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        鱖魚苗種免疫預(yù)防傳染性脾腎壞死病生產(chǎn)試驗(yàn)

        2017-03-03 06:21:40張德順丁文嶺方麗君馬成鑫
        水產(chǎn)養(yǎng)殖 2017年2期
        關(guān)鍵詞:病魚鱖魚揚(yáng)州市

        張德順,丁文嶺,方麗君,馬成鑫

        (1.揚(yáng)州市江都區(qū)水產(chǎn)管理站,江蘇 揚(yáng)州 225200 2.揚(yáng)州市江都區(qū)小紀(jì)鎮(zhèn)水產(chǎn)站,江蘇 揚(yáng)州 225000)

        鱖魚苗種免疫預(yù)防傳染性脾腎壞死病生產(chǎn)試驗(yàn)

        張德順1,丁文嶺1,方麗君1,馬成鑫2

        (1.揚(yáng)州市江都區(qū)水產(chǎn)管理站,江蘇 揚(yáng)州 225200 2.揚(yáng)州市江都區(qū)小紀(jì)鎮(zhèn)水產(chǎn)站,江蘇 揚(yáng)州 225000)

        鱖魚傳染性脾腎壞死病,又稱鱖魚暴發(fā)性傳染病,是以脾腎壞死、腫大,鰓、肝失血變白,肝出血為主要特征的一種病毒性疫病,其病原為傳染性脾腎壞死病毒(Infectious spleen and kidney necrosis virus,ISKNV)。2013—2016年揚(yáng)州市水產(chǎn)生產(chǎn)技術(shù)指導(dǎo)站與揚(yáng)州市江都區(qū)水生動(dòng)物預(yù)防控制中心協(xié)作,對(duì)鱖魚傳染性脾腎壞死病進(jìn)行了流行性病學(xué)調(diào)查、病原檢測(cè)、疫苗免疫等研究和生產(chǎn)試驗(yàn)工作。試驗(yàn)通過三組鱖魚精養(yǎng)塘對(duì)不同苗種來源及苗種疫苗免疫養(yǎng)殖模式、方式試驗(yàn)比較和探討,以及周邊精養(yǎng)塘鱖魚傳染性脾腎壞死病流行病學(xué)調(diào)查,試驗(yàn)池塘中,南方鱖魚苗種養(yǎng)殖發(fā)病病死率高達(dá)36.8%以上,長(zhǎng)江親本繁殖的后代苗種發(fā)病率為17.2%以上,而南方鱖魚苗種在病害流行季節(jié)前15~20 d,通過疫苗注射,發(fā)病病死率明顯降低,尤其對(duì)鱖魚傳染性脾腎壞死病有較強(qiáng)的抗病力。江蘇省鱖魚養(yǎng)殖近年來發(fā)展較快,但鱖魚傳染性脾腎壞死病瀕發(fā),發(fā)病病死率極高,已成為鱖魚養(yǎng)殖持續(xù)發(fā)展的瓶頸,采用疫苗注射方式對(duì)鱖魚傳染性脾腎壞死病進(jìn)行免疫在江蘇省尚為首例。因此,積極開展鱖魚病害檢疫,改良鱖魚苗種,推動(dòng)鱖魚疫苗商品化生產(chǎn)和應(yīng)用,是發(fā)展鱖魚健康、持續(xù)增長(zhǎng)的有效途徑?,F(xiàn)將試驗(yàn)情況報(bào)告如下。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)池塘苗種及疫苗來源

        試驗(yàn)池塘選自揚(yáng)州市江都區(qū)鱖魚養(yǎng)殖重點(diǎn)區(qū)——江都區(qū)的淥洋湖水產(chǎn)養(yǎng)殖場(chǎng)6口鱖魚精養(yǎng)池塘,苗種來源分別為南方苗種、長(zhǎng)江親本自繁自育苗種、南方苗經(jīng)本地培育后注射疫苗苗種。疫苗來源為中山大學(xué)生命科學(xué)院鱖魚疫苗中試產(chǎn)品。試驗(yàn)池塘面積、苗種來源、放養(yǎng)規(guī)格、數(shù)量情況見表1。

        1.2 疫苗注射

        選擇5#、6#池塘作鱖魚注射疫苗的試驗(yàn)塘。2015年6月18日,天氣晴朗,最高氣溫28℃,上午水溫23℃,早期放養(yǎng)的南方鱖魚苗經(jīng)一個(gè)多月養(yǎng)殖,規(guī)格已達(dá)30 g/尾。當(dāng)日采用人工拉網(wǎng)兩次,捕獲全塘80%的鱖魚6 480尾,暫養(yǎng)網(wǎng)箱中,采用連續(xù)注射器逐條注射疫苗,2 h后,將注射疫苗的鱖魚2 500尾放于6#池塘,3 980尾注射疫苗的鱖魚和原塘中留存未注射疫苗的鱖魚1 620尾混養(yǎng)于5#池塘。兩個(gè)池塘均用二氧化氯消毒,防止拉網(wǎng)受傷及針口感染。

