李彩霞 王君 田應(yīng)選

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多腫瘤標(biāo)志物表達水平與老年非小細胞肺癌分子診斷和分期研究

李彩霞 王君 田應(yīng)選

非小細胞肺癌(NSCLC)是肺癌的主要類型,其早期診斷困難,臨床療效及預(yù)后差。按照通用的國際腫瘤TNM分期方法,合理有效地進行NSCLC的臨床分期是治療的重要環(huán)節(jié)[1]。目前廣為應(yīng)用的分期方法主要根據(jù)胸部影像學(xué)(CT、PET/CT等)及某些有創(chuàng)檢查(氣管鏡及活檢、縱隔鏡等)來進行,這些檢查多存在費用昂貴,操作復(fù)雜,患者痛苦大等不利因素。隨著對NSCLC分子生物學(xué)的深入研究,采用腫瘤分子標(biāo)志物進行診斷和分子分期是近年肺癌研究的重要議題[2]。本研究篩選了經(jīng)病理學(xué)確診的NSCLC患者血清腫瘤標(biāo)志物,觀察標(biāo)志物的血清表達水平與原發(fā)腫瘤病灶大小、局部浸潤及遠處轉(zhuǎn)移的關(guān)系,以期尋找簡便有效的診斷方法。

1 資料與方法

1.1 一般資料 篩選陜西省吳起縣中醫(yī)院及陜西省人民醫(yī)院自2008年1月至2014年12月,住院經(jīng)病理學(xué)確診的NSCLC患者46例。其中男29例,女17例;年齡60～81歲,中位年齡67歲。既往患有慢性肺部疾病9例,其中慢性阻塞性肺疾病4例,肺感染性疾病6例,肺結(jié)核病1例。所有確診患者的臨床病理類型為:鱗狀細胞癌27例,腺癌16例,肺泡細胞癌2例,腺癌和鱗癌混合癌1例。吸煙指數(shù)>400支/年21例。

1.1.1 入選標(biāo)準及臨床分期:按照NCCN指南中NSCLC臨床診斷流程,根據(jù)其胸部CT等影像學(xué)檢查結(jié)果行纖維支氣管鏡、ECT全身骨掃描、頭顱CT、腹部B超(肝膽系及腎上腺)等檢查,判斷原發(fā)病灶大小、浸潤范圍及遠處轉(zhuǎn)移病灶狀態(tài)。經(jīng)手術(shù)治療的早期患者依照手術(shù)后病理結(jié)果為準。其中9例患者行PET/CT檢查進行臨床分期。根據(jù)組織(解剖學(xué))分期(AJCC,2010年第7版標(biāo)準)進行患者臨床分組:ⅠA期1例,ⅠB期4例,ⅡA期7例,ⅡB期6例,ⅢA期4例,ⅢB期11例,Ⅳ期13例。分化程度:高分化11例,中分化20例,低分化15例。

1.2 采集患者空腹靜脈血3～5 ml,不加抗凝劑,-4 ℃,3000 r/min低溫離心后,分裝血清,置-80 ℃保存。癌胚抗原(CEA)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)檢測方法采用C-12腫瘤標(biāo)志物蛋白質(zhì)固體芯片,檢測技術(shù)流程嚴格按照上海數(shù)康生物科技有限公司C-12檢測系統(tǒng)實驗方法進行。組織多肽抗原(TPA)采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測。診斷參考界值:NSE:0～13 ng/ml;CEA:0～5 ng/ml;TPA:0～120 U/L。分別比較NSE、TPA、CEA的各檢測值在高中分化與低分化組之間、臨床早期(ⅠA+ⅠB+ⅡA+ⅡB+ⅢA期)與晚期(ⅢB+Ⅳ期)之間表達差異及不同標(biāo)志物組合(CEA+NSE、TPA+CEA、TPA+NSE、CEA+TPA+NSE)對臨床早期及晚期NSCLC患者的鑒別診斷價值。

