湯施展，黃麗，陳中祥，白淑艷，張芳梅，吳松，覃東立，牟振波

(中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所，黑龍江 哈爾濱 150070)

柱前衍生化-氣相色譜法測(cè)定水產(chǎn)品中的游離甲醛

湯施展，黃麗，陳中祥，白淑艷，張芳梅，吳松，覃東立，牟振波*

(中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所，黑龍江 哈爾濱 150070)

應(yīng)用柱前衍生化-氣相色譜(GC)法檢測(cè)水產(chǎn)品中游離甲醛含量。野生鯉、鳙、鰱、草魚(yú)、鯽和烏蘇里白鮭等樣品經(jīng)超聲萃取、衍生化、正己烷提取，用HP-5毛細(xì)管色譜柱分離，電子捕獲檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，外標(biāo)法定量。結(jié)果表明，使用優(yōu)化改進(jìn)后的方法測(cè)定的游離甲醛含量在0.1～50 μg/L范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性擬合度r2= 0.999，線性良好；在2.0、5.0、10.0 μg/kg 3個(gè)水平下加標(biāo)回收率為83.80%～103.15%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于5.0%。方法檢出限為0.38 μg/kg，定量限為0.50 μg/kg。本研究調(diào)查了查干湖和黑龍江中的野生魚(yú)類中游離甲醛的本底含量為1.67 ～7.66 mg/kg，地區(qū)與種間差異不顯著(P>0.05)。優(yōu)化后的方法操作簡(jiǎn)便，分析靈敏度高，穩(wěn)定性好，可滿足水產(chǎn)品中微量游離甲醛的檢測(cè)需要，對(duì)開(kāi)展水產(chǎn)品中甲醛本底含量及安全限量的研究具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。[中國(guó)漁業(yè)質(zhì)量與標(biāo)準(zhǔn), 2016, 6(2):51-56]

水產(chǎn)品；游離甲醛；氣相色譜法；柱前衍生化；2,4-二硝基苯肼

甲醛別名蟻醛，35%～40%的甲醛水溶液俗稱福爾馬林。研究表明甲醛具有刺激作用、致敏作用、免疫毒性、神經(jīng)毒性、生殖毒性、遺傳毒性和致癌性等危害[1]。中國(guó)有毒化學(xué)品優(yōu)先控制名單上甲醛位居第二，國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)(IARC)將其確定為人類致癌物(Group1)和重要的環(huán)境污染物[2]。然而，由于甲醛是活潑的烷化劑，可以使蛋白質(zhì)變性，對(duì)寄生蟲(chóng)、藻類、真菌、細(xì)菌、芽孢和病毒均有較強(qiáng)的殺菌效果，因此在水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中被廣泛用于魚(yú)類和甲殼類的疾病防治。而且，甲醛具有漂白、防腐作用，能夠延長(zhǎng)食品保質(zhì)期，增加食品持水性和韌性，許多不法商販常在水產(chǎn)品或水發(fā)產(chǎn)品中違規(guī)添加甲醛，水產(chǎn)品中甲醛污染問(wèn)題已引起社會(huì)廣泛關(guān)注[3]。此外，甲醛作為一種內(nèi)源性的代謝中間產(chǎn)物在水產(chǎn)品中普遍存在，其本底含量因水產(chǎn)品的生物學(xué)類別而異，另有研究表明有些水產(chǎn)品經(jīng)冷凍保鮮后，由于氧化三甲胺酶的作用，甲醛含量會(huì)明顯升高[3-4]。因此針對(duì)種類繁多且基質(zhì)成分復(fù)雜的水產(chǎn)品，建立甲醛快速、靈敏的定性定量檢測(cè)方法顯得尤為重要。

