廖勤儉，郭艷，周翰玲，安明哲，李楊華，王小琴，謝正敏

(四川宜賓五糧液股份有限公司，四川宜賓644007)

己酸發(fā)酵液中己酸的檢測方法

廖勤儉，郭艷，周翰玲，安明哲，李楊華，王小琴，謝正敏

(四川宜賓五糧液股份有限公司，四川宜賓644007)

建立了一種己酸發(fā)酵液中己酸的檢測方法。己酸發(fā)酵液經(jīng)硫酸酸化處理后，用二氯甲烷萃取，利用氣相色譜檢測萃取液中的己酸。結(jié)果表明，定量檢測限為10mg/L，線性相關系數(shù)R2值為0.9999，回收率為98.05%～101.88%，檢測結(jié)果的相對偏差（RSD）為0.32%。

己酸發(fā)酵液；己酸；萃??；氣相色譜

己酸是濃香型白酒中己酸乙酯的前體物質(zhì)，也是白酒成分之一。目前，己酸發(fā)酵液的檢測方法有硫酸銅顯色法、比色法、紙上層析法、直接進樣毛細管柱氣相色譜法[1]，蒸餾進樣毛細管柱氣相色譜法[2]等，其中硫酸銅顯色法、比色法、紙上層析法較適合于生產(chǎn)中的快速檢測，但不能準確地檢出發(fā)酵液中的己酸含量。己酸發(fā)酵過程會添加碳酸鈣等調(diào)節(jié)pH值的鹽類，不能直接進氣相色譜儀進行檢測，已有的氣相色譜法也有對發(fā)酵液樣品的前處理，如活性炭吸附，過濾，或是蒸餾己酸發(fā)酵液的方式。本實驗研究了一種己酸發(fā)酵液中己酸的檢測方法，經(jīng)硫酸酸化后，利用二氯甲烷進行萃取，萃取液進氣相色譜儀進行檢測，該方法簡便適用，精確度高，重復性好。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

己酸標準品的配制：準確稱取色譜級己酸，以二氯甲烷配制成100 m L濃度為10 g/L的標準儲備液放置于4℃冰箱中冷藏。

儀器設備：美國Agilent公司6890氣相色譜，F(xiàn)ID檢測器。

1.2 實驗方法

1.2.1 氣相色譜條件

色譜柱：HP-INNOWax Agilent30×0.25×0.25；進樣口溫度：250℃；檢測器溫度：250℃；柱流速：恒流1.0m L/m in；分流模式：20∶1；進樣量：1μL；柱溫程序升溫：（HPINNOWax Agilent）40℃（保持1 m in），以8℃/m in升溫至100℃（保持1m in），再以6℃/m in升溫至220℃（保持1m in）。

1.2.2 樣品前處理

己酸發(fā)酵液200μL，2%的硫酸溶液100μL，混勻后，用2m L的二氯甲烷進行萃取，萃取液用0.2μm的膜過濾后作為待測樣品。

2 結(jié)果與分析

2.1 標樣和樣品的檢測

取10 g/L的己酸標準溶液，用二氯甲烷稀釋至1000mg/L，進行定性檢測。標準品和樣品的氣相色譜圖見圖1、圖2，己酸的出峰時間為20.820m in左右。

2.2 標準曲線及線性范圍

取10mg/L的己酸標準溶液，用二氯甲烷稀釋至100 mg/L、500 mg/L、1000 mg/L、1500 mg/L、2000 mg/L共5個濃度梯度，作為定量分析校正。以峰面積Y為縱坐標，以質(zhì)量濃度（mg/L）為X橫坐標進行線性回歸。結(jié)果表明，化合物線性關系良好，回歸方程為y=0.5493x-11.272，R2值為0.9999，滿足分析要求。根據(jù)3倍信噪比計算出化合物的檢測限為10mg/L。

表1 精密度實驗結(jié)果(n=6)

圖1 標樣色譜圖

圖2 發(fā)酵液樣品色譜圖

2.3 精密度實驗

用上述實驗方法對同一樣品平行測定6次，得到發(fā)酵液經(jīng)前處理后的待測樣品中己酸含量的檢測結(jié)果的相對偏差（RSD）為0.32%，滿足分析要求，結(jié)果見表1。

2.4 加標回收率實驗

取發(fā)酵液4份，其中1份作為空白本底值進行前處理，另外3份分別加入已知量的標準溶液后進行前處理，處理后的樣品進行檢測，用上述實驗方法進行回收率實驗。實驗結(jié)果表明，化合物的回收率為98.05%～101.88%，滿足分析要求。表2中數(shù)據(jù)為處理后樣品及加標處理后樣品的實測值。

表2 處理后樣品及加標處理后樣品的實測值

3 結(jié)果與討論

該方法能快速準確地分析發(fā)酵液樣品中的己酸含量。發(fā)酵液樣品只需簡單的萃取就能進樣分析，R2值、檢測的精密度、加標回收率等各項指標均達到分析要求。

該方法還可以檢測釀酒廢水中的己酸、丁酸等沸點較高的有機酸，省去了對有機酸的衍生等前處理，又避免了直接進樣對色譜柱的損害。

[1]羅維,劉永婷.準確測定己酸菌液中己酸含量的方法[J].釀酒科技,2003(5)：83.

[2]鐘雨,謝宜輝.己酸菌培養(yǎng)液中己酸含量的測定方法[J].釀酒科技,2004(3)：91-92.

Determination Method of Caproic Acid in Caproic Acid Fermented Liquid

LIAOQinjian,GUOYan,ZHOU Hanling,ANM ingzhe,LIYanghua,WANG Xiaoqin and XIEZhengm in
(Wuliangye Group Co.Ltd.,Yibin,Sichuan 644007,China)

In this study,a method for the determination of caproic acid in caproic acid fermented liquid has been developed.Caproic acid fermented liquid was acidified by using sulfuric acid and then extracted by using dichloromethance,and caproic acid in the extract was determined by using GC.The results suggested that,the quantitative detection limit was 10 mg/L,the linear correlation coefficient R2was 0.9999,the recovery ratewas98.05%to 101.88%,and relative deviation(RSD)of the test results was0.32%.

caproic acid fermented liquid;caproic acid;extraction;gas chromatography

TS262.3；TS261.1；TS261.7

A

1001-9286（2017）02-0118-02

10.13746/j.njkj.2016282

2016-09-18

廖勤儉，女，四川宜賓人，高級工程師，主要從事儀器分析工作。

優(yōu)先數(shù)字出版時間：2016-11-21；地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20161121.1632.004.htm l。