高倫明

(四川省攀枝花市中西醫(yī)結合醫(yī)院，四川 攀枝花 617000)

右美托咪定對食管癌患者圍術期Th17細胞功能的影響

高倫明

(四川省攀枝花市中西醫(yī)結合醫(yī)院，四川 攀枝花 617000)

目的 觀察右美托咪定對食管癌患者圍術期Th17細胞功能的影響。方法 將60例擬行食管癌根治術患者隨機分為觀察組和對照組各30例，2組術前30 min均給予東莨菪堿聯合度冷丁肌肉注射。觀察組誘導前靜脈泵入右美托咪定，對照組用同等體積的生理鹽水替代，2組均使用芬太尼3 μg/kg+維庫溴銨0.1 mg/kg+異丙酚2 mg/kg進行誘導，檢測2組術前(t0)、術畢(t1)、術后24 h(t2)、術后48 h(t3)的Th17細胞頻率、NK細胞活性及外周血IL-6、IL-8和IL-23水平。結果 2組手術輸液量、手術時間、術中出血量比較差異均無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。t0時2組Th17細胞表達率和NK細胞活性比較差異均無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)；t1時2組Th17細胞表達率均明顯高于t0時(P均<0.05)，且對照組上調的趨勢更為明顯(P<0.05)；t2時2組Th17細胞表達率繼續(xù)上調，其中對照組增加的幅度較觀察組明顯(P<0.05)；t3時2組Th17細胞表達率均明顯低于t2時(P均<0.05)，且觀察組Th17細胞表達率明顯低于對照組(P<0.05)。t1時2組NK細胞活性均明顯高于t0時(P均<0.05)，且觀察組明顯高于對照組(P<0.05)；t2時觀察組NK細胞活性雖然較t1時降低但仍高于t0時(P<0.05)，而對照組NK細胞活性與t0時比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；t3時2組NK細胞活性與t0時比較差異均無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。t1時2組IL-6、IL-8和IL-23水平均明顯高于t0時(P均<0.05)，但觀察組各指標水平均明顯低于對照組(P均<0.05)；t2時2組IL-6、IL-23水平及對照組IL-8水平仍持續(xù)升高(P均<0.05)，但觀察組各指標水平均明顯低于對照組(P均<0.05)，觀察組IL-8出現下降趨勢；t3時2組IL-6、IL-8和IL-23水平仍高于t0時(P均<0.05)，但觀察組上述指標水平均明顯低于對照組(P均<0.05)。結論 右美托咪定可能通過調節(jié)Th17細胞功能達到減輕食管癌患者圍術期的應激反應及免疫抑制的目的。

食管癌;Th17細胞;NK細胞;細胞因子;右美托咪定

外科手術是治療嚴重創(chuàng)傷的主要手段，但是外科手術會導致患者的防衛(wèi)機制發(fā)生缺陷，手術干擾使機體應激反應系統(tǒng)激活，炎癥遞質分泌水平上調，機體的分解代謝能力處于高水平狀態(tài)，負氮平衡、血糖代謝異常、肌肉分解加速，各類免疫因子被過度消耗，機體免疫力下降甚至受抑制，因此增加了患者術后感染和腫瘤復發(fā)的風險[1]。食管癌根治術創(chuàng)傷較大，機體的應激反應強烈，產生免疫抑制的可能性大，因此減輕患者術中應激反應及免疫抑制具有積極意義，而麻醉則是這一環(huán)節(jié)的重要組成部分。右美托咪定屬于一種α2-腎上腺素受體激動劑，因其具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、抑制交感神經活性等特性被廣泛使用。許忠玲等[2]對接受不同麻醉藥物的手術患者進行觀察后發(fā)現右美托咪定更能夠穩(wěn)定圍手術期的血流動力學，縮短住院時間。馮艷平等[3]也證實使用右美托咪定腫瘤患者術后復發(fā)的概率縮小。因此推測右美托咪定可能參與調節(jié)手術所致免疫系統(tǒng)的紊亂，減少由免疫應答導致的腫瘤逃逸等現象。CD4+T細胞是免疫反應以及炎癥性疾病的重要調節(jié)因子，遇到特異性抗原后，他們被激活并增殖分化為不同的效應T細胞亞群。 Th17細胞是近年發(fā)現的一種新的不同于Th1、Th2的CD4+T細胞亞群，其可調節(jié)自身免疫。筆者設想右美托咪定可能是通過調節(jié)圍手術期患者Th17細胞功能而達到影響患者免疫功能的目的，為了證實這一設想，本研究選擇了60例食管癌患者進行對照研究，現報道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選擇2011年1月—2013年3月在本院行食管癌根治術患者60例，其中男34例，女26例；年齡41～67(51±1.2)歲；體質量49～78(55±4.8)kg。排除合并嚴重心腦腎等重大臟器疾病者，合并嚴重內分泌、免疫缺陷性疾病者，長期服用鎮(zhèn)痛藥物者，拒絕簽署知情同意書者。將患者隨機分為對照組和觀察組各30例，2組年齡、性別、體質量、身高比較差異均無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)，見表1。本研究方案經過醫(yī)院倫理學委員會審查批準，所有受試對象均知情同意。