水產(chǎn)品中甲醛主要以游離態(tài)、可逆結(jié)合態(tài)和不可逆結(jié)合態(tài)的形式存在，水浸法和蒸餾法提取可得到游離態(tài)和各種結(jié)合態(tài)的甲醛。結(jié)合態(tài)甲醛主要影響水產(chǎn)品的感官性狀，而游離態(tài)甲醛是危害消費(fèi)者身體健康的主要影響因子，因此有研究者建議測(cè)定食品中游離態(tài)的甲醛含量替代食品中總甲醛含量[4-5]。目前，國(guó)內(nèi)外報(bào)道的檢測(cè)甲醛的方法主要有分光光度法[6-9]、色譜法[10-13]、酶法[14]、熒光法[15]、電化學(xué)傳感器法[16]和極譜法[17]，其中只有熒光法涉及游離態(tài)甲醛含量檢測(cè)，其他均為總甲醛含量檢測(cè)，適用于水產(chǎn)品中甲醛檢測(cè)的方法主要有紫外法、液相法和氣相法。中國(guó)水產(chǎn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(SC/T 3025—2006)中規(guī)定的紫外法和液相法的檢出限分別為0.5和0.2 mg/kg。上述方法大都存在樣品前處理過(guò)程復(fù)雜、檢出限高、抗干擾能力差等不足。為解決上述問(wèn)題，本研究采用2,4-二硝基苯肼柱前衍生化-氣相色譜法檢測(cè)水產(chǎn)品中游離甲醛，并對(duì)游離甲醛的萃取和檢測(cè)條件進(jìn)行了優(yōu)化與探討，建立了準(zhǔn)確、高效、抗干擾性強(qiáng)的檢測(cè)水產(chǎn)品中游離甲醛的氣相色譜法，以期為水產(chǎn)品中甲醛安全限量的制定、游離甲醛含量的檢測(cè)及其代謝規(guī)律的研究提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.2.1 試劑

甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，質(zhì)量濃度為1 000 mg/L，由 AccuStandard公司生產(chǎn)；2, 4-二硝基苯肼(DNPH)，由上海安普科學(xué)儀器有限公司提供，純度(HPLC)≥98.0%。DNPH衍生化試劑配制：分別稱取0.010 0、0.050 0、0.100 0、0.200 0、0.250 0、0.300 0和0.500 0 g的2, 4-二硝基苯肼溶解于25 mL濃鹽酸中，用超純水定容到100 mL，配置成質(zhì)量濃度為100、500、1 000、2 000、2 500、3 000和5 000 mg/L的2, 4-二硝基苯肼溶液。正己烷(Merck公司)為農(nóng)殘級(jí)；實(shí)驗(yàn)用水為超純水電阻率為18.0 Ω。

1.1.2 儀器

7890 B氣相色譜儀(美國(guó)Agilent公司)配備電子捕獲檢測(cè)器(ECD檢測(cè)器)；電子天平(梅特勒-拖利多公司)；電子恒溫水浴鍋(天津市泰斯特儀器有限公司)；KQ-700E型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；超純水系統(tǒng)(Milli-Q公司)；高速離心機(jī)(美國(guó)熱電公司)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.2原理

甲醛在酸性條件下與2,4-二硝基苯肼反應(yīng)生成2,4-二硝基苯腙，經(jīng)正己烷萃取后用電子捕獲檢測(cè)器-氣相色譜儀檢測(cè)，間接測(cè)得水產(chǎn)品中游離甲醛含量。

1.2.3 儀器條件

色譜柱Aglient: HP-5 (5% Phenyl Methyl Siloxane)，30 m × 320 μm ×0.25 μm；進(jìn)樣口溫度為200 ℃；載氣為高純氮?dú)?；流速?.0 mL/min；尾吹流量為 60 mL/min；柱溫箱初始溫度為100 ℃，階升20 ℃/min至240 ℃；檢測(cè)器溫度為300 ℃；不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣量為 1 μL。

1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

準(zhǔn)確吸取一定量的甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用純水逐級(jí)稀釋，得到質(zhì)量濃度梯度為0.10、0.25、0.50、1.00、2.50、5.00、10.00、25.00、50.00 μg/L的甲醛工作曲線，然后加0.5 mL 1 000 mg/L 2,4-二硝基苯肼溶液，在60 ℃恒溫水浴鍋中反應(yīng)30 min，取出立即用流水冷卻，加10 mL正己烷萃取，取1.0 mL萃取液待測(cè)。同時(shí)用純水做空白。

1.2.5樣品測(cè)定

水產(chǎn)品取背部肌肉組織約200 g左右，置于高速勻漿機(jī)中勻漿，制成均勻的糜狀樣品，裝入潔凈的樣品袋內(nèi)，-20 ℃冰箱保存。測(cè)定前，樣品在4 ℃冰箱中解凍，準(zhǔn)確稱取1 g左右樣品，加10 mL純水，渦旋3 min，超聲20 min，5 000 r/min離心3 min，取5 mL上清液，依照1.2.3方法衍生化后，待測(cè)。

