亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        氫生理鹽水對對乙酰氨基酚致小鼠急性肝損傷的保護作用

        2016-08-01 08:42:07王德仙沈偉峰栗玉龍楊誠楊甲梅
        肝膽胰外科雜志 2016年4期
        關(guān)鍵詞:保護作用肝損傷對乙酰氨基酚

        王德仙,沈偉峰,栗玉龍,楊誠,楊甲梅

        ?

        ·論著 基礎(chǔ)研究·

        氫生理鹽水對對乙酰氨基酚致小鼠急性肝損傷的保護作用

        王德仙,沈偉峰,栗玉龍,楊誠,楊甲梅

        (第二軍醫(yī)大學(xué)東方肝膽外科醫(yī)院 特需治療科,上海 200433)

        [摘 要]目的 觀察氫生理鹽水對對乙酰氨基酚致小鼠急性肝損傷的保護作用。方法 30只雄性BALB/C小鼠隨機分成3組:對照組、模型組和治療組,每組10只。治療組和模型組同時給予對乙酰氨基酚500 mg/kg腹腔內(nèi)注射誘發(fā)小鼠急性肝損傷,1 h后治療組每3 h腹腔注射氫生理鹽水6 mL/kg,模型組給予相同劑量的生理鹽水;對照組各時間點均腹腔注射相同劑量的生理鹽水。所有動物在給予對乙酰氨基酚后24 h處死,測定血漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平,以及肝組織勻漿丙二醛(MDA)和還原型谷胱甘肽(GSH)含量,TUNEL法檢測肝細胞凋亡指數(shù),觀察肝組織病理學(xué)改變和肝細胞壞死程度。結(jié)果 氫生理鹽水能顯著降低對乙酰氨基酚致小鼠急性肝損傷的血漿ALT[(816.3±300.2)U/L vs(3 933.0±1 112.0)U/L,P<0.01]、AST[(403.8±83.6)U/L vs(2851.0±992.9)U/ L,P<0.01]水平,顯著抑制炎癥因子TNF-α[(3.54±0.42)pg/mL vs(6.58±0.72)pg/mL,P<0.01]、IL-6[(350.20±66.67)pg/mL vs (553.10±67.73)pg/mL,P<0.05]的生成和MDA[(5.89±0.81)nmol/mL vs (8.26±0.60)nmol/mL,P<0.05]的含量,并增加GSH[(362.8±37.9)μg/mL vs (230.8±53.1)μg/mL,P <0.05]儲備,明顯降低肝細胞凋亡指數(shù)[(5.67%±2.28%) vs (1.93%±0.82%),P<0.01],顯著改善肝組織病理學(xué)變化和降低肝細胞壞死的嚴重程度[(2.9±0.74) vs(1.7±0.82),P<0.01]。結(jié)論 氫生理鹽水對對乙酰氨基酚致小鼠急性肝損傷具有明顯的保護作用。

        [關(guān)鍵詞]氫生理鹽水;對乙酰氨基酚;肝損傷;保護作用;小鼠

        對乙酰氨基酚是引起藥物性肝損傷最常見藥物,在美國、西歐,占成人急性肝損傷的病例的50%左右[1];在我國,對乙酰氨基酚引起的肝損傷占所有藥物性肝損傷3.99%[2]。氫氣是世界上已知的密度最小的氣體,2007年Ohsawa等[3]證明吸入2%氫氣能明顯抑制大鼠腦部的局部缺血再灌注損傷或炎癥損傷,提示氫氣作為一種抗氧化劑在預(yù)防和治療的應(yīng)用潛力。我們將氫氣在高壓(0.4 MPa)下溶于生理鹽水中制成的濃度大于0.6 mmol/L氫生理鹽水(hydrogen-rich saline,HS),使用更加安全和方便。本研究通過檢測血漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(asparate aminotransferase,AST)及腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)的水平,肝組織勻漿丙二醛(malondialdehyde,MDA)和還原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)的含量,檢測肝細胞凋亡指數(shù),觀察肝組織病理學(xué)改變和肝細胞壞死程度,評估氫生理鹽水對對乙酰氨基酚誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷的保護作用。

        1 材料和方法

        1.1 實驗動物

        雄性BALB/C小鼠,體重在20~25 g,上海中國科學(xué)院實驗動物研究中心培育,購自第二軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心。實驗之前,所有動物飼養(yǎng)在清潔,空氣新鮮的空調(diào)房間,定時打掃并通風(fēng)換氣,溫度在20 ℃左右,相對濕度50%~60%,晝夜12 h∶12 h,在整個實驗期間自由攝取食物和水。

