王國明

(昌樂縣畜牧獸醫(yī)局,山東昌樂 262400)

犬細小病毒單克隆抗體在治療犬細小病毒病上的應(yīng)用

王國明

(昌樂縣畜牧獸醫(yī)局,山東昌樂 262400)

犬細小病毒病是由犬細小病毒感染幼犬所引發(fā)的傳染性疾病，該疾病的癥狀表現(xiàn)主要為白細胞減少、出血性腸炎以及嘔吐等，具有傳染性強死亡率高以及發(fā)病率高等方面的特點，對經(jīng)濟型犬類養(yǎng)殖業(yè)產(chǎn)生嚴重影響。犬細小病毒單克隆抗體可以與犬細小病毒抗原相結(jié)合，促進犬細小病毒變性，改善該疾病的治療效果。本文從臨床癥狀、流行病學(xué)等角度對犬細小病毒單克隆杭體治療犬細小病毒病的作用原理進行了詳細的闡述。

臨床應(yīng)用 犬細小病毒病 單克隆抗體

犬細小病毒病通常出現(xiàn)于我國華東、東北等地區(qū)的犬類養(yǎng)殖領(lǐng)域，由于在該疾病的抗病毒藥物研制不足，相關(guān)的治療沒有根本性的突破。研究發(fā)現(xiàn)，犬細小病毒單克隆抗體可以中和犬細小病毒，提高免疫能力，達到預(yù)期的治療效果。

1 病原學(xué)

犬幼小病毒是一種單負股、無囊膜的NDA病毒，由VP1、VP2與VP3蛋白組成。該病毒也可以劃分為CPV1與CPV2兩種類型，其中CPV1型也可以被稱為犬微小病毒，能夠引發(fā)腸炎、心肌炎等疾病，能夠通過生育傳染給下一代，造成幼仔死亡。CPV2則類似于貓泛白細胞減少癥病毒。在經(jīng)歷長期的變異過程后，產(chǎn)生了CPV2b型等新的素株，傳染性更強。

2 流行病學(xué)

犬細小病毒普遍出現(xiàn)于90日齡以內(nèi)的幼犬，發(fā)病迅速，能夠短時間內(nèi)引發(fā)心肌炎病進而造成死亡。相對于土種犬來說，外來犬與純種犬發(fā)病率較高，多發(fā)于冬春季。

3 發(fā)病機理

患有犬細小病毒病的犬類在受到感染2日內(nèi)，病毒于口咽部復(fù)制，在體液循環(huán)作用下擴散至體內(nèi)其他器官，一周后產(chǎn)生毒血癥，造成全身性病毒感染。病毒主要攻擊心肌細胞與腸上皮細胞兩種細胞，犬與犬之間則通過口鼻傳播，病毒于胸腺、腸系淋巴結(jié)以及咽喉部不斷復(fù)制。病毒對腸隱窩胚上皮組織造成侵害，進而引發(fā)上皮組織萎陷，消解正常的細胞更新能力。病犬上皮細胞不斷壞死，固有膜得不到保護，進而造成腸腺上皮細胞出現(xiàn)壞死現(xiàn)象。心臟細胞則出現(xiàn)間質(zhì)水腫、局部斷裂、變細等問題，心肌毛細血管充血、擴張。淋巴結(jié)與脾臟中細胞數(shù)量大幅降低。各大臟器均會出現(xiàn)炎性細胞分潤、出血以及充血等癥狀。對于疾病癥狀十分嚴重的犬類，還可能會相繼出現(xiàn)淋巴細胞減少癥以及中性粒細胞減少癥等疾病。

4 臨床癥狀

犬類在感染犬細小病毒后，疾病內(nèi)在表現(xiàn)可以分為心肌炎型與腸炎型。對于腸炎型的犬類，會經(jīng)歷1～2周的潛伏期，病初表現(xiàn)為發(fā)熱嘔吐、精神沉郁等，嘔吐物呈現(xiàn)黃綠色、黏液狀。發(fā)病1日后產(chǎn)生腹瀉癥狀，糞便呈番茄醬色或咖啡色稀狀血便。隨著病情的發(fā)展，血便次數(shù)增加，腥臭氣味加重。血便后病犬會出現(xiàn)體重明顯減輕、鼻境干燥以及眼球下陷等方面的癥狀。對于嚴重病例，由于犬類腸內(nèi)腐敗引發(fā)彌散性凝血與內(nèi)毒素中毒，造成犬類死亡，白細胞數(shù)量大幅降低。對于心肌炎型的犬類，在癥狀表現(xiàn)上并不十分明顯，病患會出現(xiàn)呼吸困難，并在較短時間內(nèi)死亡，部分疾病會出現(xiàn)輕度腹瀉癥狀。