2 結(jié)果與討論

2.1 超聲波萃取時(shí)間的確定

甲醛沸點(diǎn)低，易溶于水。取同一質(zhì)量濃度0.1 mg/L甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液，在相同實(shí)驗(yàn)條件下分別超聲10、20、30、45、60和90 min，重復(fù)3次。檢測(cè)衍生物生成量的結(jié)果見(jiàn)圖1，萃取20 min時(shí)衍生物峰面積最大，說(shuō)明超聲萃取20 min游離甲醛的提取效果最佳。

圖1 超聲時(shí)間對(duì)衍生物生成量的影響Fig.1 The effects of ultrasonic time on the derivative production(n=3)

2.2 衍生化時(shí)間的選擇

在甲醛與2,4-二硝基苯肼溶液衍生化生成2,4-二硝基苯腙的反應(yīng)中，如果衍生化時(shí)間過(guò)短，衍生反應(yīng)不完全；而衍生化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)因甲醛揮發(fā)造成較大誤差。為了解衍生化時(shí)間對(duì)衍生物生成量的影響，本研究取同一濃度的一組甲醛溶液各5 mL，分別加入0.5 mL 1 000 mg/L 2,4-二硝基苯肼溶液，于60 ℃下水浴衍生化0、10、20、30、40、50、60、90和120 min。取出后在流水中快速冷卻，然后用10 mL正己烷分3次(3、3和4 mL)提取，渦旋3 min，5 000 r/min離心3 min，合并提取液，分別定容至10 mL，并取1 mL上機(jī)檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。樣品殘留液再用10 mL正己烷重復(fù)提取1次，用于樣品提取效率分析。結(jié)果如圖2所示，衍生化40 min時(shí)，衍生物生成量最大，隨后逐漸下降，表明40 min時(shí)衍生化反應(yīng)完全，隨著衍生化時(shí)間延長(zhǎng)衍生物生成量有損失。確定衍生化時(shí)間為40 min。從提取情況來(lái)看，經(jīng)過(guò)3次提取后，樣液中游離甲醛衍生物提取率達(dá)到96.67%～97.91%。

圖2衍生時(shí)間對(duì)衍生物生成量的影響Fig.2 The effects of derivatization time on the derivative production(n=3)

2.3 衍生化試劑濃度的選擇

衍生化試劑濃度對(duì)衍生物生成量的影響很大。由于衍生化試劑本身也出色譜峰，如果用量過(guò)大，不僅造成浪費(fèi)，而且會(huì)引起色譜柱過(guò)載，影響目標(biāo)峰分離與定量。衍生化試劑量過(guò)小，則會(huì)導(dǎo)致衍生化不完全。設(shè)計(jì)0.1、1.0和10 mg/L 3組濃度梯度的甲醛加標(biāo)樣，分別加入0.5 mL衍生化試劑，樣液中衍生化試劑質(zhì)量濃度分別為10、50、100、200、250、300和500 mg/L，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。衍生化后衍生物生成量結(jié)果見(jiàn)表1。

從表1可知，0.1和1.0 mg/L甲醛溶液在衍生化試劑質(zhì)量濃度為250 mg/L時(shí)，衍生物生成量趨于穩(wěn)定；10 mg/L甲醛溶液在衍生化試劑質(zhì)量濃度為200 mg/L時(shí)，衍生物生成量最大?？梢钥闯?，3個(gè)質(zhì)量濃度的甲醛溶液在衍生化試劑濃度低于250 mg/L時(shí)，衍生物峰面積隨著衍生化試劑質(zhì)量濃度的增加而遞增，衍生化試劑質(zhì)量濃度為250～500 mg/L時(shí)反應(yīng)趨于穩(wěn)定。為了衍生化完全，確定最佳衍生化試劑質(zhì)量濃度為300 mg/L。