        1.2 藥物和試劑

        氫生理鹽水由第二軍醫(yī)大學(xué)海軍研究所提供,現(xiàn)用現(xiàn)配,其制備方法如文獻[4]所述;對乙酰氨基酚(合肥博美生物科技有限責(zé)任公司,純度≥98%,批號:DA9022-100 g);MDA及GSH試劑盒(合肥博美生物科技有限責(zé)任公司,批號分別為:ELS-4834、ELS-1745);TNF-α及IL-6試劑盒(浙江聯(lián)科生物技術(shù)有限公司,批號分別為:70-E-EK2822、70-EEK2062)。

        1.3 儀器

        電子天平(PL602-L,中國);7600-020全自動生化分析儀(HITACHI,日本);酶標(biāo)儀(BioTek,美國);勻漿器(PRO200,美國);浸蠟包埋機(LEICA EG 1150E/C,德國);光學(xué)顯微鏡(LEICA CTR MIC,德國)。

        1.4 動物分組

        將30只雄性BALB/C小鼠隨機分成3組:對照組、模型組和治療組,每組10只。模型組和治療組同時給予對乙酰氨基酚500 mg/kg腹腔內(nèi)注射誘發(fā)小鼠急性肝損傷,1 h后治療組每3 h腹腔注射氫生理鹽水6 mL/kg,模型組給予相同劑量的生理鹽水;對照組各時間點均腹腔注射相同劑量的生理鹽水。所有動物均在腹腔內(nèi)注射對乙酰氨基酚24 h后,同時眼球取血用于測定血漿生化指標(biāo),剖腹取出肝臟以制備肝組織勻漿用于相關(guān)檢查。

        1.5 指標(biāo)測定

        俄羅斯北部地區(qū)是俄羅斯13個旅游區(qū)中面積最大的,人口最多的是伏爾加沿岸及中央旅游區(qū),其中西部、北部、高加索、烏拉爾都是著名的旅游景區(qū),開發(fā)最早的是亞速海-黑海之間的部分區(qū)域。俄羅斯南部主要是亞速海-黑海沿岸的主要旅游區(qū),這里四季如春,屬于亞熱帶區(qū)域。俄羅斯人旅游易選擇海濱城市,每年來此度假旅游、療養(yǎng)過冬的游客達數(shù)百萬人。俄羅斯最大的海濱療養(yǎng)勝地索契,罪域俄羅斯黑海附近,有俄羅斯最大的溫泉,是俄羅斯旅游必去的地方。這里有豐富的海域資源,200公里的海岸線有50多價療養(yǎng)機構(gòu),每天來這里療養(yǎng)的游客占總游客的80%。

        1.5.1 血漿ALT、AST檢測:對乙酰氨基酚處理24 h后摘除小鼠眼球取血,靜置10 min,4 500 r/min離心10 min取血漿,立即用全自動生化檢測儀檢測血漿ALT和AST。

        1.5.2 TNF-α和IL-6測定:檢測前取出貯存于-20 ℃冰箱中的血漿標(biāo)本,緩慢恢復(fù)至室溫,輕柔地混勻,常溫離心5 min取上清液50 μL,兩者均采用ELISA法,根據(jù)產(chǎn)品試劑盒提供的操作說明進行操作,操作完成后30 min內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm波長處準確讀取各孔的吸光值,再根據(jù)標(biāo)準曲線計算出對應(yīng)樣品的濃度。

        1.5.3 MDA和GSH測定:檢測前準確稱取肝組織重量,按重量體積比為1∶19加入生理鹽水制備成5%肝組織勻漿后,兩者均采用ELISA法,根據(jù)產(chǎn)品試劑盒提供的操作說明進行操作,操作完成后立刻用標(biāo)準酶標(biāo)儀在450 nm波長處準確讀取各孔的吸光值,再根據(jù)回歸方程計算出對應(yīng)樣品的濃度。

        1.5.4 肝組織TUNEL染色分析:制作的石蠟切片進行脫蠟、水化后,根據(jù)制造商的提供的操作說明進行操作,操作完成后在200倍光學(xué)顯微鏡下計算肝細胞凋亡指數(shù)。