表1 2組一般情況比較

1.2 麻醉方法 2組術前30 min均給予東莨菪堿0.3 mg、度冷丁50 mg肌肉注射。麻醉誘導前，觀察組給予右美托咪定(國藥準字H20090248 )4 μg靜脈泵注射，時間大于10 min，隨后改為0.4 μg/(kg·h)持續(xù)泵入至關胸；對照組給予相同劑量的生理鹽水靜脈泵入。2組均使用芬太尼3 μg/kg+維庫溴銨0.1 mg/kg+異丙酚2 mg/kg進行麻醉誘導，在誘導結束后行雙腔氣管插管，使患者的呼氣末CO2分壓維持在35～45 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)。插管成功后2組均持續(xù)吸入七氟烷，持續(xù)靜脈泵注異丙酚、間斷靜脈注射芬太尼和維庫溴銨。手術全程監(jiān)測患者心電、呼吸、平均動脈壓血氧飽和度、呼氣末CO2分壓、呼氣末七氟烷濃度等指標。

1.3 觀察指標

1.3.1 Th17細胞表達率 取2組患者術前(t0)、術畢(t1)、術后24 h(t2)、術后48 h(t3)前臂(非輸液側)外周抗凝血各5 mL，用人淋巴細胞分離液提取外周血單核細胞(PBMC，1×109L-1)200 μL，置于含10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基中，加入刺激劑佛波醇乙酯(PMA)及離子霉素、莫能霉素等工作液并混勻，置于37 ℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4～6 h。用磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗，離心收集細胞，加人5 μL異硫氰酸熒光素標記的CD4(CD4-FITC)、5 μL藻紅蛋白標記的IL-17(IL-17A-APC)，操作按試劑盒說明書、采用流式細胞儀檢測Th17細胞表達率。

1.3.2 NK細胞活性及IL-6、IL-8和IL-23水平 用無肝素真空采血管采集2組患者t0、t1、t2、t3肘靜脈血5 mL，在4 ℃條件下3 000×g離心5 min后，使用高壓槍頭吸取離心后的上清液，應用全自動生化分析儀(日立7180型)、使用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測NK細胞活性及IL-6、IL-8和IL-23水平。嚴格按照說明書操作，試劑盒由廣州達安基因股份有限公司提供。

2 結 果

2.1 2組手術一般情況比較 2組手術輸液量、手術時間、術中出血量比較差異均無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。見表2。

表2 2組手術一般情況比較

2.2 2組不同時間點外周血Th17表達率比較t0時2組Th17細胞表達率比較差異無統(tǒng)計學意義 (P>0.05)；t1時2組Th17細胞表達率均明顯高于t0時(P均<0.05)，且對照組上調的趨勢更為明顯(P<0.05)；t2時2組Th17細胞表達率繼續(xù)上調，其中對照組增加的幅度較觀察組明顯(P<0.05)；t3時2組Th17細胞表達率均明顯低于t2時(P均<0.05)，且觀察組Th17細胞表達率明顯低于對照組(P<0.05)，與t0時比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 2組不同時間點外周血Th17表達率比較

