盧起飛，張展飛，王小花，楊正益，周穎

(1畢節(jié)市第一人民醫(yī)院，貴州畢節(jié)551700；2北京大學(xué)第三醫(yī)院；3西京消化病醫(yī)院)

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胃癌患者血清DKK-1水平變化及意義

盧起飛1，張展飛2，王小花3，楊正益1，周穎1

(1畢節(jié)市第一人民醫(yī)院，貴州畢節(jié)551700；2北京大學(xué)第三醫(yī)院；3西京消化病醫(yī)院)

目的 觀察胃癌患者血清Dickkopf-1(DKK-1)水平變化，并探討其臨床意義。方法 分別采用ELISA法和化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)132例胃癌患者(胃癌組)、121例慢性胃炎患者(胃炎組)及74例體檢健康者(健康組)血清DKK-1、CEA，分析血清DKK-1水平與胃癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系，采用ROC曲線分析血清DKK-1、CEA診斷胃癌的價(jià)值。結(jié)果 胃癌組血清DKK-1水平為(6.54±1.82)ng/mL，明顯高于胃炎組[(3.71±1.21)ng/mL]及健康組[(3.12±0.69)ng/mL](P均<0.05)。胃癌患者血清DKK-1水平與腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肝臟轉(zhuǎn)移及TNM分期有關(guān)(P均<0.05)，與組織分化程度、浸潤程度、微血管轉(zhuǎn)移無關(guān)(P均>0.05)。血清DKK-1診斷胃癌的敏感性、特異性均高于血清CEA(P均<0.05)。結(jié)論 胃癌患者血清DKK-1水平明顯升高，其水平變化與腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肝臟轉(zhuǎn)移及TNM分期有關(guān)；血清DDK-1可作為胃癌診斷的血清腫瘤標(biāo)志物之一。

胃癌；Dickkopf-1；癌胚抗原；臨床病理參數(shù)

胃癌的發(fā)生、發(fā)展是多基因參與、多階段漸進(jìn)性累積的演變過程[1]。有研究發(fā)現(xiàn)，Wnt信號(hào)通路異常激活可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移及血管生成，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中具有重要作用[2，3]。Dickkopf-1(DKK-1)是Wnt信號(hào)通路的抑制因子，通過與低密度脂蛋白相關(guān)蛋白5/6(LRP 5/6)的輔助受體結(jié)合，抑制Wnt信號(hào)通路。臨床研究發(fā)現(xiàn)，食管癌、肝癌、肺癌患者血清DKK-1水平明顯升高，且與患者預(yù)后密切相關(guān)。本研究觀察胃癌患者血清DKK-1水平變化，分析其與患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系，并探討其作為血清腫瘤標(biāo)志物診斷胃癌的價(jià)值。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2013年1月～2015年12月畢節(jié)市第一人民醫(yī)院收治的胃癌患者132例(胃癌組)，男73例、女59例，年齡37～74(56.74±6.37)歲；腫瘤直徑：>4 cm者62例，≤4 cm者70例；浸潤深度：T1、265例，T3、467例；組織分化程度：低、中分化者78例，高分化者54例；TNM分期(根據(jù)2010年國際抗癌聯(lián)盟標(biāo)準(zhǔn))：Ⅰ期27例、Ⅱ期41例、Ⅲ期43例、Ⅳ期21例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者45例，出現(xiàn)肝臟轉(zhuǎn)移者19例、微血管轉(zhuǎn)移者31例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均經(jīng)術(shù)后組織病理檢查明確診斷，且影像學(xué)檢查未發(fā)現(xiàn)其他部位原發(fā)性腫瘤；②患者為初診，未接受放、化療及其他抗癌治療；③臨床病理資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①圍術(shù)期死亡者；②合并其他原發(fā)性腫瘤者；③合并心、肝、腎等重要臟器疾病者；④患者及家屬不同意手術(shù)治療及參與研究者[4，5]。選擇該院同期收治的慢性胃炎患者121例(胃炎組)，男67例、女54例，年齡34～71(56.42±6.31)歲；另選在該院體檢的健康者74例(健康組)，男41例、女33例，年齡34～72(56.68±6.35)歲。三組性別、年齡具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者均知情同意。

