王婷

乙型肝炎病毒的ELISA與PCR檢測對比分析

王婷

目的分析乙型肝炎病毒的ELISA與PCR檢測結(jié)果的相關(guān)性。方法選取2015年1—12月本院接診的92例具有乙型肝炎臨床表現(xiàn)懷疑為乙型肝炎的患者作為研究對象，將其血清分別采取ELISA與PCR兩種方法檢測，將兩種檢測結(jié)果進行相關(guān)性分析。結(jié)果HBV-M模式2、模式6以及模式9檢測結(jié)果與HBV-DNA的檢測結(jié)果對比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；兩種檢測結(jié)果經(jīng)Spearman相關(guān)性分析具有正相關(guān)性（r=0.726，0＜r＜1，P＜0.05）。結(jié)論PCR檢測乙型肝炎側(cè)重于病毒傳染性，而ELISA法檢測檢出率更可明確具體類型，因此臨床診斷中應(yīng)將兩種方法聯(lián)合應(yīng)用。

乙型肝炎；ELISA；PCR

乙型肝炎簡稱乙肝，屬于我國最為常見的一種傳染性肝部疾病，嚴(yán)重的危害著患者的身體健康，同時因其具有較高的傳染性給患者與家人均造成極大的精神負擔(dān)[1-3]。臨床上對于乙肝的診斷標(biāo)準(zhǔn)主要通過檢測乙型肝炎病毒（HBV）的血清標(biāo)志物HBV-M的含量，HBV-M是反映機體對于HBV的免疫狀態(tài)。酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）是檢測HBV-M的主要方法，而HBV-M檢測結(jié)果能夠反映出HBV感染后人體免疫的相關(guān)信息。熒光定量（FQ-PCR）是檢測HBV-DNA的主要方法，而HBV-DNA是反映HBV傳染活性的主要指標(biāo)。本文將兩種檢測方法的檢測結(jié)果進行相關(guān)性對比分析，以期為乙型肝炎診斷提供更加準(zhǔn)確的診斷依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2015年1—12月本院接診的92例具有乙型肝炎臨床表現(xiàn)懷疑為乙型肝炎的患者作為研究對象，將其血清分別采取ELISA與PCR兩種方法檢測。受檢者中男61例，女31例；年齡為18～76歲，平均年齡為（58.71±12.69）歲。

1.2 方法

全部患者均采集清晨空腹靜脈血樣5 ml，分別以ELISA法檢測血樣中的HBV-M，以FQ-PCR檢測血樣中的HBV-DNA。ELISA法試劑購自科華生物公司，使用伯樂Model 680型酶標(biāo)檢測儀檢測。FQ-PCR法試劑盒購自科華生物公司，HBV-DNA≥103 copies/ml為陽性評估標(biāo)準(zhǔn)，使用應(yīng)用生物公司出品的AB-I7500型熒光定量分析儀。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

兩組數(shù)據(jù)按照SPSS格式錄入至SPSS Statistics-20.0軟件當(dāng)中，選擇菜單數(shù)據(jù)——加權(quán)個案，按秩次加權(quán)；選擇菜單分析——描述統(tǒng)計——交叉表——統(tǒng)計量選項中選擇χ2，由軟件完成數(shù)據(jù)運算；軟件計算結(jié)果觀察P值，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

HBV-M模式2、模式6以及模式9檢測結(jié)果與HBV-DNA的檢測結(jié)果對比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；兩種檢測結(jié)果經(jīng)Spearman相關(guān)性分析具有正相關(guān)性（r=0.726，0＜r＜1，P＜0.05）。詳細數(shù)據(jù)如下表1。

3 討論

乙肝病毒感染的診斷主要是檢測血清中的特異性抗體、抗原以及HBV-DNA的載量進行判斷。目前臨床上通常采用的乙肝病毒5項標(biāo)志物的檢測方法為ELISA法[4]。ELISA法具有檢測速度快、靈敏度高、穩(wěn)定性好以及成本經(jīng)濟等明顯優(yōu)勢；但無法及時、動態(tài)的表現(xiàn)出HBV在機體中的復(fù)制轉(zhuǎn)錄以及傳染活性。熒光定量PCR法檢測HBV-DNA載量，能夠直接準(zhǔn)確的反應(yīng)出HBV的轉(zhuǎn)錄復(fù)制情況以及傳染活性，對于治療方案的確定、療效評估以及預(yù)后評估等領(lǐng)域均具有無可或缺的價值。但HBV-DNA載量無法明確處于非復(fù)制狀態(tài)下的HBV感染情況，尤其是在HBV攜帶者的甄別診斷中無法獲得正確診斷數(shù)據(jù)。因此，臨床診斷中應(yīng)將兩種檢測方法聯(lián)合應(yīng)用。

