相近，可應(yīng)用全自動(dòng)生化分析儀使用比濁法予以定量檢測(cè) [如 乳膠增強(qiáng)免疫比濁法（latex enhanced turbidimetric lmmuno assay，LETIA）/ 免疫透射比濁法（Immunoturbidimetric turbidimetric method）]。

劉陽等[16]應(yīng)用LETIA技術(shù)檢測(cè)HbA1c，并與HPLC技術(shù)進(jìn)行相關(guān)性比較，該技術(shù)與HPLC 檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)系數(shù)r=0.994、P＜0.001 。評(píng)價(jià)認(rèn)為L(zhǎng)ETIA檢測(cè)系統(tǒng)符合NCCLS 的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)要求。雙試劑法的檢測(cè)原理是血液樣本中的HbA1c 被試劑1中的乳膠顆粒所吸附，吸附有HbA1c的乳膠顆粒與試劑2A中的相應(yīng)抗體反應(yīng)，生成可溶性的抗原-抗體復(fù)合物；此抗原-抗體復(fù)合物再與試劑2B中的IgG反應(yīng)，生成不可溶的抗原-抗體復(fù)合物。該復(fù)合物具有相應(yīng)的濁度，可以比濁定量。

但是，當(dāng)血紅蛋白 第6位氨基酸出現(xiàn)變異 [Hb S（β6Glu-Val）HbC（β6Glu-Ly5）] 時(shí)，有可能造成辯識(shí)錯(cuò)誤。此外，不同的HbA1c-單克隆抗體試劑所相應(yīng)的抗原決定簇可有不同，親和力也不盡一致，都可能影響到不同實(shí)驗(yàn)室間檢測(cè)結(jié)果的可比性。

曹東林等[17]近年率先將免疫熒光層析技術(shù)應(yīng)用于HbA1c檢測(cè)，原理是采用高特異性的抗原抗體反應(yīng)，HbA1c 與預(yù)先包被在聚酯膜上的金標(biāo)記HbA1c單克隆抗體結(jié)合，結(jié)合物由于毛細(xì)效應(yīng)逐漸向上端層析，隨即被固定在聚酯膜上的降鈣素原單克隆抗體結(jié)合、捕獲，HbA1c的量與被捕獲結(jié)合物的量呈正相關(guān)。通過免疫定量分析儀掃描檢測(cè)區(qū)，獲得相應(yīng)的光學(xué)信號(hào)，經(jīng)內(nèi)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線將接收到的信號(hào)轉(zhuǎn)換為HbA1c的濃度。免疫熒光層析法測(cè)定HbA1c具有操作簡(jiǎn)便、快速（僅約15 min）的特點(diǎn)，簡(jiǎn)化了檢測(cè)技術(shù)流程。其檢測(cè)精密度、檢測(cè)系統(tǒng)間的一致性（該技術(shù)與HPLC比較，其線性回歸方程y=-0.110+1.021 x；r=0.982＞0.975； 且斜率、截距可靠）適用于臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)HbA1c 的需要。

