李金輝，王新莊（.河南科技學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院，新鄉(xiāng) 453003；.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院，鄭州 45000）

不同處理方法對(duì)秦川牛同期發(fā)情效果的影響

李金輝1，王新莊2
（1.河南科技學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院，新鄉(xiāng) 453003；2.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院，鄭州 450002）

為了建立針對(duì)秦川牛這一地方品種穩(wěn)定、高效的同期發(fā)情程序，選取秦川牛母牛20頭，用4種同期發(fā)情方案對(duì)秦川牛進(jìn)行108頭次處理：方案Ⅰ（CIDR撤栓后直接觀察發(fā)情）、方案Ⅱ（CIDR撤栓后肌注PG）、方案Ⅲ（1次PG處理）和方案Ⅳ（2次PG處理）；應(yīng)用“2次PG法”在夏秋季（5—10月）和冬春季（11—翌年4月）共處理秦川牛供體84頭次。結(jié)果表明：秦川牛4種方案的同期發(fā)情率分別為60.0%、75.0%、53.3%和79.3%，總同期發(fā)情率77.8%，其中方案Ⅳ的同期發(fā)情率（79.3%）顯著高于方案Ⅲ（53.3%）（P＜0.05），其余各方案間差異均不顯著（P＞0.05）；夏秋季和冬春季的同期發(fā)情率（82.5%、75.0%）差異不顯著（P＞0.05）。

秦川牛；同期發(fā)情；孕激素陰道栓；氯前列烯醇；季節(jié)

秦川牛是我國(guó)著名的役肉兼用型地方優(yōu)良黃牛品種，原產(chǎn)于陜西關(guān)中平原，是在特定的生態(tài)環(huán)境下經(jīng)過(guò)世代選育而形成的優(yōu)良地方品種。其優(yōu)點(diǎn)是耐粗飼、抗病性強(qiáng)、適應(yīng)性強(qiáng)、繁殖力高，是發(fā)展肉牛產(chǎn)業(yè)，培育肉牛新品種的主導(dǎo)品種。但是隨著國(guó)外優(yōu)良品種的引進(jìn)和農(nóng)業(yè)機(jī)械化水平的提高，秦川牛的數(shù)量持續(xù)減少，品種衰退嚴(yán)重，許多寶貴基因丟失。因此，對(duì)其實(shí)施品種保護(hù)勢(shì)在必行。

目前秦川牛保種最經(jīng)濟(jì)、最有效的方法是建立秦川牛的胚胎基因庫(kù)。建立胚胎基因庫(kù)的關(guān)鍵技術(shù)是同期發(fā)情、超數(shù)排卵和胚胎冷凍保存。該技術(shù)在奶牛、肉牛上應(yīng)用和推廣較早，效果也較穩(wěn)定。但在地方黃牛品種上研究較少，有關(guān)秦川牛同期發(fā)情的相關(guān)文獻(xiàn)資料尚未查到。因此，本研究以秦川牛作為同期發(fā)情研究對(duì)象，目的是建立針對(duì)秦川牛這一地方品種有效、穩(wěn)定的技術(shù)程序，解決建立秦川牛胚胎基因庫(kù)中的關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)，同時(shí)也為其他地方黃牛品種提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 秦川母牛20頭，20月齡，購(gòu)于陜西省楊凌示范區(qū)秦川牛場(chǎng)，健康，性周期正常，無(wú)生殖道疾病且全部未經(jīng)產(chǎn)。試驗(yàn)期間，所有參試牛均舍飼，以青粗飼料配合精飼料飼喂，膘情中等。

1.1.2 試劑和藥品 氯前列烯醇（PG，上海計(jì)劃生育研究所），每支含量0.2mg，批號(hào)：030919；孕激素陰道栓（CIDR，新西蘭產(chǎn)）。

1.2 方法

1.2.1 孕激素陰道栓撤栓后直接觀察發(fā)情（方案Ⅰ） 在發(fā)情周期的任意一天放孕激素陰道栓，記為第0天，第12天早上撤栓，觀察發(fā)情，準(zhǔn)確記錄發(fā)情時(shí)間。72 h內(nèi)發(fā)情的為有效發(fā)情，統(tǒng)計(jì)發(fā)情率。