        1.5.5 肝組織病理學(xué)檢查:取小鼠肝左外側(cè)葉,修剪后成大小約1 cm×1 cm(厚度不超過0.5 cm)置入4%福爾馬林溶液中,固定24 h,常規(guī)浸蠟包埋、切片、HE染色。光鏡下觀察肝組織病理學(xué)變化,肝細胞壞死程度分級參照文獻[5]。

        1.6 統(tǒng)計學(xué)分析

        2 結(jié)果

        2.1 氫生理鹽水對各組小鼠實驗指標(biāo)的影響

        與對照組比較,模型組小鼠血漿ALT、AST、TNF-α、IL-6水平均顯著升高(P<0.01);肝組織MDA水平明顯升高(P<0.05);肝組織GSH水平顯著降低(P<0.01)。與模型組比較,治療組小鼠血漿ALT、AST、TNF-α水平均顯著降低(P<0.05);血漿IL-6和肝組織MDA明顯降低(P<0.05);肝組織GSH水平明顯升高(P<0.05)。詳見表1。

        2.2 氫生理鹽水對小鼠肝細胞凋亡指數(shù)的影響

        每個TUNEL染色切片在200倍光學(xué)顯微鏡下隨機觀察一個視野,并至少計數(shù)500個細胞,棕色染色細胞為凋亡細胞,凋亡細胞陽性率即為凋亡指數(shù),如圖1所示。肝細胞凋亡指數(shù)在模型組和治療組分別為[(5.67%±2.28%)vs(1.93%±0.82%),P<0.01]。

        表1 各組實驗指標(biāo)比較

        2.3 氫生理鹽水對小鼠肝組織病理學(xué)和肝細胞壞死程度的影響

        2.3.1 氫生理鹽水顯著改善肝組織病理學(xué)變化:每個HE染色切片在100倍和400倍光學(xué)顯微鏡下觀察。光鏡下顯示對照組小鼠肝細胞排列整齊,肝細胞索走向清晰,圍繞中央靜脈呈輻射狀排列,肝小葉結(jié)構(gòu)完整,無病理學(xué)改變(圖2 NS);而對乙酰氨基酚使小鼠肝細胞出現(xiàn)空泡和灶性壞死,肝小葉竇間隙明顯擴大,肝細胞索走向紊亂,圍繞肝中央靜脈周圍可見大片壞死,細胞核固縮、破碎、部分溶解(圖2 AP+NS);氫生理鹽水治療后,小鼠肝細胞變性、壞死明顯減輕,肝組織病變改善明顯(圖2 AP+HS)。

        2.3.2 氫生理鹽水顯著降低肝細胞壞死程度:根據(jù)肝細胞壞死面積,將肝細胞壞死程度被分為0~4級[5],即:0級,沒肝細胞壞死面積小于5%;1級,鏡下肝細胞壞死面積達到5%~30%;2級,鏡下肝細胞壞死面積達到30%~50%;3級,鏡下肝細胞壞死面積達到50%~70%;4級,鏡下肝細胞壞死面積超過70%。每個切片用100倍下隨機觀察一個視野,模型組和治療組肝細胞壞死程度分別為[(2.9±0.74)vs(1.7± 0.82),P<0.01]。

        NS:對照組;AP+NS:模型組;AP+HS:治療組;黑箭頭所示凋亡細胞,CV示中央靜脈圖1 各組小鼠肝臟TUNEL染色結(jié)果

        3 討論

        對乙酰氨基酚是世界上使用最廣泛的非處方類解熱鎮(zhèn)痛藥,主要用于普通感冒或流行性感冒引起的發(fā)熱,也可用于緩解輕至中度疼痛如頭痛、關(guān)節(jié)痛、肌肉痛等。對乙酰氨基酚是典型的劑量依賴性肝損傷藥物,在大劑量長期應(yīng)用或某些特殊情況下(如過量飲酒、饑餓、免疫力低下等)過量服用則能引起肝細胞壞死,甚至引起急性肝功能衰竭。在治療劑量(10~15 mg/kg)時,對90%以上乙酰氨基酚與硫酸鹽和葡萄糖酸結(jié)合而排出,僅小部分通過單加氧酶系的氧化反應(yīng)而生成中間代謝產(chǎn)物N-乙酰-對-苯醌亞胺(NAPQI),NAPQI再與GSH結(jié)合生成無毒的硫醇尿酸而排出[6];當(dāng)超過治療劑量時,硫酸鹽和葡萄糖醛酸途徑被完全飽和,氧化生成的NAPQI增加,致細胞內(nèi)的GSH儲備減少,使大量的NAPQI聚積[7]。生成過多的NAPQI可與細胞內(nèi)大分子如核酸、蛋白質(zhì)共價結(jié)合,干擾線粒體和細胞核的功能,生成大量的氧自由基,導(dǎo)致體內(nèi)氧化與抗氧化系統(tǒng)失衡,最終導(dǎo)致肝細胞的死亡[8]。實驗研究證明氫生理鹽水不僅在腦部缺血再灌注損傷有保護作用[9],而且在心[10]、肝[11]、腎[12]等缺血再灌注損傷及炎癥損傷同樣具有治療作用。