注：①與t0時比較，P<0.05；②與t1時比較，P<0.05；③與t2時比較，P<0.05。

2.3 2組不同時間點NK細胞活性比較t0時2組NK細胞活性比較差異無統(tǒng)計學意義 (P>0.05)；t1時2組NK細胞活性均明顯高于t0時(P均<0.05)，且觀察組明顯高于對照組(P<0.05)；t2時觀察組NK細胞活性明顯低于t1時(P<0.05)，但仍高于t0時(P<0.05)，而對照組NK細胞活性與t0時比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；t3時2組NK細胞活性與t0時比較差異均無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。見表4。

2.4 2組不同時間點IL-6、IL-8和IL-23水平比較t0時2組IL-6、IL-8和IL-23水平比較差異均無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)；t1時2組IL-6、IL-8和IL-23水平均明顯高于t0時(P均<0.05)，但觀察組各指標水平均明顯低于對照組(P均<0.05)；t2時2組IL-6、IL-23水平及對照組IL-8水平仍持續(xù)升高(P均<0.05)，但觀察組各指標水平均明顯低于對照組(P均<0.05)，觀察組IL-8出現下降趨勢；t3時2組IL-6、IL-8和IL-23水平仍高于t0時(P均<0.05)，但觀察組上述指標水平均明顯低于對照組(P均<0.05)。見表5。

表4 2組不同時間點NK細胞活性比較

注：①與t0時比較，P<0.05；②與t1時比較，P<0.05。

表5 2組不同時間點IL-6、IL-8和IL-23水平比較

注：①與t0時比較，P<0.05；②與對照組比較，P<0.05。

3 討 論

右美托咪定被廣泛運用于臨床外科手術的鎮(zhèn)痛鎮(zhèn)靜，其發(fā)揮作用的途徑主要是介導中樞結構中藍斑核和脊髓后角突觸后膜位置的α2受體，抑制交感神經的興奮性。筆者通過查閱大量文獻后發(fā)現右美托咪定在0.5 μg/kg時即可以發(fā)揮理想的鎮(zhèn)靜效能，對機體由于手術產生的應激反應有很好地抑制作用，隨著劑量的增加，臨床效果并未隨之增加，反而出現了更明顯的不良反應，所以本研究誘導前使用0.5 μg/kg右美托咪定。

手術對機體而言屬于治療手段亦是一種創(chuàng)傷，嚴重影響患者的免疫系統(tǒng)，由外科手術導致的應激反應是機體神經內分泌系統(tǒng)發(fā)生變化的危險誘發(fā)因素[4]。而食管癌根治術是早、中期食管癌患者首選和最有效的治療方法，故如何減輕根治術導致的免疫抑制問題成為重要研究課題。Th17細胞可能是重要的自身免疫性和炎性疾病發(fā)病過程的主要調節(jié)者[5]。在IL-6和TGF-β介導下，幼稚的CD4+T細胞分化為Th17細胞，并產生其主要效應因子IL-17A[6-7]。IL-17是1995年發(fā)現的一類來源于T細胞的促炎細胞因子，其與受體結合后,可以作用于多種細胞來誘導產生細胞因子，包括TNF-α、IL-6、GM-CSF、IL-23，有促進炎癥發(fā)展、參與免疫應答等多種功能[8-9]。本研究結果顯示，術畢時2組Th17細胞及IL-6、IL-8、IL-23水平均較術前明顯升高，其中對照組升高更為明顯；術后24 h 2組 Th17細胞表達率仍是升高的，其中對照組明顯高于觀察組；術后48 h 2組Th17細胞表達率降低，其中觀察組恢復到術前水平；IL-6、IL-8和IL-23變化的趨勢大致和Th17相似，其中觀察組IL-8在術后24 h即明顯下降，而對照組IL-8在術后24 h仍持續(xù)升高。上述結果提示右美托咪定有明顯抑制Th17細胞活化和IL-6、IL-8、IL-23分泌的作用。

NK細胞屬于經典的殺傷細胞，其活性高低是衡量機體抵抗腫瘤生成及轉移的關鍵。本研究結果顯示，雖然2組術后48 h NK細胞活性比較差異無統(tǒng)計學意義，但術畢觀察組NK細胞活性明顯高于對照組，說明右美托咪定對機體產生了明顯的免疫保護作用。