2 結(jié)果

2.1 高中分化及低分化組之間腫瘤標(biāo)志物表達水平比較CEA及TPA在不同分化組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);NSE在2組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。見表1。

表1 各腫瘤標(biāo)志物在不同分化的NSCLC組間表達差異比較

2.2 不同TNM分期患者腫瘤標(biāo)志物表達水平比較 按TNM分期分為早期組(ⅠA+ⅠB+ⅡA+ⅡB+ⅢA期)及晚期組(ⅢB+Ⅳ期)，2組比較,CEA及TPA水平差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。NSE在2組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。見表2。

表2 各腫瘤標(biāo)志物在不同臨床分期的NSCLC組間表達差異比較

表3 標(biāo)志物聯(lián)合檢測在不同臨床分期的NSCLC組間診斷價值比較

3 討論

腫瘤標(biāo)志物是肺癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌、肝癌等多種實體瘤的重要輔助診斷方法[3-4]。尤其是在老年患者中,因患者年齡因素,體能狀況一般較差,不能有效耐受有創(chuàng)檢查,采用腫瘤標(biāo)志物及相關(guān)無創(chuàng)檢查診斷和臨床分期是重要的策略和方法。相關(guān)研究表明CEA、NSE、TPA等多種血清腫瘤標(biāo)志物可在NSCLC患者血清中升高,并且隨著腫瘤病程的進展有升高趨勢。Okamura等[5]研究發(fā)現(xiàn)，CEA等腫瘤標(biāo)志物可以在肺癌等實體瘤的診斷中發(fā)揮作用,尤其是多個指標(biāo)的聯(lián)合檢測與腫瘤的分期及分型相關(guān),具有病理分型價值。另外,聯(lián)合多個血清腫瘤標(biāo)志物建立的組合模型,也對NSCLC的診斷及預(yù)后具有價值[6]。本研究中使用的腫瘤蛋白質(zhì)芯片集合了多種腫瘤蛋白標(biāo)志物,能夠?qū)Ψ伟⑷橄侔?、胰腺癌、結(jié)腸直腸癌、前列腺癌、神經(jīng)母細胞瘤、睪丸癌、卵巢癌等多種實體腫瘤進行輔助診斷。本研究中CEA及TPA在高中分化組和低分化組之間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。腫瘤病理學(xué)研究表明,癌細胞的分化程度與腫瘤的惡性度呈負相關(guān),分化程度越低則其腫瘤細胞代謝越活躍,理論上分泌相關(guān)腫瘤代謝產(chǎn)物會增多,患者預(yù)后越差[7]。早期NSCLC與晚期NSCLC的臨床發(fā)展過程存在明顯差異,患者的總生存時間不同。多個腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測往往比單一標(biāo)志物的檢測具有更高的臨床可靠性,現(xiàn)在多傾向進行標(biāo)志物的聯(lián)合檢測[8]。本研究結(jié)果顯示,CEA+TPA的陽性表達對NSCLC的診斷靈敏度和特異度具有較高的臨床應(yīng)用價值。

總之,尋找高效、靈敏的腫瘤標(biāo)志物是NSCLC無創(chuàng)或微創(chuàng)診斷和預(yù)后的重要途徑,隨著對NSCLC生物行為學(xué)研究逐步深入及分子生物技術(shù)的快速發(fā)展,必然會有更多的有臨床價值的靶標(biāo)應(yīng)用于臨床,為老年NSCLC的診療帶來希望。

[1] 周彩存.肺癌分子診斷及分子預(yù)測的研究現(xiàn)狀[J].中國肺癌雜志,2008,11(1):21-24.

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陜西省中醫(yī)藥管理局科研項目資助(13-JC027)

717600陜西省延安市，吳起縣人民醫(yī)院感染性疾病科(李彩霞)；710068陜西省西安市，陜西省人民醫(yī)院老年呼吸科(王君，田應(yīng)選)

田應(yīng)選， Email：tian-tyx@163.com

R 734.2

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10.3969/j.issn.1003-9198.2016.11.024

2015-12-14)