1.2 血清DKK-1、CEA檢測(cè) 胃癌組入院次日、胃炎組就診日、健康組體檢日，采集空腹靜脈血5 mL，置于干燥抗凝管中，3 000 r/min離心10 min，取上層血清，-80 ℃冰箱凍存。采用CODA酶標(biāo)儀、ELISA法檢測(cè)血清DKK-1；采用ELecsys2010全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光儀及配套試劑檢測(cè)血清CEA[6，7]。

2 結(jié)果

2.1 各組血清DKK-1、CEA水平比較 見表1。

表1 各組血清DKK-1、CEA水平比較

注：與健康組比較，*P<0.05；與胃炎組比較，#P<0.05。

2.2 血清DKK-1水平與胃癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系 見表2。

2.3 血清DKK-1、 CEA 對(duì)胃癌的診斷價(jià)值 ROC 曲線結(jié)果顯示， 血清 DKK-1 的 ROC 曲線下面積為

表2 血清DKK-1水平與胃癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系±s)

0.904(95%CI為0.845～0.937)，取cut-off值為3.92 ng/mL時(shí)，其診斷胃癌的敏感性為80.69%、特異性為92.76%；血清CEA的ROC曲線下面積為0.812(95%CI為0.721～0.828)，取cut-off 值為4.74 ng/mL時(shí)，其診斷胃癌的敏感性為72.57%、特異性為81.27%。血清DKK-1診斷胃癌的敏感性、特異性均高于血清CEA(P均<0.05)。見圖1。

圖1 血清DKK-1、CEA診斷胃癌的ROC曲線

3 討論

胃癌早期無明顯癥狀，易與一般胃部疾病混淆，延誤診治。目前臨床上胃癌的診斷方法主要包括影像學(xué)及血清腫瘤標(biāo)志物檢查[8]。CEA是胎兒胃腸上皮組織、胰臟及肝臟細(xì)胞合成的酸性糖蛋白，在成人的胰腺、腸道、卵巢等有少量表達(dá)，是目前胃癌、腸癌、乳腺癌等多種腫瘤診斷和預(yù)后評(píng)估常用的標(biāo)記物。 DKK-1屬于Dickkopfs的家族成員之一，由1個(gè)信號(hào)肽序列和2個(gè)富含半胱氨酸的區(qū)域組成，其基因定位于10號(hào)染色體10q11上[9]。DKK-1對(duì)Wnt信號(hào)通路具有抑制作用，被認(rèn)為是調(diào)節(jié)微環(huán)境的關(guān)鍵因子。DKK-1可與Wnt受體LRP 5/6結(jié)合，導(dǎo)致特異性受體卷曲，無法與Wnt受體結(jié)合形成三聚體復(fù)合物，從而阻斷Wnt信號(hào)通路[10，11]。同時(shí)，DKK-1通過與相應(yīng)受體結(jié)合，參與細(xì)胞增殖、分化、凋亡和遷移，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中具有重要作用[12]。Makino等[13]研究發(fā)現(xiàn)，食管鱗狀細(xì)胞癌患者血清DKK-1水平明顯高于體檢健康者，且其水平與食管鱗癌的浸潤、轉(zhuǎn)移有關(guān)。Zhou等[14]研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者血清DKK-1水平與腫瘤組織分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期密切相關(guān)。此外，在肝癌、肺癌、卵巢癌等腫瘤組織和患者血清中均發(fā)現(xiàn)DKK-1表達(dá)升高[15]。有研究發(fā)現(xiàn)，胃癌患者血清DKK-1水平明顯高于體檢健康者，并認(rèn)為血清DKK-1可作為胃癌診斷的血清腫瘤標(biāo)志物之一[16～18]。目前國內(nèi)關(guān)于胃癌患者血清DKK-1水平變化的研究較少，其能否作為胃癌的腫瘤標(biāo)志物亦無相關(guān)研究。本研究結(jié)果顯示，胃癌組血清DKK-1水平明顯高于胃炎組及健康組；血清DKK-1水平與胃癌患者腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肝臟轉(zhuǎn)移及TNM分期密切相關(guān)，表明血清DKK-1對(duì)胃癌的病情評(píng)估和惡性程度判斷具有一定臨床價(jià)值。ROR曲線分析顯示，血清DKK-1診斷胃癌的敏感性和特異性均高于CEA。說明血清DDK-1可作為胃癌診斷的血清腫瘤標(biāo)志物之一。

總之，血清DKK-1水平對(duì)胃癌診斷、病情評(píng)估和惡性程度判斷具有較好的參考價(jià)值。

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2016-06-12)