張雪王曉梅逯忠斌王巖侯志廣趙曉峰王鑫宏張浩*

（1.*吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院　長春　130118）（2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院　長春　130118）

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16種殺菌劑及其復(fù)配對番茄晚疫病的室內(nèi)毒力測定及溫室防效

張雪1王曉梅2逯忠斌1王巖1侯志廣1趙曉峰1王鑫宏1張浩1*

（1.*吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院長春130118）（2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院長春130118）

摘要：采用生長速率法測定16種殺菌劑單劑藥效并篩出對番茄晚疫病增效作用較好的混劑配比。結(jié)果表明氰霜唑、咯菌腈、氨基寡糖素、吡唑醚菌酯、烯酰嗎啉的EC50值分別為0.21、0.37、0.46、0.65、0.74mg/L，抑菌效果均較好。將氰霜唑分別于其他四種殺菌劑復(fù)配，其中咯菌腈和氰霜唑以質(zhì)量比為1∶1混配時，EC50值為0.08mg/L，增效系數(shù)為3.38，增效作用明顯。在溫室防效試驗(yàn)中，采用常規(guī)噴霧法，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%咯菌腈·氰霜唑在100g.a.i/hm2劑量下防效最好，達(dá)到93.66%,可為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)提供有效的科學(xué)理論指導(dǎo)。

關(guān)鍵詞：番茄晚疫??；殺菌劑；毒力測定

張雪，吉林農(nóng)安人，碩士，主要從事有害生物抗藥性及綜合治理研究。

E-mail：529562839@qq.com

地址：（130118）吉林省長春市新城大街2888號吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院，E-mail：haozhang100@163.com。

番茄晚疫病菌是由卵菌中的致病疫霉引起的，是一種常見的植物病原真菌，侵染番茄等茄科植物。我國多數(shù)省份都有番茄晚疫病的發(fā)生現(xiàn)象,尤其是連續(xù)陰雨天氣、日夜溫差較大的地區(qū)影響番茄的正常生長。對于北方保護(hù)地栽培條件來看,也較容易發(fā)生此病害[1-2]。

對該病害的防治主要采用化學(xué)藥劑[3]，主要有甲霜靈、苯霜靈等，但通過試驗(yàn)可知，許多國家已對此類藥劑產(chǎn)生抗性［4-6］。本文通過對常用防治番茄晚疫病的各種殺菌劑進(jìn)行室內(nèi)毒力試驗(yàn)，篩選出抑菌效果較好的單劑按照不同比例進(jìn)行混配，選擇增效作用最好的藥劑復(fù)配并對其進(jìn)行溫室防效試驗(yàn)，從而在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上為防治該類病害提供科學(xué)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1供試菌株

番茄晚疫病菌，由吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)藥生物測定實(shí)驗(yàn)室分離鑒定并保存。

1.1.2供試藥劑

95%氰霜唑原藥（Cyazofamid，TC），諾農(nóng)(北京)國際生物技術(shù)公司；97%咯菌睛原藥（Fludioxonil，TC），河北冠龍農(nóng)化有限公司；90%氨基寡糖素原藥（Chitosam-oligosacchrins，TC），青島博智匯力生物科技有限公司；95%吡唑醚菌酯原藥（Pyrazole kresoxim，TC），京振農(nóng)化工有限公司，98%烯酰嗎琳原藥（Dimethomorph，TC），98%甲霜靈原藥（Metalaxyl，TC），廣州瑞豐生物科技有限公司；90%烯肟菌酯原藥（Enestroburin，TC），沈陽科創(chuàng)化學(xué)品有限公司；95%咪鮮胺原藥（Prochloraz，TC），江蘇輝豐農(nóng)化股份有限公司；90%多抗霉素原藥（Polyoxin，TC），績溪農(nóng)華生物科技有限公司；95%甲基硫菌靈原藥（Thiophanate-methyl，TC），江蘇百靈有限公司；1萬億活芽孢/g枯草芽孢桿菌母藥（Bacillus subtilis，TC），德強(qiáng)生物股份有限公司；96%異菌脲原藥（Iprodione，TC），湖北佳諾信生物化工有限公司；96%福美雙（Thiram,，TC），淄博華王化工有限公司；99%多菌靈原藥（Carbendazim，TC），上海開蒙環(huán)境工程有限公司；95%百菌清原藥（Chlorothalonil，TC），鄒平德睿商貿(mào)有限公司；98%苯醚甲環(huán)唑原藥（Difenoconazole，TC），石家莊伊宏化工有限公司。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1實(shí)驗(yàn)藥劑篩選與濃度確定