表1 衍生化試劑質(zhì)量濃度對(duì)衍生物生成量的影響

Tab.1 The effects of derivatization reagent concentration on the derivative production

n=3

2.4 分離條件的確定

前期實(shí)驗(yàn)中，根據(jù)甲醛衍生物的特性，分別采用中等極性色譜柱DB-1701和非極性色譜柱HP-5進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以HP-5的分離效果最佳；在色譜分離條件優(yōu)化時(shí)，柱溫和載氣流速對(duì)目標(biāo)峰分離及檢測(cè)穩(wěn)定性影響很大。通過(guò)改變載氣流速實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，載氣流速為1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.9 mL/min時(shí)，相應(yīng)的出峰時(shí)間分別為8.78、7.74、7.21、6.87、6.62、6.30 min。為了提高檢測(cè)效率，在載氣流速為3.9 mL/min的基礎(chǔ)上，將升溫程序改為：初始溫度為120 ℃，保持0 min；以25 ℃/min升溫速率將溫度爬升至240 ℃，保持3 min；檢測(cè)器溫度為300 ℃，進(jìn)樣口溫度為200 ℃。目標(biāo)峰出峰時(shí)間縮短為4.55 min，總檢測(cè)時(shí)間為7.8 min，極大地提高了檢測(cè)效率。

2.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

按1.2.3配制的系列標(biāo)準(zhǔn)曲線，以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，測(cè)得回歸方程為Y=mX+b，其中，m=619.599 73，b=-220.829 12，線性相關(guān)系數(shù)r為0.999 69。線性范圍為0.1～50 μg/L。重復(fù)測(cè)定0.3 μg/L樣品7次，標(biāo)準(zhǔn)偏差S=0.006，參照美國(guó)環(huán)境保護(hù)局(EPA)推薦方法[18]，以取樣量1.00 g計(jì)，本方法對(duì)樣品的檢出限為0.38 μg/kg(以S/N>3計(jì))，定量限為0.50 μg/kg(以S/N>10計(jì))。為滿足實(shí)驗(yàn)需要，繪制3條標(biāo)準(zhǔn)曲線(表2)和10 μg/L甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液衍生物色譜圖(圖3)。

表2 不同濃度范圍甲醛標(biāo)準(zhǔn)曲線方程
Tab.2 Calibration curves of formaldehyde in different concentration range

圖3 甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液衍生物色譜圖Fig.3 Chromatogram of standard formaldehyde derivatization

2.4.2 方法準(zhǔn)確度和精密度

加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)中，選取查干湖鳙作為空白加標(biāo)樣品，分別加入質(zhì)量濃度為2.0、5.0、10.0 μg/mL的甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液各1.0 mL，按照1.2.3方法步驟1 d內(nèi)測(cè)定3次，每樣平行測(cè)定6次，計(jì)算日內(nèi)精密度，1周連續(xù)測(cè)定3次，每樣平行測(cè)定6次，計(jì)算日間精密度，得到數(shù)據(jù)見(jiàn)表3?？傮w加標(biāo)回收率為83.80%～103.15%，日內(nèi)和日間精密度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均小于5.0%，表明該方法測(cè)定的精密度高，穩(wěn)定性好，適用于水產(chǎn)品中微量游離甲醛的快速測(cè)定。

表3 鳙甲醛加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

Tab.3 The recoveries and relative standard deviation of spiked formaldehyde inAristichthysnobilis

n=6

表4 野生魚(yú)類甲醛本底含量

n=3

2.5 樣品檢測(cè)

本研究對(duì)查干湖和黑龍江野生魚(yú)類肌肉中游離甲醛含量進(jìn)行測(cè)定，樣品前處理采用優(yōu)化后的方法，以1.0 mL/min流量模式進(jìn)行上機(jī)檢測(cè)，為保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性，每個(gè)樣品平行測(cè)定3次，同時(shí)進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，樣品加標(biāo)回收率為90.50%，樣品檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表4?？梢钥闯觯?種被檢測(cè)的淡水魚(yú)甲醛含量在1.67 mg/kg(查干湖草魚(yú))至7.66 mg/kg(黑龍江烏蘇里白鮭)之間，地區(qū)與種間差異不顯著(P>0.05)。從檢測(cè)結(jié)果來(lái)看，常見(jiàn)野生淡水魚(yú)類自身含有一定量的甲醛。劉淑玲[19]采用乙酰丙酮分光光度法檢測(cè)中國(guó)淡水魚(yú)類的甲醛含量范圍為0.25～2.96 mg/kg，中位值為0.25 mg/kg，低于本研究結(jié)果。分析其原因，一方面可能是由于活魚(yú)甲醛含量低于冰鮮樣品，冷凍樣品隨時(shí)間延長(zhǎng)甲醛含量上升[4]；另一方面也可能由于其采用乙酰丙酮分光光度法檢測(cè)的檢出限為0.50 mg/kg，低于檢出限的樣品均按0.25 mg/kg計(jì)算[19]，導(dǎo)致所檢測(cè)樣品含量整體偏低。