1.2.2 孕激素陰道栓撤栓后肌注PG（方案Ⅱ） 在發(fā)情周期的任意一天放孕激素陰道栓，記為第0天，第12天早上撤栓，撤栓的同時(shí)每頭牛肌注PG 0.4mg，之后觀察發(fā)情，準(zhǔn)確記錄發(fā)情時(shí)間并統(tǒng)計(jì)發(fā)情率。

1.2.3 一次PG處理（方案Ⅲ） 在發(fā)情周期的任意一天每頭牛肌注PG 0.4mg，之后觀察發(fā)情，準(zhǔn)確記錄發(fā)情時(shí)間并統(tǒng)計(jì)發(fā)情率。

1.2.4 二次PG處理（方案Ⅳ） 在發(fā)情周期任意一天每頭牛肌注PG 0.4mg，記為第0天，不觀察發(fā)情，第11天每頭牛再肌注PG 0.4mg，之后觀察發(fā)情，準(zhǔn)確記錄發(fā)情時(shí)間并統(tǒng)計(jì)發(fā)情率。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

本試驗(yàn)所有數(shù)據(jù)用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，試驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值表示，P＞0.05表示差異不顯著，P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同同期發(fā)情處理方法對(duì)秦川牛同期發(fā)情效果的影響

由表1可知，方案Ⅳ的同期發(fā)情率最高，為79.3%；方案Ⅲ的同期發(fā)情率最低，為53.3%。其中方案Ⅳ顯著高于方案Ⅲ（P＜0.05），其余各方案間差異均不顯著（P＞0.05）。

表1 不同同期發(fā)情處理方法對(duì)秦川牛同期發(fā)情效果的影響

2.2 季節(jié)對(duì)秦川牛同期發(fā)情效果的影響

由表2可知，共用“2次PG法”處理秦川牛供體84頭次，其中冬春季（11—翌年4月）44頭次，夏秋季（5—10月）40頭次，且夏秋季的同期發(fā)情率（82.5%）高于冬春季（75.0%），但差異不顯著（P＞0.05）。

表2 季節(jié)對(duì)秦川牛同期發(fā)情效果的影響

3 討論與結(jié)論

3.1 不同同期發(fā)情處理方法對(duì)秦川牛供體同期發(fā)情效果的影響

孕酮陰道栓（CIDR）在體內(nèi)持續(xù)分泌孕酮，相當(dāng)于一個(gè)人造黃體，抑制了卵泡的生長(zhǎng)。當(dāng)同時(shí)撤栓后，卵泡的抑制因素被解除，為卵泡的生長(zhǎng)提供了一個(gè)共同的起點(diǎn)，從而達(dá)到同期發(fā)情的目的。但是，有些個(gè)體在撤栓的同時(shí)，黃體還未退化，這樣在撤栓后黃體繼續(xù)分泌孕酮，達(dá)不到發(fā)情同期化的目的。針對(duì)這種情況，在撤栓后每個(gè)個(gè)體再肌注PG，由于PG有溶解黃體的作用，從而在一定程度上提高了同期發(fā)情的效果。據(jù)趙永聚等［1］在山羊上做的同期發(fā)情試驗(yàn)結(jié)果顯示，用CIDR法處理，撤栓后直接觀察發(fā)情，同期發(fā)情率37.5%，而CIDR結(jié)合PG，可獲得理想的同期發(fā)情率。本試驗(yàn)的結(jié)果也支持這種觀點(diǎn)。撤栓后直接觀察發(fā)情，發(fā)情率60.0%，撤栓后再肌注PG，同期發(fā)情率75%，后者顯著高于前者（P＜0.05）。但也有研究者單獨(dú)使用CIDR法也獲得了較高的同期發(fā)情率。郭志勤等［2］用CIDR法處理荷斯坦牛，撤栓后同期率達(dá)95%以上。楊煒?lè)澹?］用CIDR法處理荷斯坦牛72頭次，同期率93.1%。氯前列烯醇（PG）具有溶解黃體的作用，但它只對(duì)母牛發(fā)情周期5～18 d的黃體（功能性黃體）有溶解作用，而對(duì)發(fā)情周期5 d以前的新生黃體無(wú)溶解作用。因此，用PG處理1次后，總有少數(shù)母牛無(wú)反應(yīng)，對(duì)于這些母牛均需做第2次處理。為了使一群母牛有最大程度的發(fā)情率，第1次PG處理后表現(xiàn)發(fā)情的母牛不予配種，經(jīng)過(guò)11d后，再用PG對(duì)全群母牛進(jìn)行第2次處理，這時(shí)，第1次處理后無(wú)反應(yīng)的和有反應(yīng)的均處于發(fā)情周期的第5～18天。因此，“2次PG法”的同期發(fā)情率顯著高于“1次PG法”。何光中等［4］以關(guān)嶺黃牛為研究對(duì)象，1次PG處理同期發(fā)情率60.0%，2次PG處理同期發(fā)情率81.0%，明顯高于1次PG處理。趙維等［5］用PG誘導(dǎo)紅安格斯肉牛的同期發(fā)情試驗(yàn)中，1次PG處理同期發(fā)情率75.0%，2次PG處理的同期發(fā)情率84.6%，后者效果優(yōu)于前者，但差異不顯著（P＞0.05）。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，2次PG處理的同期發(fā)情率（79.3%）顯著高于1次PG處理（53.3%）（P＜0.05）。