本次研究結(jié)果表明，HBV-M模式1檢測結(jié)果與HBV-DNA檢測結(jié)果對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），說明HBV-M模式1時HBV-DNA的載量處于較高狀態(tài)，HBV的活性處于復(fù)制活性較高水平，具有高度的傳染性。這一點與文獻報道相符[5]。HBV-M模式2檢測結(jié)果與HBV-DNA的檢測結(jié)果對比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），HBV-DNA的陽性率偏低提示HBV-DNA載量較低，分析其原因主要與HBeAg的轉(zhuǎn)陰形成HBeAb密切相關(guān)，此時患者體內(nèi)的HBV明顯降低，但仍具有一定的傳染活性[6-7]。因此本研究認為，HBeAb并不能完全表明機體內(nèi)不存在著HBV的病毒復(fù)制轉(zhuǎn)錄，僅依靠HBV-M的檢測無法作出準(zhǔn)確判斷，應(yīng)結(jié)合HBV-DNA載量測定作出正確判斷。在模式3的檢測結(jié)果中HBVDNA的檢測與HBV-M并無差異，提示患者體內(nèi)存著一定強度的HBV復(fù)制轉(zhuǎn)錄活性。模式2、模式3之間相比，HBeAb的轉(zhuǎn)陰有可能與HBV出現(xiàn)前C區(qū)域基因的突變或者機體形成特異性的免疫耐受相關(guān)[8]。HBsAb能夠中和HBV的能力因此被公認為保護型抗體，然而模式4中依然可見少數(shù)HBV-DNA陽性檢出，提示HBsAb的陽性并不足以說明HBV不具有傳染活性，因此仍應(yīng)結(jié)合HBV-DNA的檢測結(jié)果對患者體內(nèi)的HBV狀態(tài)作出全面準(zhǔn)確的評估。在模式5中，HBeAb與HBcAb為陽性，少數(shù)患者的HBVDNA仍呈陽性結(jié)果，說明應(yīng)對這部分患者進行持續(xù)監(jiān)測，以及時發(fā)現(xiàn)HBsAb陽性，預(yù)防漏診的發(fā)生。在模式6至模式9中均未見HBV-DNA陽性的檢出。

綜上所述，HBV-M與HBV-DNA檢測結(jié)果間具有正相關(guān)性，兩者檢測的側(cè)重點不同。熒光定量PCR檢測HBV-DNA對于準(zhǔn)確判斷乙肝病毒的轉(zhuǎn)錄復(fù)制活性與狀態(tài)具有較高靈敏性，但無法表達出HBV非復(fù)制期的患者感染狀態(tài)。檢測對血清標(biāo)志物以ELISA法檢測可有效分析HBV的感染狀態(tài)、病情進展，并可對HBV-DNA陰性的患者病情作出正確評估。應(yīng)結(jié)合兩種檢測的結(jié)果方可對患者乙型肝炎病毒的真實感染狀態(tài)與傳染活性作出正確判斷以及早期明確診斷；同時兩種檢測方法的聯(lián)合應(yīng)用還能夠?qū)εR床治療方案的選擇、療效的評估以及預(yù)后分析等作出準(zhǔn)確指導(dǎo)。

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Comparative Analysis of ELISA and PCR Detection of Hepatitis B Virus

WANG Ting
Department of Medical Technology, Nanyang Medical College, Nanyang He’nan 473000, China

hepatitis B; ELISA; PCR

]ObjectiveTo analyzed the relationship between ELISA and the results of PCR detection of hepatitis B virus.MethodsFrom January to December 2015 in our hospital, 92 cases of patients with clinical of hepatitis B, suspected hepatitis B patients serum were taken ELISA and PCR two kinds of detection methods, two results were analyzed.ResultsHBV-M mode 2, mode 6 and mode 9 results were compared with HBV-DNA test results, the di ff erence was statistically signi fi cant (P ＜ 0.05); The correlation between two kinds of test results by Spearman correlation analysis (r=0.726, 0 ＜ r ＜ 1, P ＜0.05).ConclusionPCR detection of hepatitis B virus infection, so the clinical diagnosis should be combined with two methods.

南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校醫(yī)學(xué)技術(shù)系，河南 南陽 473000

R446.61

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1674-9308（2017）06-0041-03

10.3969/j.issn.1674-9308.2017.06.020

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