另外，同一批次樣品的甲醛衍生液在-20℃冷凍保存15 d后重新測(cè)定樣品，發(fā)現(xiàn)其含量相差不大，表明該衍生物在此條件下保存比較穩(wěn)定。本研究同時(shí)采用常規(guī)蒸餾法測(cè)定了查干湖鳙魚(yú)肌肉中總甲醛含量，對(duì)比發(fā)現(xiàn)，游離甲醛占總甲醛的40%左右，這與Tai等[5]的研究結(jié)果相近。

3 結(jié)論

與SC/T 3025—2006《水產(chǎn)品中甲醛的檢測(cè)》[6]方法相比，本研究在前處理上采用超聲提取法縮短了提取時(shí)間，克服了蒸餾操作費(fèi)時(shí)費(fèi)力的缺點(diǎn)，通過(guò)HP-5毛細(xì)管色譜柱分離電子捕獲檢測(cè)器檢測(cè)，提高了檢測(cè)靈敏度，柱前衍生化法降低了樣品基質(zhì)干擾。本方法具有檢出限低、穩(wěn)定性強(qiáng)、回收率高、出峰時(shí)間穩(wěn)定、信號(hào)響應(yīng)值高和操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，為水產(chǎn)品中甲醛殘留及內(nèi)、外源甲醛來(lái)源的研究提供技術(shù)支持。另外，本研究檢測(cè)了黑龍江和查干湖野生水產(chǎn)品中游離甲醛的本底含量為1.67～7.66 mg/kg，為水產(chǎn)品中甲醛標(biāo)準(zhǔn)限量的制定提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。而關(guān)于水產(chǎn)品中體內(nèi)和體外甲醛的研究工作，有待于下一步開(kāi)展。

[1] 權(quán)可艷, 李正軍. 常用魚(yú)藥使用手冊(cè) [M]. 成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社, 2011: 61-63.

[2] IARS/WHO. Classifies Formaldehyde As Carcinogenic to Humans [R]. Geneva:World Health Organization, 2004.

[3] 覃梅, 楊健. 水產(chǎn)品中甲醛含量的檢測(cè)研究 [J]. 化學(xué)工程與裝備, 2013(4): 166-169.

[4] 謝雯雯， 熊善柏.水產(chǎn)品中甲醛的殘留及控制[J].農(nóng)產(chǎn)品加工·創(chuàng)新版，2013(1)：20-23.

[5] Tai S Y, Tzu C L, Ching C C, et al. Analysis of free and bound formaldehyde in squid and squid products by gas chromatography-mass spectrometry [J]. J Food Drug, 2013(21): 190-197.

[6] 周德慶,馬敬軍,李曉川. SC/T 3025—2006 水產(chǎn)品中甲醛的檢測(cè) [S]. 北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2006: 1-6.

[7] Bunkoed O, Davis F, Kanatharanaa P, et al. Sol-gel based sensor for selective formaldehyde determination [J]. Anal Chim Acta, 2010, 659: 251-257.

[8] Teshima N, Fernández S K M, Ueda M, et al.Flow injection spectrophotometric determination of formaldehyde based on its condensation with hydroxylamine and subsequent redox reaction with iron(III)-ferrozine complex [J]. Talanta, 2011, 84:1205-1208.

[9] Afkhami A, Bagheri H. Preconcentration of trace amounts of formaldehyde from water, biological and food samples using an efficient nanosized solid phase, and its determination by a novel kinetic method [J]. Microchim Acta, 2012, 176(1/2):217-227.

[10] Wang H, Ding J, Du X, et al.Determination of formaldehyde in fruit juice based on magnetic strong cation-exchange resin modified with 2,4-dinitrophenylhydrazine [J]. Food Chem, 2012, 131(1):380-385.

