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        2015年新疆食源性金黃色葡萄球菌污染狀況及耐藥性分析

        2017-02-18 03:48:12楊勤德遠雪梅
        農(nóng)產(chǎn)品加工 2017年1期
        關(guān)鍵詞:熟肉制品食源性西林

        蘇 靜,武 運,楊勤德,馬 鑫,于 烽,劉 艷,遠雪梅

        (1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與藥學(xué)學(xué)院,新疆烏魯木齊 830052;2.新疆維吾爾自治區(qū)疾病預(yù)防控制中心,新疆烏魯木齊 830001)

        2015年新疆食源性金黃色葡萄球菌污染狀況及耐藥性分析

        蘇 靜1,2,*武 運1,楊勤德2,馬 鑫2,于 烽2,劉 艷2,遠雪梅2

        (1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與藥學(xué)學(xué)院,新疆烏魯木齊 830052;2.新疆維吾爾自治區(qū)疾病預(yù)防控制中心,新疆烏魯木齊 830001)

        2015年從新疆地區(qū)14個地(州、市)市售7類940份食品中,共分離得到49株金黃色葡萄球菌,陽性率為5.21%。除調(diào)味品、烘焙及油炸類食品未檢出外,熟肉制品、肉與肉制品、餐飲食品、地方特色食品、乳與乳制品的檢出率分別為10.00%,7.89%,6.25%,5.00%,2.86%。同時,從分離得到的49株金黃色葡萄球菌菌株中共檢出36株耐藥菌,耐藥率為73.47%,其中1株為6重耐藥的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA),其余35株為單一或多重耐藥的甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(MSSA)。對抗生素的耐藥率從高到低依次為紅霉素(ERY)57.14%,克林霉素(CLI)53.06%,四環(huán)素(TET)46.94%,環(huán)丙沙星(CIP)24.49%,慶大霉素(GEN)8.16%,苯唑西林(OXA)2.04%,頭孢西?。–FX)2.04%,甲氧芐啶/磺胺甲噁唑(SXT)2.04%,萬古霉素(VAN)0,達托霉素(DAP)0,氯霉素(CHL)0。

        食源性致病菌;金黃色葡萄球菌;污染狀況;耐藥情況;食品安全

        0 引言

        食品安全已成為全球重要的公共衛(wèi)生問題,食源性致病菌對健康危害越來越引起人們的關(guān)注。金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) 是引起食物中毒的主要致病菌之一[1]。據(jù)報道,2006年在美國由于金黃色葡萄球菌引起的食物中毒有29起,在細菌性食物中毒事件中居第3位。我國每年發(fā)生的此類食物中毒事件也非常多,全國各地均有報道[2]。近年來,隨著各類廣譜、高效抗生素的大量臨床應(yīng)用,金黃色葡萄球菌的耐藥性也發(fā)生了很大變化。細菌的耐藥出現(xiàn)不僅給臨床及獸醫(yī)用藥帶來了麻煩,重要的是其耐藥性還可通過食物鏈傳播,臨床細菌的耐藥性與食物中細菌的耐藥性直接相關(guān)。多重耐藥金黃色葡萄球菌的出現(xiàn),已危及到對該菌引發(fā)食源性疾病的控制[3]。目前,新疆地區(qū)在食品中金黃色葡萄球菌流行性情況尚缺乏充足的數(shù)據(jù)。為了了解新疆食源性金黃色葡萄球菌的污染狀況及耐藥趨勢,并為細菌性食源性疾病的治療、耐藥性傳播的防控提供科學(xué)依據(jù)。根據(jù)2015年國家食品安全風(fēng)險監(jiān)測方案,對新疆14個地(州、市)市售的7類食品進行金黃色葡萄球菌檢測,同時對分離到的金黃色葡萄球菌菌株進行耐藥性分析。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 樣品及標準菌株

        樣品采自新疆地區(qū)14個地(州、市)的農(nóng)貿(mào)市場、食品超市等市售食品,包括乳與乳制品、肉與肉制品、熟肉制品、調(diào)味品、烘焙及油炸類食品、餐飲食品、地方特色食品共7類940份食品樣品,采樣時間集中在2015年4月-11月。

        質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌(ATCC 29213),為國家食品安全風(fēng)險評估中心配發(fā)。