        ALT和AST是肝內(nèi)的主要功能酶,是從損傷或壞死的肝細胞漿或線粒體中釋放到血液中,是反映肝細胞損傷的靈敏指標(biāo)[13]。實驗發(fā)現(xiàn)在模型組中血漿的ALT和AST的水平顯著升高,鏡下肝細胞壞死面積均在30%以上,證明了肝功能損害嚴重;用氫生理鹽水治療后,血漿的ALT和AST的水平顯著下降,鏡下肝細胞壞死面積顯著降低,證明了氫生理鹽水能降低對乙酰氨基酚造成的肝細胞壞死面積,能保護肝臟功能。

        TNF-α主要由單核細胞/巨噬細胞分泌,它的濃度與機體的炎癥嚴重程度正相關(guān),是炎癥細胞因子網(wǎng)絡(luò)的關(guān)鍵[14];IL-6是人類最早發(fā)現(xiàn)的細胞因子,是炎性介質(zhì)網(wǎng)絡(luò)的主要成分,在炎癥反應(yīng)中起重要作用[15]。我們檢測血清中的TNF-α、IL-6的含量達到判別病情嚴重程度和判斷藥物的治療效果。在模型組中,血漿的TNF-α、IL-6的水平顯著升高,證明對乙酰氨基酚可引起肝臟炎癥反應(yīng);而治療組中,TNF-α、IL-6的水平顯著降低,證明了氫生理鹽水能抑制肝臟炎癥反應(yīng),保護肝組織免受對乙酰氨基酚的炎癥性損傷。

        MDA來源于脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)的終產(chǎn)物,是氧化應(yīng)激的標(biāo)志物,MDA含量可間接反映機體抗氧化能力及清除氧化產(chǎn)物的能力[16]。GSH是體內(nèi)的內(nèi)源性還原劑,能與多種外源性、內(nèi)源性有毒物質(zhì)結(jié)合生成減毒物質(zhì),避免各種有害刺激,如氧化應(yīng)激、炎癥等對細胞造成的損害[17-18]。實驗發(fā)現(xiàn):氫生理鹽水不僅能顯著降低小鼠血漿肝組織MDA的含量,而且能減輕肝組織GSH的消耗并增加其儲備,證明了氫生理鹽水不僅能抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng),而且能抑制氧化應(yīng)激反應(yīng),從而減輕對乙酰氨基酚對肝臟的氧化反應(yīng)性損傷。

        總之,氫生理鹽水作為一種抗氧化劑,治療對所致小鼠的急性肝損傷,能明顯的改善肝功能、抑制肝臟炎癥反應(yīng)、抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)及氧化應(yīng)激反應(yīng)程度、減輕肝組織GSH的消耗并增加其儲備、降低肝細胞凋亡指數(shù)、明顯改善肝組織病理學(xué)變化及減輕肝細胞壞死程度,對對乙酰氨基酚所致小鼠的急性肝損傷具有保護作用。

        參考文獻:

        [1] BESSONE F. Non-steroidal anti-inflammatory drugs: what is the actual risk of liver damage [J]? World J Gastroenterol,2010, 16(45): 5651-5661.

        [2] ZHOU Y, YANG L, LIAO Z, et al. Epidemiology of drug-induced liver injury in China: a systematic analysis of the Chinese literature including 21 789 patients [J]. Eur J Gastroenterol Hepatol, 2013, 25(7): 825-829.

        [3] OHSAWA I, ISHIKAWA M, TAKAHASHI K, et al. Hydrogen acts as a therapeutic antioxidant by selectively reducing cytotoxic oxygen radicals [J]. Nat Med, 2007, 13(6): 688-694.

        [4] 劉渠, 閆戈, 沈偉峰, 等. 氫生理鹽水對梗阻性黃疸大鼠肝功能的保護作用 [J]. 肝膽外科雜志, 2010, 18(4): 302-305, 308.