[11] Xu X, Su R, Zhao X, et al. Determination of formaldehyde in beverages using microwave-assisted derivatization and ionic liquid-based dispersive liquid-liquid microextraction followed by high-performance liquid chromatography [J]. Talanta, 2011, 85(5):2632-2638.

[12] Nageswari A, Krishna Reddy K V S R , Mukkanti K. Low-level quantitation of formaldehyde in drug substance by HPLC-UV[J]. Chromatographia, 2012, 75(5/6):275-280.

[13] Shin H, Lim H. Simple determination of formaldehyde in fermented foods by HS-SPME-GC/MS[J]. Int J Food Sci Tech, 2011, 47(2):350-356.

[14] Vladimir S, Olha D, Halyna K. Alcohol oxidase- and formaldehyde dehydrogenase-based enzymatic methods for formaldehyde assay in fish food products[J].Food Chem, 2011, 127(2):774-779.

[15] Sáenz M, Alvarado J, Pena-Pereira F, et al. Liquid-phase microextraction with in-drop derivatization combined with microvolume fluorospectrometry for free and hydrolyzed formaldehyde determination in textile samples[J]. Anal Chim Acta, 2011, 687:50-55.

[16] Marzuki N I, Bakar F A, Salleh A B, et al. Development of electrochemical biosensor for formaldehyde determination based on immobilized enzyme[J]. Int J Electrochem Sci, 2012, 7(7):6070-6083.

[17] 戴紅, 吳頡, 朱正鑫, 等. 伏安極譜法測(cè)定兔毛皮中可萃取甲醛含量的研究[J]. 皮革科學(xué)與工程, 2014 (6):63-67.

[18] Childress C J O, Foreman W T, Connor B F, et al. Newreporting procedures based on long-term method detection levels and some considerations for interpretations of water-quality data provided by the U.S. geological survey national water quality laboratory [M]. Reston,Virginia:Bibliogov,1999:19.

[19] 劉淑玲. 水產(chǎn)品中甲醛的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與限量標(biāo)準(zhǔn)研究[D]. 青島：中國(guó)海洋大學(xué), 2009.

Quantification of free-formaldehyde in aquatic products by gaschromatography coupled with pro-column derivatization

TANG Shizhan,HUANG Li, CHEN Zhongxiang, BAI Shuyan, ZHANG Fangmei, WU Song, MOU Zhenbo*

(Heilongjiang River Fishery Research Institute Chinese Academy of Fishery Sciences, Harbin 150070, China)

In this study, the gas chromatography (GC) coupled with pro-column derivatization method was employed to determine free-formaldehyde in aquatic products. Samples ofCyprinuscarpio,Aristichthysnobilis,Hypophthalmichthysmolitrix,Ctenopharyngodonidellus,CarassiusauratusandCoregonusussuriensiswere subjected to ultrasonic extraction, derivatization, n-hexane extraction, and then purified by HP-5 chromatographic column and determined by external standard method with electron capture detector (ECD). The results showed that the optimized method had a good linearity (r2=0.999) when the measured free-formaldehyde was 0.1-50 μg/L, and the limit of detection was 0.38 μg/kg with the relative standard deviations no more than 5.0%. The recoveries of formaldehyde among three different levels (2.0, 5.0, 10.0 μg/kg, respectively) were in the range of 83.80%～103.15%. The baseline of free-formaldehyde in wild fish species from the Chagan Lake and Heilongjiang River were investigated, which ranged from 1.67 - 7.66 mg/kg and without significant differences in regions and species (P> 0.05). The optimized analytical method was rapid and accurate, and suitable for the determination of free-formaldehyde in aquatic products．[Chinese Fishery Quality and Standards, 2016, 6(2):51-56]

aquatic products; free-formaldehyde; gas chromatography; pro-column derivatization; 2, 4 - dinitrophenyl hydrazine

MOU Zhenbo, mouzb1962@163.com

2015-09-08；接收日期：2015-12-21

水產(chǎn)品中未知危害因子識(shí)別與已知危害因子跟蹤評(píng)估(GJFP201501001)

湯施展(1987-)，男，學(xué)士，研習(xí)員，研究方向?yàn)樗a(chǎn)品質(zhì)量與安全，tsz2007@163.com

牟振波，研究員，研究方向?yàn)樗a(chǎn)養(yǎng)殖，mouzb1962@163.com

S94

：A

：2095-1833(2016)02-0051-06