將16種藥劑分別用少量有機(jī)溶劑進(jìn)行溶解，然后加入無菌水，按照實(shí)驗(yàn)需要均配制成質(zhì)量濃度為1000mg/L母液備用，然后依次稀釋不同的濃度。氰霜唑、咯菌腈、氨基寡糖素的質(zhì)量濃度為10、2、0.4、0.08、0.016mg/L；吡唑醚菌酯、烯酰嗎啉、苯醚甲環(huán)唑、烯肟菌酯的質(zhì)量濃度為40、8、1.6、0.32、0.064mg/L；咪鮮胺、多抗霉素、甲基硫菌靈、枯草芽孢桿菌的質(zhì)量濃度為50、10、2、0.4、0.08mg/L；福美雙、多菌靈、異菌脲、甲霜靈、百菌清的質(zhì)量濃度為80、16、3.2、0.64、0.128mg/L。

1.2.2單劑室內(nèi)毒力測定

測定16種藥劑的室內(nèi)毒力采用菌絲生長速率法[6]。將滅菌后的PDA培養(yǎng)基自然降到60～70℃，按上面濃度加入計算好的固定藥量，使帶藥培養(yǎng)基含有不同藥量，至完全冷卻后，接種直徑為5mm的番茄晚疫病菌餅，空白對照加等量無菌水，3次重復(fù)。接種后平板放到培養(yǎng)箱中（25℃）培養(yǎng)，72小時后測量生長菌落直徑采用十字交叉法，然后計算抑菌率，用DPS評價系統(tǒng)分析，從而得出毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)和EC50值[7-10]。

抑菌率（%）=（對照培養(yǎng)基中菌落直徑-含藥培養(yǎng)基中菌落直徑）/對照培養(yǎng)基中菌落直徑×100%

1.2.3殺菌劑復(fù)配對番茄晚疫病藥效測定

復(fù)配毒力測定實(shí)驗(yàn)用Horsfall法，在測定單劑毒力的基礎(chǔ)上，選擇機(jī)制作用不同的殺菌劑混配[11]，試驗(yàn)中對番茄晚疫病菌抑菌效果最好的氰霜唑分別和咯菌腈、生物農(nóng)藥氨基寡糖素、吡唑醚菌酯、烯酰嗎啉混配進(jìn)行聯(lián)合毒力測定。每種混劑按5∶1、3∶1、1∶1、1∶3、1∶5進(jìn)行混配，且復(fù)配劑質(zhì)量濃度梯度均為10、2、0.4、0.08、0.016mg/L，以加等體積無菌水為空白對照，3次重復(fù)。實(shí)驗(yàn)與計算方法均同單劑室內(nèi)毒力測定。

1.2.4數(shù)據(jù)處理

根據(jù)Wadley方法判斷混劑是否有增效作用[11]。按菌絲生長抑制率計算單劑和混劑的EC50值，再用Wadley公式計算混劑的SR，Wadley法計算如下：

EC50（th）=（a+b）/（a/EC50A+b/EC50B)

增效系數(shù)（SR）=EC50（th）/EC50（ob）

EC50（ob）代表實(shí)際EC50，EC50(th)代表理論EC50，A、B為單劑，a、b為兩者在混劑中的質(zhì)量比。SR=0.5-1.5為相加作用；SR＞1.5為增效作用；SR＜0.5為拮抗作用。

1.2.540%咯菌腈·氰霜唑?qū)Ψ淹硪卟〉臏厥宜幮г囼?yàn)

試驗(yàn)于吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)溫室內(nèi)進(jìn)行，肥力水平均勻一致、栽培管理為中等水平[12]。實(shí)驗(yàn)過程中將加工后的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%咯菌腈·氰霜唑懸浮劑按照150、100、50g.a.i./hm2三種劑量進(jìn)行噴施，試驗(yàn)共設(shè)計8個處理，3次重復(fù)，共24個小區(qū)。本試驗(yàn)共施藥兩次間隔為7天，第二次施藥10天后調(diào)查番茄晚疫病病況。取樣采用對角線5點(diǎn)法，記下總株數(shù)、各病級數(shù)與病株數(shù)，計算出病情指數(shù)與防治效果。

分級標(biāo)準(zhǔn)與計算公式如下：

0級，無病斑；1級，病斑面積占整個葉面積5%以下；2級，病斑面積占整個葉面積6%～10%；3級，病斑面積占整個葉面積11%～20%；4級，病斑面積占整個葉面積21%～50%；5級，病斑面積占整個葉面積50%以上。