5 犬細小病毒病的單克隆抗體治療法

5.1 犬細小病毒單克隆抗體的制備

犬細小病毒單克隆抗體，是通過細胞融合技術(shù)，愈合SP2/9瘤細胞與BALB/c小鼠脾細胞，所制備出的雜交瘤細胞株中含有抗犬細小病毒單克隆抗體，再通過該抗體分離出雜交瘤細胞，并進行罐流培養(yǎng)，對培養(yǎng)物進行純化處理后得到特異性較強的抗體，即為犬細小病毒的單克隆抗體藥物。相比于高免血血清，單克隆抗體效價高、純度高、質(zhì)地均一并且可以投入規(guī)?；a(chǎn)。

5.2 作用機理

犬細小病毒單克隆抗體能夠通過血液與淋巴循環(huán)系統(tǒng)，能夠在較短時間內(nèi)到達患病的細胞與組織，抑制病毒的復(fù)制與侵染。該抗體能夠?qū)λ拗骷毎膹?fù)制與吸附過程進行抑制，進而起到病毒中和的作用，不同類型的該抗體可以利用不同的機制起到病毒中和的效果，同種類型的該抗體能夠補體存在的情況下起到中和效果，補體也可以在抗體-病毒復(fù)合物的作用下發(fā)揮作用。部分非中和活性的抗體會與其他種類的抗病毒物質(zhì)聯(lián)合起到形成保護機制，激活并喚醒細胞免疫系統(tǒng)。因此，犬細小病毒單克隆抗體作用一種典型的被動免疫制劑，也能夠與其他物質(zhì)一同起到激發(fā)犬類機體主動免疫的效果。

5.3 抗體使用的需要注意事項

第一，對于患病犬類，需要盡早使用抗體藥物，可以盡早起到降低機體組織破壞程度的效果；第二，單克隆抗體只具有相對較短的半衰期，藥物作用時間只能夠維持1～2周，抗體藥物的注射一方面要保證足量，另外，也要適當(dāng)提高注射的頻率，才能夠起到預(yù)期的治療效果。在單克隆抗體的使用量方面，則需要依照犬類的年齡與體征對使用量進行調(diào)整。對于較高的疾病預(yù)防需求，可以加倍提高抗體制劑的作用量。在注射劑量較大的情況下，可以取多個部位同時注射，飼養(yǎng)人員需要對注射部位進行揉壓處理，促進藥物分散；第三，對于過敏體質(zhì)比較嚴重的犬類，在使用該抗體藥物之前需要進行過敏性實驗，若在使用該藥物后發(fā)現(xiàn)存在過敏現(xiàn)象，則需要立即使用其他脫敏藥物。

另外，對于犬細小病毒病犬類，還可以選用克林霉素、恩氟沙星、慶大霉素、頭抱哇林等輔助治療藥物，鞏固治療效果。

6 結(jié)語

經(jīng)實驗研究發(fā)現(xiàn)，犬細小病毒單克隆抗體在效價、特異性以及純度等方面均有著較為明顯的優(yōu)勢，對于犬細小病毒病的治療與預(yù)防方面能夠在較短時間內(nèi)收到效果。另外，抗體治療還可以與其他種類的治療方式相配合，能夠進一步改善治療效果，提高治愈率，加快病犬痊愈速度。

[1] 文翼平，李英倫，文心田.犬細小病毒單克隆抗體對犬細小病毒病的臨床應(yīng)用研究[J].中國獸醫(yī)學(xué)報，2011，（11）：1564-1567.

[2] 楊振宇.犬細小病毒單克隆抗體的制備和初步應(yīng)用[D].揚州大學(xué)，2007.

[3] 高麗.犬細小病毒單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用[D].吉林大學(xué)，2009.