□ 呂 晨 龍口市檢驗(yàn)檢測(cè)中心

營(yíng)養(yǎng)米粉中阪崎腸桿菌檢測(cè)方法研究進(jìn)展綜述

□ 呂 晨 龍口市檢驗(yàn)檢測(cè)中心

在我國經(jīng)濟(jì)發(fā)展的大趨勢(shì)下，食品工業(yè)也進(jìn)入了迅猛發(fā)展的黃金階段。然而，部分食品企業(yè)在加工生產(chǎn)中沒有樹立良好的食品安全意識(shí)，致使食品在生產(chǎn)中發(fā)生污染，產(chǎn)生一些對(duì)消費(fèi)者造成健康隱患的致病菌，阪崎腸桿菌就是其中之一。以營(yíng)養(yǎng)米粉為例，本文主要探討食品檢測(cè)環(huán)節(jié)中阪崎腸桿菌檢測(cè)方法的發(fā)展現(xiàn)狀，并通過積極思考，展望營(yíng)養(yǎng)米粉中阪崎腸桿菌檢測(cè)的未來方向，以供參考。

營(yíng)養(yǎng)米粉；阪崎腸桿菌；檢測(cè)方法；

食品檢測(cè)一直是幫助質(zhì)監(jiān)部門保證食品安全的一種手段，而食品中致病菌的檢測(cè)和防控更是提升食品質(zhì)量和保障消費(fèi)者安全的一種重要的技術(shù)方式[1]。作為營(yíng)養(yǎng)食品，營(yíng)養(yǎng)米粉在生產(chǎn)環(huán)節(jié)中容易被一些致病菌污染，對(duì)消費(fèi)者的健康造成不良影響。因此，我們必須要強(qiáng)化營(yíng)養(yǎng)米粉中致病菌的檢測(cè)技術(shù)管理，尤其是阪崎腸桿菌這種極易引發(fā)嬰幼兒嚴(yán)重病癥的病菌。目前，很多醫(yī)學(xué)報(bào)告已經(jīng)將嬰幼兒營(yíng)養(yǎng)粉作為感染阪崎腸桿菌的主要渠道[2-4]。因此，審視營(yíng)養(yǎng)米粉中阪崎腸桿菌檢測(cè)方法的研究現(xiàn)狀并理性展望已成為研究阪崎腸桿菌檢測(cè)方法的重要目標(biāo)。

1 營(yíng)養(yǎng)米粉中阪崎腸桿菌檢測(cè)常用方法

1.1 定量PCR方法

這是在阪崎腸桿菌檢測(cè)中最常用的分子生物學(xué)定量檢測(cè)方法之一，它是由常規(guī)PCR檢測(cè)方法發(fā)展而來的，這種方法的原理較易理解，即在PCR體系中引入一個(gè)熒光基團(tuán)，并利用熒光基團(tuán)發(fā)出的信號(hào)累積量來實(shí)時(shí)記錄PCR的反映過程，然后將記錄結(jié)果繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線來定量分析樣本數(shù)據(jù)。定量PCR檢測(cè)法存在兩種衍生方法：①探針類。也就是利用一種生物學(xué)雜交探針來指示PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，這種方法對(duì)于特異性檢測(cè)較為適用；②非探針類。這種方法是利用一些擴(kuò)增產(chǎn)物的特征來進(jìn)行反映指示的，這種方法較為簡(jiǎn)便，所以應(yīng)用范圍也較為廣泛。目前，熒光定量的PCR方法在嬰幼兒食品的細(xì)菌污染檢測(cè)方面應(yīng)用較廣[5]。我國學(xué)界已建立起了嬰兒奶粉的阪崎腸桿菌熒光定量PCR法，該方法就是采用先增菌后檢測(cè)的模式，利用TaqMan熒光探針和SYBRGreen熒光染料兩種方法，針對(duì)基因序步驟列為16S-23SrDNA的ITS序列。這種方法的靈敏度極高。