        [5] OZ H S, MCCLAIN C J, NAGASAWA H T, et al. Diverse antioxidants protect against acetaminophen hepatotoxicity [J]. J Biochem Mol Toxicol, 2004, 18(6): 361-368.

        [6] TUJIOS S, FONTANA R J. Mechanisms of drug-induced liver injury: from bedside to bench [J]. Nat Rev Gastroenterol Hepatol, 2011, 8(4): 202-211.

        [7] 陳軍寶, 徐智, 覃小艷, 等. 撲熱息痛肝損傷機制的研究進展 [J]. 實用醫(yī)學(xué)雜志, 2012, 28(20): 3479-3480.

        [8] JAESCHKE H, Mcgill M R, RAMACHANDRAN A. Oxidantstress, mitochondria, and cell death mechanisms in drug-induced liver injury: Lessons learned from acetaminophen hepatotoxicity [J]. Drug Metab Rev, 2012, 44(1): 88-106.

        [9] CUI Y, ZHANG H, JI M, et al. Hydrogen-rich saline attenuates neuronal ischemia-reperfusion injury by protecting mitochondrial function in rats [J]. J Surg Res, 2014, 192(2): 564-572.

        [10] SUN Q, KANG Z, CAI J, et al. Hydrogen-rich saline protects myocardium against ischemia/reperfusion injury in rats [J]. Exp Biol Med (Maywood), 2009, 234(10): 1212-1219.

        [11] SUN H, CHEN L, ZHOU W, et al. The protective role of hydrogen-rich saline in experimental liver injury in mice [J]. J Hepatol, 2011, 54(3): 471-480.

        [12] GUO S X, FANG Q, YOU C G, et al. Effects of hydrogenrich saline on early acute kidney injury in severely burned rats by suppressing oxidative stress induced apoptosis and inflammation [J]. J Transl Med, 2015, 13: 183.

        [13] HUANG L, HEINLOTH A N, ZENG Z B, et al. Genes related to apoptosis predict necrosis of the liver as a phenotype observed in rats exposed to a compendium of hepatotoxicants [J]. BMC Genomics, 2008, 9: 288.

        [14] 邢杰, 王淑芬. 細胞因子與炎癥 [J]. 天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報, 2001, 7(1): 146-148.

        [15] 林麗艷, 張慧云, 何韶衡. IL-6及其受體與炎癥性疾病關(guān)系的新進展 [J]. 中國熱帶醫(yī)學(xué), 2008, 8(4): 680-682.

        [16] GAMAL EL-DIN A M, MOSTAFA A M, AL-SHABANAH O A, et al. Protective effect of arabic gum against acetaminophen-induced hepatotoxicity in mice [J]. Pharmacol Res,2003, 48(6): 631-635.

        [17] HWANG H J, KIM I H, NAM T J. Effect of a glycoprotein from hizikia fusiformis on acetaminophen-induced liver injury [J]. Food Chem Toxicol, 2008, 46(11): 3475-3481.

        [18] KUVANDIK G, DURU M, NACAR A, et al. Effects of erdosteine on acetaminophen-induced hepatotoxicity in rats [J]. Toxicol Pathol, 2008, 36(5): 714-719.

        (本文編輯:張海燕,魯翠濤)

        [中圖分類號]R575.3

        [文獻標(biāo)識碼]A

        Doi:10.11952/j.issn.1007-1954.2016.04.006

        [收稿日期]2016-01-08

        [第一作者簡介]王德仙(1982-),男,安徽蕪湖人,住院醫(yī)師,碩士。

        [通訊作者簡介]楊甲梅,教授,E-mail:jmyang@smmu.edu.cn。μg/mL vs (230.8±53.1) μg/mL, P<0.05]. In addition, HS could markedly decrease the hepatocellular apoptosis index [(5.67±2.28)% vs (1.93±0.82)%, P<0.01], ameliorate the liver histopathology and diminish the degree of hepatocyte necrosis [(2.9±0.74) vs (1.7±0.82), P<0.01]. Conclusion The hydrogen-rich saline has a protective role against acetaminophen-induced liver injury in mice.