3.2 季節(jié)因素對(duì)秦川牛同期發(fā)情效果的影響

野生牛在發(fā)情上大多表現(xiàn)有季節(jié)性，一般在夏季發(fā)情較為集中。原因可能是和夏季相對(duì)較長(zhǎng)的光照和充足的營(yíng)養(yǎng)有關(guān)。但家牛品種由于大多是舍飼，冬季也能得到充足的營(yíng)養(yǎng)，發(fā)情的季節(jié)性不明顯。有關(guān)季節(jié)因素對(duì)牛同期發(fā)情效果影響的文獻(xiàn)尚未查到。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，用2次PG法對(duì)秦川牛進(jìn)行同期發(fā)情處理，夏秋季（5—10月）的同期發(fā)情率（82.5%）高于冬春季（11—翌年4月）（75.0%），但差異不顯著（P＞0.05）。

本研究認(rèn)為：用“CIDR+PG法”和“2次PG法”處理秦川牛，都可獲得較高的同期發(fā)情率（75.0%、79.3%）；季節(jié)因素對(duì)秦川牛的同期發(fā)情效果無(wú)顯著影響，夏秋季（5—10月）同期發(fā)情率（82.5%）高于冬春季（11—翌年4月）（75.0%），但差異不顯著（P＞0.05）。

［1］趙永聚.不同陰道栓處理山羊同期發(fā)情效果的研究［J］.甘肅畜牧獸醫(yī)，2002（6）：4-7.

［2］郭志勤.利用CIDR處理供體牛的超數(shù)排卵效果［J］.草食家畜, 2001（增刊）：105-106.

［3］楊煒?lè)?牛、羊胚胎移植技術(shù)研究與應(yīng)用［D］.陜西楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2003.

［4］何光中.提高飼養(yǎng)水平對(duì)黃牛同期發(fā)情效果的影響研究［J］.貴州畜牧獸醫(yī)，2002（6）：1-3.

［5］趙維.氯前列烯醇誘導(dǎo)紅安格斯肉牛同期發(fā)情效果實(shí)驗(yàn)［J］.黑龍江動(dòng)物繁殖，2005（3）：31-32.

S823.3

A

2095-3887（2017）01-0064-02

10.3969/j.issn.2095-3887.2017.01.021

2016-10-23

河南省杰出人才創(chuàng)新基金（0421002100）

李金輝（1981-），男，助教，碩士研究生。研究方向：哺乳動(dòng)物胚胎工程。

王新莊（1963-），男，研究員，博士研究生。研究方向：哺乳動(dòng)物胚胎工程和發(fā)育生物學(xué)。