1.2 脈沖場(chǎng)凝膠電泳檢測(cè)法

檢測(cè)中，常用脈沖場(chǎng)凝膠電泳法來分離必須的DNA大分子，這是由于在傳統(tǒng)的凝膠電泳里的大分子DNA向同一方向移動(dòng)的速度差別不大，也就不會(huì)形成區(qū)分度較大的條帶。加入脈沖場(chǎng)之后，電場(chǎng)中的電極不斷發(fā)生變換，凝膠電泳中的小分子可以隨著電極變動(dòng)迅速做出反映，而大分子DNA卻很難迅速轉(zhuǎn)向，利用這一原理就可以分離出較大分子DNA。到目前為止，脈沖場(chǎng)凝膠電泳法已經(jīng)成為基因分型的重要檢測(cè)方式，在微生物檢測(cè)中的應(yīng)用也越來越廣泛。

1.3 其他檢測(cè)方法

此外，還有多種細(xì)菌學(xué)檢測(cè)方法可應(yīng)用于阪崎腸桿菌的檢測(cè)和分型，包括核糖體分型、質(zhì)粒指紋圖譜分析、限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）分析、抗生素抗性譜分析、毒素分析、血清學(xué)分型和噬菌體分型等[6]。有專家提議，采用分子微生物檢測(cè)技術(shù)對(duì)所分離的阪崎腸桿菌菌株進(jìn)行系統(tǒng)鑒定，以促進(jìn)阪崎腸桿菌流行病學(xué)調(diào)查工作發(fā)展。

2 營(yíng)養(yǎng)米粉中阪崎腸桿菌檢測(cè)的未來展望

當(dāng)前，我國食品中的阪崎腸桿菌檢測(cè)依然是運(yùn)用傳統(tǒng)方法，經(jīng)過我國技術(shù)科研人員的不斷努力，已經(jīng)大大縮短測(cè)試時(shí)間。而利用先進(jìn)的分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)，不僅可以幫助阪崎腸桿菌檢測(cè)環(huán)節(jié)的進(jìn)一步提速，而且對(duì)阪崎腸桿菌分型也十分有利。因此，我們要積極發(fā)展分子生物學(xué)技術(shù)，將之與傳統(tǒng)方法相結(jié)合，促進(jìn)阪崎腸桿菌檢測(cè)向更加快速、準(zhǔn)確的方向發(fā)展。

3 結(jié)語

營(yíng)養(yǎng)米粉生產(chǎn)中強(qiáng)化阪崎腸桿菌的防止固然非常重要，加強(qiáng)阪崎腸桿菌檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)化和精細(xì)化發(fā)展也是約束營(yíng)養(yǎng)米飯企業(yè)、保障食品安全的重要舉措。我們通過審視和梳理阪崎腸桿菌的檢測(cè)方法，了解了阪崎腸桿菌檢測(cè)的發(fā)展現(xiàn)狀，只有在現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)的基礎(chǔ)上進(jìn)行深化研究，才能幫助阪崎腸桿菌檢測(cè)技術(shù)走向更加精準(zhǔn)、成熟的未來。

[1]羅茂凰,張海英,張海濱,等.奶粉中坂崎腸桿菌檢測(cè)方法研究[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2005(11):69-71.

[2]朱永紅.奶粉中坂崎腸桿菌檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J].中國乳品工業(yè),2005(12):39-43.

[3]王羽,侯俊如,馬波,等.建立PCR檢測(cè)奶粉中坂崎腸桿菌的方法[A].2007中國農(nóng)業(yè)工程學(xué)會(huì)農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)暨中國中部地區(qū)農(nóng)產(chǎn)品加工產(chǎn)學(xué)研研討會(huì)論文集[C].中國農(nóng)業(yè)工程學(xué)會(huì)農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程分會(huì)、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院,2007.

[4]齊哲,于志彬,陳珊珊,等.PCR檢測(cè)奶粉中坂崎腸桿菌的模版制備的幾種方法[A].2007中國農(nóng)業(yè)工程學(xué)會(huì)農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)暨中國中部地區(qū)農(nóng)產(chǎn)品加工產(chǎn)學(xué)研研討會(huì)論文集[C].中國農(nóng)業(yè)工程學(xué)會(huì)農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程分會(huì)、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院,2007.

[5]關(guān)嶸,顧鳴.坂崎腸桿菌(E.sakazakii)的危害及其檢測(cè)方法[J].檢驗(yàn)檢疫學(xué)刊,2003(3):56-57.

[6]朱永紅,彭燕,孔樹全,等.乳粉中坂崎腸桿菌的快速檢驗(yàn)[J].中國乳品工業(yè),2006(9):57-59.