2.4 均相酶法（Homogeneous enzymatic method） 均相酶法是近年才推出的臨床實(shí)驗(yàn)室可以常規(guī)檢測(cè)HbA1c的新技術(shù)[18]。檢測(cè)前需將全血預(yù)先制備成溶血稀釋液樣本，再以特異的蛋白內(nèi)切酶—芽孢桿菌蛋白酶 （Bacillus protease）將血紅蛋白的β鏈N 末端的糖化二肽結(jié)構(gòu)予以酶解、消化，釋放出糖化纈氨酸。糖化纈氨酸作為果糖基氨基酸氧化酶（Fructosyl amino acid oxidase，F(xiàn)OX）的特異底物，其在果糖基氨基酸氧化酶的作用下進(jìn)一步生成H2O2、繼之H2O2經(jīng)過過氧化物酶（Peroxidase，POD）的催化作用與色素元產(chǎn)生顯色反應(yīng)，樣本中的HbA1c與氧化作用生成的H2O2濃度呈正相關(guān)，可以比色、定量。根據(jù)其反應(yīng)前后吸光度的變化計(jì)算HbA1c-的百分濃度。均相酶技術(shù)有三個(gè)顯著特點(diǎn)：特異蛋白內(nèi)切酶—芽孢桿菌蛋白酶具有專一的血紅蛋白特異性，其他血漿蛋白無干擾；果糖基氨基酸氧化酶僅與果糖基氨基酸產(chǎn)生反應(yīng)；具有快速、均一的反應(yīng)系統(tǒng)。因此，其與HPLC以及免疫檢測(cè)技術(shù)具有良好的相關(guān)性。陳同慶等[19]對(duì)酶法測(cè)定HbA1c的方法學(xué)評(píng)價(jià)及標(biāo)本前處理影響因素的研究表明，其精密度、準(zhǔn)確性、抗干擾性以及線性范圍均符合常規(guī)檢測(cè)HbA1c 要求。與HPLC比較，兩者呈線性相關(guān)（r=0.996，P＜0.01）；且不需要昂貴、精密的檢驗(yàn)儀器，實(shí)驗(yàn)室常用的全自動(dòng)生化分析儀即可完成。應(yīng)用酶化學(xué)方法檢測(cè)HbA1C 與 IE-HPLC結(jié)果進(jìn)行的比對(duì)分析也表明兩種檢測(cè)方法具有良好的相關(guān)性和精密度（y=0.962 2x + 0.045；r=0.994 0 ）[20]。

2.5 毛細(xì)管電泳（ Capillary electrophoresis，CE） CE是一類以毛細(xì)管為分離通道、以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力的新型液相分離分析技術(shù)。自1981年創(chuàng)立現(xiàn)代毛細(xì)管電泳以來，已被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)各領(lǐng)域中對(duì)多肽、蛋白質(zhì)（包括酶，抗體）、核苷酸乃至脫氧核糖核酸 （DNA）的分離 / 分析。2012年由法國賽比亞（Sebia）公司推出的 AEBIA CAPILLARYS 2 FLEX –PIERCING 毛細(xì)管電泳分析儀及其配套試劑已開始應(yīng)用于臨床HbA1C的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)原理是利用不同血紅蛋白組分在堿性緩沖液及高電壓環(huán)境中，在電滲流和電場(chǎng)力作用下的泳動(dòng)速率不同，分離血紅蛋白組分。它屬于液相電泳，儀器可以自動(dòng)溶血，通過陽極端吸入檢樣，在電滲流和電場(chǎng)力的作用下予以分離，繼在毛細(xì)管的陰極端以415 nm 直接檢測(cè)血紅蛋白，分辨率高于傳統(tǒng)的離子交換層析技術(shù)和瓊脂糖電泳方法。

在堿性緩沖液條件下，正常以及異常（或血紅蛋白變異體）血紅蛋白被依序檢測(cè)，結(jié)果分別顯示的是：從陰極端到陽極端依序?yàn)镠bA2、HbC、HbE、HbS、 HbD、HbF、 HbA0，以及其他血紅蛋白和HbA1C，距離陰極端最近的是含有糖基最少的HbA1a、HbA1b，HbA1C則處于中間位置。距離陽極端最近的是血紅蛋白的主要成分、未糖化的HbA0。HbA2增高是β- 地中海貧血的一個(gè)重要特征；而HbA2 減低常見于缺鐵性貧血及其他血紅蛋白合成障礙性疾病，可以應(yīng)用于β- 地中海貧血以及其他血紅蛋白合成障礙性疾病的篩查。高效毛細(xì)管電泳分析（High Performance Capillary Electrophoresis，HPCE）技術(shù)檢測(cè)HbA1C，已通過NGSP 、IFCC 的認(rèn)證。

IFCC在建立的參考實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)中，以確認(rèn)的高效液相色譜 / 電霧化質(zhì)譜 （high performance liquid chromatography / massspectrometry，HPLC-MS ）或高效液相色譜 / 毛細(xì)管電泳 （high performance liquid chromatography / capillary electroplioresis，HPLC-CE）作為一級(jí)參考方法進(jìn)行HbA1C檢測(cè)[21]，但從未在臨床實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)用。法國（以及美國、日本等）近年推出了可以在臨床實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行常規(guī)檢測(cè)的AEBIA CAPILLARYS 2 FLEX–PIERCING 毛細(xì)管電泳分析儀，使毛細(xì)管電泳法檢測(cè)糖化血紅蛋白逐步在世界各國得以臨床應(yīng)用。