        Protective effect of hydrogen-rich saline against acetaminophen-induced liver injury in mice

        WANG De-xian, SHEN Wei-feng, LI Yu-long, YANG Cheng, YANG Jia-mei. Department of Special Treatment,Eastern Hepatobiliary Surgery Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200438, China

        Abstractobjective To investigate the protective effect of hydrogen-rich saline (HS) against acetaminophen-induced liver injury in mice. Methods Thirty BALB/C male mice were randomly divided into three groups: control group, model group, and treatment group, each group contained 10 mice. In the treatment group and model group, liver injury was induced by acetaminophen (i.p. 500 mg/kg). One hour after the administration of acetaminophen, HS (6 mL/kg) or an equivalent volume of NS was given intraperitoneally every 3 h. The control group was injected with the same dose of normal saline at the corresponding time point. All animals were killed at 24 h after the administration of acetaminophen, the levels of plasma alanine aminotransferase (ALT), asparate aminotransferase (AST), tumor necrosis factor alpha (TNF-α), interleukin-6 (IL-6), the contents of malondialdehyde (MDA) and glutathione (GSH) in the liver tissue were measured; the hepatocellular apoptosis index was detected by TUNEL method; the pathological change of liver tissue and the necrosis area of hepatic cell were observed.

        Results In the acetaminophen-induced liver injury in mice, HS could significantly reduce the levels of plasma ALT [(816.3±300.2) U/L vs (3 933.0±1 112.0) U/L, P<0.01] and AST [(403.8±83.6) U/L vs (2 851.0±992.9) U/ L, P<0.01], inhibit the generation of inflammatory factors TNF-α [(3.54±0.42) pg/mL vs (6.58±0.72) pg/mL,P<0.01] and IL-6 [(350.20±66.67) pg/mL vs (553.10±67.73) pg/mL, P<0.05], and decrease the content of the MDA [(5.89±0.81) nmol/mL vs (8.26±0.60) nmol/mL, P<0.05] and increase the reservation of GSH [(362.8±37.9)

        Key wordshydrogen-rich saline; acetaminophen; liver injury; protective effect; mice

        猜你喜歡
        保護作用肝損傷對乙酰氨基酚
        北化大生物合成對乙酰氨基酚
        山西化工(2021年5期)2021-01-25 15:00:58
        吃感冒藥進了ICU 全因做錯一件事
        保健與生活(2020年4期)2020-03-02 02:27:36
        蓑衣蓮?fù)蛩狨σ阴0被诱T導(dǎo)小鼠急性肝損傷的保護作用
        明黨參根皮中五種香豆素對H2O2誘導(dǎo)的HUVEC的保護作用研究
        價值工程(2016年36期)2017-01-11 23:19:46
        葵花護肝片聯(lián)合琥珀酸美托洛爾治療高血壓的臨床觀察
        銀杏內(nèi)酯對小鼠急性酒精性肝損傷的保護作用
        顯露喉返神經(jīng)在高風(fēng)險甲狀腺手術(shù)中對喉返神經(jīng)保護作用
        異甘草酸鎂預(yù)防奧沙利鉑致肝損傷的療效觀察
        異甘草酸鎂治療重癥手足121病合并肝損傷的療效觀察
        急性胰腺炎肝損傷的發(fā)病機制與防治進展研究張琳
        美女不带套日出白浆免费视频| 国产成人精品免费视频大全| 亚洲一区二区女优av| 五月婷婷开心五月激情| 日韩Va亚洲va欧美Ⅴa久久| 日韩av中文字幕波多野九色| 亚洲gay片在线gv网站| 久热这里只有精品视频6| 久无码久无码av无码| 国产高清精品自在线看| 日本中文字幕人妻精品| 美腿丝袜诱惑一区二区| 中文字字幕人妻中文| 久久久精品2019免费观看| 欧美激情精品久久999| sm免费人成虐漫画网站| 欧美日韩在线视频一区| 性一交一乱一伦| 熟妇与小伙子露脸对白| av成人一区二区三区| 天天躁日日躁狠狠躁| 亚洲狠狠网站色噜噜| 亚洲V在线激情| 人妻中文字幕一区二区三区| 日韩综合无码一区二区| 水蜜桃亚洲一二三四在线| 在线成人tv天堂中文字幕| 亚洲24小时免费视频| 日本19禁啪啪吃奶大尺度| 亚洲男人的天堂网站| 视频一区二区不中文字幕| 国产亚洲aⅴ在线电影| 欧美尺寸又黑又粗又长| 538亚洲欧美国产日韩在线精品| 国产精品亚洲一区二区三区在线 | 成人国产精品999视频| 啪啪视频免费看一区二区| 人妻精品视频一区二区三区| 看全色黄大色大片免费久久| 久久与欧美视频| 91精品国产91综合久久蜜臀|