綜上所述，外科手術確實對食管癌根治術患者的免疫功能產生不良影響，且這一變化可能與Th17細胞及其相關的細胞因子有關；右美托咪定可能通過調節(jié)Th17細胞功能達到減輕食管癌患者圍術期的應激反應及免疫抑制的目的，但還需增加樣本量，進一步明確其作用機制。

[1] 楊忠信，趙松.食管癌患者圍術期監(jiān)測血清CEA、CA125、CA199-9和βHCG的臨床意義[J].中國老年學雜志，2010，30(4)：466-468

[2] 許忠玲，徐興國，崔松勤.鹽酸右美托咪定對食管癌根治術患者圍術期血糖、β-內啡肽、TNF-α及IL-6表達的影響[J].第二軍醫(yī)大學學報，2010，31(12)：1330-1332

[3] 馮艷平，李廷坤，盧錫華，等.氟比洛芬酯對食管癌根治術后芬太尼病人自控靜脈鎮(zhèn)痛時細胞免疫功能的影響[J].臨床和實驗醫(yī)學，2009，7(9)：73-76

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Effect of dexmedetomidine on Th17 cell function in patients with esophageal carcinoma during the perioperative period

GAO Lunming

(Panzhihua Integrated Traditional Chinese and Western Medicine Hospital, Panzhihua 617000, Sichuan, China)

Objective It is to observe the influence of dexmedetomidine on Th17 cell function in patients with esophageal carcinoma in the perioperative period.Methods Sixty cases of patients with esophageal cancer undergoing radical resection were divided into observation group and control group with 30 cases in each group.All the patients were given intramuscular injection of scopolamine combined with dolantin in the two groups at preoperative 30 min.The patients were treated with intravenous infusion of dexmedetomidine in the observation group before induction and with the same volume of normal saline instead in the control group.The anesthesia were induced by 3 μg/kg fentanyl+0.1 mg/kg vecuronium+2 mg/kg propofol in the two groups.The frequency of Th17 cells, natural killer (NK) cell activity, and the levels of IL-8, IL-6, IL-23 were detected in the two groups before operation (t0), at the end of operation (t1), postoperative 24 h (t2) and Postoperative 48 h (t3).Results There was no significant difference between the two groups in the operative infusion volume, the time of operation, the amount of bleeding during the operation (allP>0.05).There was no significant difference in the expression rate of Th17 and NK cell activity between the two groups att0(allP>0.05); att1, the expression rate of Th17 cells in the two groups were significantly higher than that att0(allP<0.05), and the upward trend of the control group was more obvious (P<0.05); att2, the expression rate of Th17 cells in the two groups continued to increase, while the increase in the control group was significantly higher than that in the observation group (P<0.05); att3, the expression rate of Th17 cells in the two groups were significantly lower than that in the groups att2(allP<0.05), and the expression rate of Th17 cells in the observation group was significantly lower than that in the control group (P<0.05).Att1, the NK cell activity was significantly higher in the two groups was higher than that att0(allP<0.05), and the observation group was significantly higher than that of the control group (P<0.05); att2, the NK cell activity in the observation group was lower than that at t1 but higher than that att0(allP<0.05), while there was no significant difference in the control group compared witht0(P>0.05); Att3, there was no significant difference in the activity of NK cells compared witht0in the two groups (allP>0.05).Att1, the levels of IL-6, IL-8 and IL-23 in the two groups were significantly higher than those att0(allP<0.05), but all the indexes of the observation group were significantly lower than those of the control group (allP<0.05); att2, the levels of IL-6, IL-23 in the two groups and the level of IL-8 in the control group were still markedly increased (allP<0.05), but all the indexes in the observation group were significantly lower than those of the control group (allP<0.05), and the IL-8 level of the observation group showed a downward trend; att3, the IL-6, IL-8 and IL-23 levels of the two groups were still significantly higher thant0(allP<0.05), but the levels of the observation group were significantly lower than those of the control group (allP<0.05).Conclusion Dexmedetomidine may adjust the function of the Th17 cells to reduce perioperative stress response and immune suppression in the patients with esophageal carcinoma.

esophageal carcinoma; Th17 cells; natural killer cells; cytokines; dexmedetomidine

高倫明,男，主治醫(yī)師，主要從事臨床麻醉工作。

10.3969/j.issn.1008-8849.2016.36.009

R969.4

A

1008-8849(2016)36-4019-04

2016-03-20