        1.1.2 主要儀器及試劑

        VITEK 2 COMPACT型全自動微生物生化鑒定儀、GP型革蘭氏陽性細菌鑒定卡、Thermo型生物安全柜、SANYO MCO186T型恒溫培養(yǎng)箱、Leica型電子顯微鏡、Sensititre AIM型全自動藥敏試驗菌液接種儀、Sensititre Vizion型全自動藥敏試驗菌液判讀儀、Sensititre PRCFSRA型革蘭氏陽性非苛養(yǎng)菌的MIC藥敏板;Sensititre型CAMHBT肉湯、腦心浸液瓊脂培養(yǎng)基、腦心浸液肉湯、血漿凝固酶試劑、Baird-Parker瓊脂平板、血瓊脂平板、7.5%氯化鈉肉湯。

        1.2 試驗方法

        1.2.1 分離鑒定

        金黃色葡萄球菌的分離鑒定,參照《2015年國家食品污染和有害因素風(fēng)險監(jiān)測工作手冊》中金黃色葡萄球菌檢驗標準操作程序[4]。將樣品接種在7.5%氯化鈉肉湯中,于36℃條件下培養(yǎng)24 h。取增菌液劃種Baird-Parker平板及血平板,于36℃條件下培養(yǎng)24 h。挑取可疑菌落進行涂片染色、溶血試驗及血漿凝固酶試驗,最后用全自動微生物生化鑒定儀(VITEK 2 COMPACT型)進行驗證。

        1.2.2 藥敏試驗

        根據(jù)臨床與實驗室標準化協(xié)會(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI) 推薦的微量肉湯稀釋法,定量測定致病菌的最低抑菌濃度(Minimal inhibitory concentration,MIC)。將質(zhì)控菌株和備檢菌株分別接種于腦心浸液瓊脂培養(yǎng)基,于36℃條件下純培養(yǎng)24 h。挑取3~5個純菌落,均勻懸浮于去離子水中制成0.5麥氏菌懸液。將菌懸液與CAMHBT肉湯通過全自動藥敏試驗菌液接種儀接種在革蘭氏陽性非苛養(yǎng)菌的MIC藥敏板上,藥敏板用塑料膜封好,置于濕盒中,于36℃條件下純培養(yǎng)24 h。采用全自動藥敏試驗菌液判讀儀,對MIC藥敏板進行判讀分析。參考國內(nèi)外常用抗生素種類、既往耐藥監(jiān)測結(jié)果,根據(jù)CLSI文件M100-S24推薦的藥敏試驗抗生素選擇原則確定耐藥監(jiān)測的抗生素,確定了β-內(nèi)酰胺類、多肽類、林可霉素類、四環(huán)素類、脂肽類、大環(huán)內(nèi)酯類、酰胺醇類、氟喹諾酮類、磺胺類、氨基糖苷類共計10類抗生素中的11種,其中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)鑒定用頭孢西丁代替甲氧西林,耐頭孢西丁的金黃色葡萄球菌即是MRSA。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 金黃色葡萄球菌檢出情況

        檢測的940份樣品包括乳與乳制品、肉與肉制品、熟肉制品、調(diào)味品、烘焙及油炸類食品、餐飲食品、地方特色食品共7類食品,共檢出金黃色葡萄球菌49株,檢出率為5.21%。除調(diào)味品、烘焙及油炸類食品外,熟肉制品、肉與肉制品、餐飲食品、地方特色食品、乳與乳制品均檢出金黃色葡萄球菌,檢出率分別為10.00%,7.89%,6.25%,5.00%,2.86%。

        2015年新疆地區(qū)金黃色葡萄球菌檢出情況見表1。

        表1 2015年新疆地區(qū)金黃色葡萄球菌檢出情況

        2.2 金黃色葡萄球菌耐藥情況

        分離得到的49株金黃色葡萄球菌中共檢出36株耐藥菌,耐藥率為73.47%。對11種抗生素耐藥率從高到低依次為紅霉素(ERY) 57.14%,克林霉素(CLI)53.06%,四環(huán)素(TET)46.94%,環(huán)丙沙星(CIP)24.49%,慶大霉素(GEN)8.16%,苯唑西林(OXA)2.04%,頭孢西?。–FX)2.04%,甲氧芐啶/磺胺甲噁唑(SXT)2.04%,萬古霉素(VAN)0,達托霉素(DAP)0,氯霉素(CHL)0。