李卿等[22]對(duì)法國以及美國的毛細(xì)管電泳方法檢測(cè)HbA1c的分析性能進(jìn)行了評(píng)估。研究表明：CE法與HPLC具有較好的相關(guān)性[R2＝0.993，差值的95%可信區(qū)間（–0.38%～0.27%）]。濃度范圍為 4.91%～9.67% 的4個(gè)樣本的HbA1C，其CV為0.77%～1.62%。干擾試驗(yàn)最顯著的影響因素是HbF，因其電荷及分子結(jié)構(gòu)近似于HbA1C；而不帶電荷的乳糜微粒干擾最弱。因此，毛細(xì)管電泳分析技術(shù)顯示了較好的精密度和抗干擾能力，且與IFCC推薦的HPLC參考方法的相關(guān)性和一致性較好，適用于臨床實(shí)驗(yàn)室HbA1C的檢測(cè)。毛細(xì)管電泳分析技術(shù)在國內(nèi)外臨床實(shí)驗(yàn)室開始得到廣泛應(yīng)用，苗杰等[23]也曾對(duì)毛細(xì)管電泳法分析糖基化血紅蛋白檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了分析評(píng)價(jià)。

2.6 現(xiàn)場(chǎng)即時(shí)檢驗(yàn)（Point-of-care- testing，POCT）POCT是醫(yī)護(hù)工作者在醫(yī)療現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用小型的、便攜式、可以即時(shí)獲得檢驗(yàn)結(jié)果的儀器進(jìn)行檢測(cè)。 國內(nèi)應(yīng)用于HbA1C檢測(cè)的POCT主要有兩種方法，一種即利用親和層析原理來顯示顏色反應(yīng)的快速檢測(cè)方法；另一種是根據(jù)抗原抗體免疫反應(yīng)原理，利用熒光分光光度儀檢測(cè)含有HbA1C的熒光染料分子斑點(diǎn)數(shù)目，換算為HbA1C % 濃度。但這些檢測(cè)方法的精密度、準(zhǔn)確度有待提高，僅可應(yīng)用于日常的臨床監(jiān)測(cè)，不宜用于臨床糖尿病的診斷。可喜的是“美國的臨床檢查POCT已經(jīng)開啟了標(biāo)準(zhǔn)化的第一步”[24]，有望在HbA1C臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化進(jìn)程中獲得顯著進(jìn)展。

3 糖化血紅蛋白臨床檢驗(yàn)國際標(biāo)準(zhǔn)化 IFCC 、ADA、國際糖尿病學(xué)會(huì)（IDF）等多個(gè)國際糖尿病學(xué)術(shù)組織分別于2007年/2010年共同發(fā)表了關(guān)于在全球臨床實(shí)驗(yàn)室實(shí)施HbA1c標(biāo)準(zhǔn)化的《聯(lián)合聲明》?！堵?lián)合聲明》的主要內(nèi)容[25]：實(shí)現(xiàn)全世界臨床實(shí)驗(yàn)室HbA1c 標(biāo)準(zhǔn)化（包括參考系統(tǒng)以及檢測(cè)結(jié)果報(bào)告）；重申了IFCC 參考系統(tǒng)是HbA1c 標(biāo)準(zhǔn)化惟一的有效系統(tǒng)；HbA1c以IFCC 的SI 單位（mmol / mol ） 以及所推導(dǎo)的NGSP （%） 百分比單位報(bào)告[ 使用IFCC-NGSP一級(jí)等式所推導(dǎo)的轉(zhuǎn)換方程，NGSP （%） =（0.091 5×IFCC（mmol / mol）+ 2.15）] 。如：5 % = 33 mmol/ mol ?！堵?lián)合聲明》的發(fā)布開啟了HbA1c 臨床實(shí)驗(yàn)室國際標(biāo)準(zhǔn)化的序幕。2010年ADA 將HbA1c 列入糖尿病診斷《指南》[26]；同年，為了規(guī)范我國糖尿病的臨床實(shí)驗(yàn)室診斷，中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)發(fā)布了《糖尿病診斷診療中實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)項(xiàng)目的應(yīng)用建議》，并啟動(dòng)了《中國糖化血紅蛋白教育計(jì)劃》。2011年我國又頒布了《糖化血紅蛋白實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指南》。