        1.3 病害流行情況

        自7月份開始,水溫23℃以上,陸續(xù)有池塘開始發(fā)生鱖魚傳染性脾腎壞死病,隨著氣溫升高,持續(xù)陰雨天氣,該病病死率呈幾何級(jí)上升,至7月27日,全場(chǎng)600×667 m2鱖魚精養(yǎng)池塘,鱖魚傳染性脾腎壞死病發(fā)病率達(dá)60%,病死率40%。7月27日后,氣溫達(dá)35~38℃后,病魚死亡量明顯減少,8月6日,氣溫降低30℃,一周后,該病發(fā)病率又明顯升高,但病死率較前期減少。

        1.4 病魚實(shí)驗(yàn)室檢查

        表1 試驗(yàn)池苗種放養(yǎng)情況

        發(fā)病池塘起初有幾尾病魚,在水中緩慢游動(dòng),對(duì)外界反應(yīng)不敏感,撈網(wǎng)較易獲取,多數(shù)病魚頭、鰓蓋、下頜、胸鰭和腹鰭均有不同程度出血,鰓絲呈白色或顏色變淡,當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖戶稱為“白鰓病”。剖開腹部后,肝顏色較正常鱖魚淡,呈灰白色或蒼白色,有紫黑色出血點(diǎn),被養(yǎng)殖戶稱為“花肝病”。脾臟、后腎、前腎腫大,呈暗紅色;大部分病魚空胃,腸道無食。以上癥狀可作為鱖魚傳染性脾腎壞死病臨床診斷指標(biāo)。

        1.5 病原檢測(cè)

        在試驗(yàn)塘分別取鱖魚不同的生長(zhǎng)階段垂死病魚2~5尾,剖開腹部,采集脾、腎組織,冰浴勻漿,取樣依次于離心機(jī)6 000 r/min、8 000 r/min離心,取上清液,通過PCR擴(kuò)增后,經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳,于凝膠成像系統(tǒng)紫外線觀察,發(fā)現(xiàn)目的條帶,判斷為陽(yáng)性,否則再進(jìn)行二次擴(kuò)增,若發(fā)現(xiàn)目的條帶,仍判為陽(yáng)性,未出現(xiàn)條帶則判為陰性。

        2 試驗(yàn)結(jié)果

        試驗(yàn)結(jié)果見表2。

        3 討論與分析

        表2 試驗(yàn)池塘鱖魚發(fā)病死亡情況

        試驗(yàn)池塘中,鱖魚魚種經(jīng)注射疫苗后,在病害流行季節(jié),鱖魚發(fā)病病死率明顯降低,在垂死病魚中,用PCR檢測(cè),雖仍檢測(cè)到鱖魚傳染性脾腎壞死病病毒,但病魚鰓、肝臟、脾腎等器官組織未發(fā)現(xiàn)病變和明顯癥狀。試驗(yàn)表明,鱖魚魚種經(jīng)注射疫苗后,機(jī)體產(chǎn)生脾腎傳染性壞死病病毒抗體,具有顯著免疫效果。

        試驗(yàn)池塘中,3#、4#池塘苗種自繁自育,親本來自長(zhǎng)江良種親本保護(hù)區(qū),繁殖的后代感染鱖魚傳染性脾腎壞死病有所減少,全區(qū)放養(yǎng)自繁自育苗種池塘有10口,面積70×667 m2,有3口共24×667 m2池塘感染鱖魚傳染性脾腎壞死病,病死率為18%。試驗(yàn)表明,良種親本繁殖的后代苗種對(duì)鱖魚傳染性脾腎壞死病雖有一定的抗病力,但在周邊池塘暴發(fā)該病時(shí),也會(huì)感染發(fā)病死亡。

        試驗(yàn)池塘中,南方苗種在病害流行季節(jié),尤其在梅雨季節(jié),氣溫28~30℃期間,發(fā)病病死率急劇上升,呈暴發(fā)性死亡。試驗(yàn)表明,近年的南方苗種對(duì)鱖魚傳染性脾腎壞死病抗病力較弱,從全場(chǎng)及周邊鱖魚養(yǎng)殖區(qū)域病害調(diào)查情況統(tǒng)計(jì),發(fā)病率達(dá)65%,病死率達(dá)50%。

        由于外地購(gòu)回的鱖魚苗種生產(chǎn)企業(yè)或個(gè)人不注重親本選種、良種更新以及病害檢疫,親本自身攜帶鱖魚傳染性脾腎壞死病病毒,通過垂直方式傳播后代,當(dāng)養(yǎng)殖環(huán)境條件符合發(fā)病條件時(shí),導(dǎo)致暴發(fā)。另外,未經(jīng)選育的親本繁殖的后代對(duì)鱖魚傳染性脾腎壞死病抗病力差,在外部養(yǎng)殖條件適宜發(fā)病時(shí),也會(huì)導(dǎo)致該病的發(fā)生。

        10.3969/j.issn.1004-2091.2017.02.013

        2016-08-31)

        江蘇省水產(chǎn)三新工程重大項(xiàng)目(Y2013-27、D2015-15)

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