        49株金黃色葡萄球菌對11種抗生素耐藥情況見表2。

        表2 49株金黃色葡萄球菌對11種抗生素耐藥情況

        2.3 金黃色葡萄球菌耐藥譜結(jié)果

        49株金黃色葡萄球菌中有1株為耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA),48株為甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(MSSA)。其中,1株的MRSA為6重耐藥,占MRSA菌株數(shù)100%;48株MSSA中有13株對所選11種抗生素都敏感,其余35株為單一或多重耐藥。其中,2株為5重耐藥,占MSSA菌株數(shù)4.16%;6株為4重耐藥,占MSSA菌株數(shù)12.5%;10株為3重耐藥,占MSSA菌株數(shù)20.83%;9株為雙重耐藥,占MSSA菌株數(shù)18.75%;8株為單一耐藥,占MSSA菌株數(shù)16.67%。

        49株金黃色葡萄球菌對11種抗生素耐藥譜見表3。

        表3 49株金黃色葡萄球菌對11種抗生素耐藥譜

        3 結(jié)論與討論

        通過對國家食品安全風(fēng)險監(jiān)測方案選定的市售7類940份食品中金黃色葡萄球菌的檢測,發(fā)現(xiàn)新疆地區(qū)市售食品中存在金黃色葡萄球菌的污染,且不同來源之間金黃色葡萄球菌檢出率存在差異。在乳與乳制品、肉與肉制品、熟肉制品、餐飲食品、地方特色食品中均有檢出,而在調(diào)味品、烘焙及油炸類食品中未檢出。其中,熟肉制品檢出率最高,為10.00%。隨著生活節(jié)奏的加快和生活方式的改變,在人們的日常膳食結(jié)構(gòu)中方便快捷的食物(如熟肉制品)所占比例越來越高[5]。熟肉制品由于大多為經(jīng)營者自己制作,且在加工與消費過程中,極易被致病菌污染。其次,肉與肉制品檢出率為7.89%,餐飲食品6.25%,地方特色食品5.00%,乳與乳制品2.86%,這些均為動物源性食品,表明動物性食品中金黃色葡萄球菌有較高的檢出率,這與國內(nèi)外有關(guān)報道相符[6]。由于新疆地區(qū)的飲食習(xí)慣以肉與肉制品為主,而肉制品中較高的金黃色葡萄球菌污染應(yīng)引起食品衛(wèi)生管理部門的高度重視。

        食源性致病菌的耐藥性對食品安全及人類健康的影響已經(jīng)引起很多國家的警惕,細菌耐藥性的產(chǎn)生,尤其是多重耐藥菌的出現(xiàn)并廣為傳播是當今醫(yī)學(xué)界的難題,食物鏈是細菌耐藥性的產(chǎn)生與播散的重要環(huán)節(jié)之一[7]。大量抗菌藥作為疾病感染防治和激素被濫用于飼料中,從而影響了動物腸道正常菌群并刺激耐藥菌的復(fù)制,動物排泄物中的抗菌藥和耐藥菌株排入環(huán)境中通過食物鏈傳播[8]。通過對2015年新疆地區(qū)市售食品中分離到的49株金黃色葡萄球菌進行耐藥性分析,結(jié)果顯示49株金黃色葡萄球菌中對11種抗生素共檢出36株耐藥菌,耐藥率為73.47%。其中,對四環(huán)素(TET)、克林霉素(CLI)、紅霉素(ERY)耐藥率均接近或超過50%,依次為46.94%,53.06%,57.14%。同時,也呈現(xiàn)出多重耐藥性,雙重及雙重以上耐藥菌株28株,占耐藥菌株總數(shù)的77.78%;出現(xiàn)1株6重耐藥,為耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)。眾所周知,MRSA感染的治療是臨床十分棘手的難題之一,關(guān)鍵是其對許多抗生素有多重耐藥,因其耐藥機制是PBPs(青霉素結(jié)合蛋白)性質(zhì)的改變。因此,MRSA幾乎對所有的β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥,且在同時還可能對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素、氨基糖苷類抗生素等多種抗菌藥物表現(xiàn)出耐藥性。長期以來,萬古霉素是治療MRSA感染的基石和金標準,耐萬古霉素的MRSA被列為未來10年的超級耐藥細菌,而此次研究中雖然沒有萬古霉素(VAN)耐藥株出現(xiàn),但出現(xiàn)的1株萬古霉素(VAN)中介株也應(yīng)當引起研究人員的重視。

        此次研究為新疆地區(qū)食源性金黃色葡萄球菌污染狀況分析及耐藥性趨勢研究積累了數(shù)據(jù),同時也為相關(guān)部門為做好食源性疾病的預(yù)防和控制工作提供一定指導(dǎo)意義。

        [1]李光偉,潘孝仁,Lillioja S,等.檢測人群胰島素敏感性的一項新指數(shù) [J].中華內(nèi)科雜志,1993,32(10):656-660.