2011年1月 WHO 發(fā)表了《應(yīng)用糖化血紅蛋白診斷糖尿病》的咨詢報(bào)告[27]，報(bào)告中指出 ：HbA1c 的測(cè)定在具有嚴(yán)格的質(zhì)量控制保證、并能夠溯源至一個(gè)國際標(biāo)準(zhǔn)化參考體系，且不存在干擾其測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確性的情況下，HbA1c可以作為糖尿病的診斷試驗(yàn)。同時(shí)推薦Haemoglobin A1c，HbA1c≥6.5 % 作為糖尿病診斷切點(diǎn)，HbA1c 臨床檢驗(yàn)實(shí)現(xiàn)國際標(biāo)準(zhǔn)化這一重大決定，為世界臨床實(shí)驗(yàn)室HbA1c 檢測(cè)結(jié)果的可比性奠定了基礎(chǔ)。2015年6月23日，中華人民共和國國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)發(fā)布了《中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（WS/T 461-2015）- 糖化血紅蛋白檢測(cè)》[28]，且于2015年12月31日實(shí)施。HbA1c檢測(cè)國家標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施，為我國HbA1c 檢測(cè)結(jié)果的可比性有了全國統(tǒng)一的、且可操作的國家標(biāo)準(zhǔn)，為HbA1c 臨床檢驗(yàn)實(shí)現(xiàn)國際標(biāo)準(zhǔn)化做出了重要貢獻(xiàn)。

4 結(jié)語 我國在糖尿病臨床治療及其并發(fā)癥監(jiān)測(cè)中，HbA1c的研究應(yīng)用起步較晚，且尚未實(shí)現(xiàn)臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化，加上實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)和方法多種多樣，室間檢驗(yàn)結(jié)果可比性存在較大的差異，以及檢測(cè)結(jié)果可能受到婦女妊娠、血液透析、血紅蛋白病、溶血、以及紅細(xì)胞生存周期改變等多方面因素的影響[7..28-30]。所以，為了保證HbA1c檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，各級(jí)臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室必須嚴(yán)格執(zhí)行《中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（WS/T 461-2015）- 糖化血紅蛋白檢測(cè)》。根據(jù)HbA1c 水平對(duì)糖尿病患者進(jìn)行治療監(jiān)測(cè)的同時(shí)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)積極、認(rèn)真做好HbA1c 檢測(cè)的室內(nèi)質(zhì)量控制；積極參加室間質(zhì)量評(píng)價(jià)以驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的可靠性、可比性，逐步提升檢驗(yàn)技術(shù)人員的檢測(cè)技術(shù)水平。深信不久的將來，針對(duì)國人的HbA1c 臨床檢驗(yàn)技術(shù)會(huì)逐步完善，并融入國際標(biāo)準(zhǔn)化的進(jìn)程。

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R331.1+41 R587.1

A

1671-2587（2017）06-0646-05

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.06.035

242500 安徽省涇縣醫(yī)院（郭喜，廖遠(yuǎn)泉）；安徽醫(yī)科大學(xué)（沈繼龍）

郭喜（1981–），安徽涇縣人，主管檢驗(yàn)師，學(xué)士，主要從事臨床生化學(xué)檢驗(yàn)工作，（E-mail）cashguoxi@yeah.net。

廖遠(yuǎn)泉，副主任檢驗(yàn)師，（Tel）18756359306（E-mail）liaoyuanquan@aliyun.com。

審校者：沈繼龍，醫(yī)學(xué)博士，教授，博士生導(dǎo)師，（E-mail）shenji-long53@126.com。

2017-04-15）

（本文編輯：姚萍）