□ 曾 婧 武漢工控檢驗(yàn)檢測(cè)有限公司

歐盟法和國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法對(duì)辣椒醬中蘇丹紅Ⅰ號(hào)含量檢測(cè)的比較

□ 曾 婧 武漢工控檢驗(yàn)檢測(cè)有限公司

對(duì)比國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法和歐盟法的前處理、標(biāo)準(zhǔn)曲線、檢出限和回收率，確定更簡(jiǎn)便高效的測(cè)試方法。結(jié)果表明歐盟法與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法在技術(shù)指標(biāo)上并無(wú)太大差異，但歐盟法前處理更為簡(jiǎn)便。

蘇丹紅Ⅰ號(hào)；歐盟法；國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法；高效液相色譜

蘇丹紅Ⅰ號(hào)是一種合成型偶氮染料，在一定條件下能分解產(chǎn)生致癌芳香胺。2004年我國(guó)質(zhì)量檢驗(yàn)檢疫總局出臺(tái)了國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)法，但國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法樣品處理過程復(fù)雜，歐盟法前處理簡(jiǎn)單。筆者以市場(chǎng)上購(gòu)買的辣椒醬為待測(cè)樣品，分別用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法、歐盟法對(duì)蘇丹紅Ⅰ號(hào)進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)比這兩種方法的線性回歸系數(shù)、加標(biāo)回收率、檢出限，發(fā)現(xiàn)歐盟法與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法檢測(cè)技術(shù)水平相當(dāng)，但歐盟法前處理步驟相對(duì)簡(jiǎn)單，更高效。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

高效液相色譜儀（Waters e2695-DAD 2998）、梅特勒ME 204/02電子天平。

1.2 試藥

蘇丹紅Ⅰ號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品（含量98%）；乙腈、丙酮（色譜純）；乙醚、正己烷（分

析純）；水（超純水）；辣椒醬（市場(chǎng)購(gòu)買）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：C18 3.5 μm 4.6 mm×150 mm。流動(dòng)相：溶劑A（0.1%甲酸水溶液:乙腈=85:15），溶劑B（0.1%甲酸乙腈溶液:丙酮=80:20），梯度洗脫。流速：1 mL/min。柱溫：30 ℃。檢測(cè)波長(zhǎng)：478 nm。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對(duì)照品儲(chǔ)備液

稱取蘇丹紅Ⅰ號(hào)10.0 mg（按實(shí)際含量折算），乙醚溶解后用正己烷定容至250 mL。

2.2.2 對(duì)照品工作曲線

吸取適量對(duì)照品儲(chǔ)備液，用正己烷逐級(jí)稀釋成濃度為0.16 μg/mL、0.32 μg/mL、0.64 μg/mL、1.28 μg/mL、2.56 μg/mL的工作曲線。

2.3 線性關(guān)系

分別取20 μL工作曲線注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積A和質(zhì)量濃度C進(jìn)行線性回歸，得歐盟法線性回歸方程：A=4.339C+0.017 3，r=0.999 9。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法線性回歸方程：A=0.080 5C+0.001 3，r=0.999 2。 結(jié)果表明，歐盟法和國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法在蘇丹紅Ⅰ號(hào)濃度為0.16~2.56 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系均良好。

2.4 檢出限

將標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行逐級(jí)稀釋，依次取20 μL樣液注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，記錄信噪比為3時(shí)，待測(cè)樣液的濃度。得歐盟法檢出限為12.08 μg/kg，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法檢出限為19.38 μg/kg。

2.5 辣椒醬樣品含量的測(cè)定

2.5.1 歐盟法

稱取10 g樣品于三角瓶，加入100 mL乙腈，渦旋5 min，超聲振蕩1 h，取適量上清液用0.45 μm有機(jī)濾膜過濾，取20 μL濾液注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算含量，結(jié)果表明該批次辣椒醬中蘇丹紅Ⅰ號(hào)含量為未檢出。

2.5.2 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法

稱取10 g樣品于小燒杯，加入10 mL正己烷溶解后，慢慢加入氧化鋁層析柱中，待樣液完全淋出后，用30 mL正己烷清洗層析柱至流出液無(wú)色。用60 mL 5%的丙酮正己烷溶液進(jìn)行洗脫，收集、濃縮后，用丙酮轉(zhuǎn)移并定容至5 mL［1］，濾液用0.45 μm有機(jī)濾膜過濾，取20 μL濾液注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算含量，結(jié)果表明該批次辣椒醬中蘇丹紅Ⅰ號(hào)含量為未檢出。

2.6 加標(biāo)回收率

2.6.1 歐盟法

稱取該辣椒醬樣品6份，按照0.64 μg/mL的加標(biāo)量進(jìn)行加標(biāo)，按2.5.1操作進(jìn)行處理，得6份樣品的加標(biāo)量分別為0.596 7、0.604 6 、0.6089、0.606 4、0.606 0、0.612 3 μg/mL；回收率分別為 93.20%、94.50%、95.10%、94.70%、94.70%、95.70%，平均值為94.66%。

2.6.2 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法加標(biāo)試驗(yàn)

稱取該辣椒醬樣品6份，按照0.64 μg/mL的加標(biāo)量進(jìn)行加標(biāo)按2.5.2操作進(jìn)行處理，得6份樣品的加標(biāo)量分別為0.573 9、0.583 2 、0.589 4 、0.596 9 、0.580 1、0.593 2 μg/mL；回收率分別為 89.70%、91.10%、93.30%、90.60%、90.60%、92.30%，平均值為91.27%。

3 討論

此次實(shí)驗(yàn)中，兩種方法的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性系數(shù)均大于0.999；歐盟法的檢出限為12.08 μg/kg，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法的檢出限約為19.38 μg/kg；兩種方法的回收率均大于90%，技術(shù)水平上并無(wú)太大差異。

實(shí)驗(yàn)操作過程中，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法需要進(jìn)行復(fù)雜的中性氧化鋁柱實(shí)驗(yàn)［2］，使用大量的試劑，耗時(shí)長(zhǎng)，此過程雖能除去干擾物質(zhì)，但造成了色素的大量損失［3］，影響樣品中蘇丹紅Ⅰ號(hào)的檢出；歐盟法僅使用乙腈，操作簡(jiǎn)單、時(shí)間短，最大程度節(jié)省了處理時(shí)間，相比較而言，歐盟法的分析成本相對(duì)低廉，且快速方便。

[1]國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).食品中蘇丹紅染料的檢測(cè)方法（GB-19681-2005）[S].北京:國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)出版社,2005.

[2]唐英章.現(xiàn)代食品安全檢測(cè)技術(shù)[M].北京:科學(xué)出版社,2004.

[3]王鳳池,孫漢文,呂紅英.高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定食品中蘇丹紅1號(hào)、2號(hào)、3號(hào)和4號(hào)[J].食品科技,2002(7).