        [2]吳劍閣,劉英豪,樓萍,等.一起由金黃色葡萄球菌腸毒素引起群體性食物中毒的病原學(xué)分析 [J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2011,38(8):1 424-1 425.

        [3]王迪,張曉媛,陳倩,等.北京市食源性金黃色葡萄球菌耐藥及分子分型研究 [J].中國食品衛(wèi)生雜志,2014,26(5):428-434.

        [4]楊大進,李寧,蔣定國,等.2015年國家食品污染和有害因素風(fēng)險監(jiān)測工作手冊 [M].北京:中國標準出版社,2015:754-772.

        [5]聞劍,梁輝,戴光偉,等.2008-2011年廣東省熟肉制品中常見食源性致病菌污染狀況分析 [J].中國食品衛(wèi)生雜志,2013,25(1):68-70.

        [6]賀連華,王瑞端,陳妙玲,等.食品中金黃色葡萄球菌的腸毒素檢測及耐藥性 [J].職業(yè)與健康雜志,2006,22(15):1 173-1 174.

        [7]Hennign Somm,Trine Marie L,Abee-Lund.Antibiotic resistance in food-related bacteria-a result of interfering with the global web of bacteria genetics[J].International J Food Microbiol,2002,78:43-56.

        [8]周藜,周倩,朱玫.貴州省食源性金黃色葡萄球菌腸毒素及耐藥分析 [J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2014,24(22):3 318-3 320.◇

        Pollution Condition and the Analysis of Drug Resistance of Foodborne Staphylococcus Aureus in Xinjiang in 2015

        SU Jing1,2,*WU Yun1,YANG Qinde2,MA Xin2,YU Feng2,LIU Yan2,YUAN Xuemei2

        (1.School of Food Science and Pharmacy,Xinjiang Agricultrual University,Urumqi,Xinjiang 830052,China;2.Xinjiang Uygur Autonomous Region Center for Disease Control and Prevention,Urumqi,Xinjiang 830001,China)

        There are 49 Staphylococcus aureus strains are isolated from 940 foods in 7 kinds groceries from 14 areas in 2015,and the,positive rate is 5.21%.In addition to the condiments,baked and fried foods have no pollution,cooked meat products,meat and meat products,food,local characteristics food,milk and dairy products are 10.00%,7.89%,6.25%,5.00%,2.86%.At the same time,36 strains of drug-resistant bacteria detection resistant rate of 73.47%are isolated from the 49 strains of Staphylococcus aureus strains.1 for 6 drug-resistant strains of methicillin-resistant Staphylococcus aureus(MRSA),and the remaining 35 for single or multiple drug-resistant strains of methicillin sensitive Staphylococcus aureus(MSSA).Irologic resistance to antibiotics from high to low are erythromycin(ERY)57.14%,clindamycin 53.06%(CLI),tetracycline(TET) and ciprofloxacin(CIP) 46.94%to 24.49%,gentamicin(GEN) 8.16%,benzene azole westwood(OXA)and cefoxitin provided(CFX)are 2.04%,2.04%,methyl benzyl oxygen organism/sulfamethoxazole(SXT)2.04%,vancomycin(VAN)0,toxin(DAP)0,chloramphenicol(CHL)0.

        foodborne pathogenic bacteria;Staphylococcus aureus;pollution condition;drug resistance;food safety

        TS201.3

        A

        10.16693/j.cnki.1671-9646(X).2017.01.018

        1671-9646(2017)01a-0066-03

        2016-11-21

        新疆自治區(qū)科技支撐項目(201431113)。

        蘇 靜(1981— ),女,在讀碩士,主管技師,研究方向為食品安全。*

        武 運(1965— ),女,碩士,教授,研究方向為食品生物技術(shù)。

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