病情指數(shù)=[∑（各級病株數(shù)×相對級值數(shù)）/（最高級值×調(diào)查總株數(shù)）]×100%

防治效果=[（空白對照區(qū)病情指數(shù)-處理區(qū)病情指數(shù)）/空白對照區(qū)病情指數(shù)]×100%

2　結(jié)果與分析

2.116種殺菌劑對番茄晚疫病的EC50值測定結(jié)果

從試驗(yàn)結(jié)果（見表1）可知：在16種殺菌劑中，吡唑醚菌酯和烯酰嗎啉對番茄晚疫病有較好的抑制效果，EC50值分別為0.74、0.92mg/L，生物農(nóng)藥中氨基寡糖素表現(xiàn)出良好的抑菌效果，EC50值為0.46mg/L，擬除蟲菊酯類殺蟲劑中咯菌腈表現(xiàn)出較好的抑菌活性，EC50值為0.37mg/L，磺胺咪唑類殺菌劑中氰霜唑EC50值為0.21mg/L，對番茄晚疫病菌具有最高的抑菌活性，為混劑復(fù)配提供了有效依據(jù)。

表1　16種殺菌劑對番茄晚疫病的室內(nèi)毒力

2.2氰霜唑與其它四種殺菌劑混配對番茄晚疫病菌的試驗(yàn)效果

2.2.1咯菌腈與氰霜唑混配的試驗(yàn)結(jié)果

咯菌腈與氰霜唑藥劑復(fù)配后的結(jié)果見表2。從表可知，當(dāng)咯菌腈和氰霜唑混劑比例為5∶1、3∶1和1∶3時，增效系數(shù)為0.92、0.94 和0.92，SR在0.5～1.5之間，為相加作用；兩藥劑混劑比例為1∶5 和1∶1時，增效系數(shù)為1.53和3.38，抑菌效果較好，表現(xiàn)出增效作用。尤其當(dāng)兩藥劑質(zhì)量比為1∶1時，抑菌效果最強(qiáng)。

表2　咯菌腈與氰霜唑混配的試驗(yàn)結(jié)果

2.2.2氨基寡糖素與氰霜唑混配的試驗(yàn)效果

表3　氨基寡糖素和氰霜唑混配試驗(yàn)結(jié)果

氨基寡糖素與氰霜唑藥劑復(fù)配的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。從表可知，當(dāng)氨基寡糖素和氰霜唑混劑比例為1∶1、1∶3、1∶5時，其增效系數(shù)為1.26、1.01、0.51，SR在0.5～1.5之間，為相加作用；兩藥劑混劑比例為5:1和3:1時，增效系數(shù)為2.95和1.77，SR＞1.5，抑菌效果較好，表現(xiàn)出增效作用。尤其當(dāng)兩藥劑質(zhì)量比為5∶1時，抑菌效果最強(qiáng)。

2.2.3吡唑醚菌酯和氰霜唑混配的試驗(yàn)結(jié)果

吡唑醚菌酯與氰霜唑復(fù)配的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表4。從表可知，當(dāng)吡唑醚菌酯和氰霜唑混劑比例為5∶1、1∶1、1∶3、1∶5時，其增效系數(shù)為0.71、0.71、0.74、1.00,SR在0.5～1.5之間，為相加作用；兩藥劑混劑比例為3∶1時，增效系數(shù)為2.26，SR＞1.5，抑菌效果較好，表現(xiàn)出增效作用。

表4　吡唑醚菌酯和氰霜唑混配試驗(yàn)結(jié)果

2.2.4烯酰嗎啉和氰霜唑混配試驗(yàn)結(jié)果

烯酰嗎啉與氰霜唑復(fù)配的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表5。從表可知，當(dāng)烯酰嗎啉和氰霜唑混劑比例為5∶1、3∶1、1∶3、1∶5時，其增效系數(shù)為1.24、1.29、1.08、0.86,SR在0.5～1.5之間，為相加作用；兩藥劑混劑比例為1∶1時，增效系數(shù)為1.65，SR＞1.5，抑菌效果較好，表現(xiàn)出增效作用。

表5　烯酰嗎啉和氰霜唑混配試驗(yàn)結(jié)果

2.3咯菌腈與氰霜唑溫室藥效試驗(yàn)結(jié)果

溫室藥效試驗(yàn)結(jié)果（見表6）。質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%咯菌腈·氰霜唑?qū)Ψ淹硪卟∮泻芎玫姆乐涡Ч?0、100、150g.a.i./hm2三種劑量下，防效分別為86.91%、93.66%、90.08%，與單劑相比防效顯著，其中以100g.a.i./hm2劑量下對番茄晚疫病的防治效果最好。

表6　咯菌腈與氰霜唑溫室藥效試驗(yàn)結(jié)果

3　結(jié)果與討論

氰霜唑能夠較好抑制疫霉菌不同階段的生長，例如孢子囊的形成、萌發(fā)、游動孢子的釋放、移動以及菌絲的生長等。氰霜唑用量要求低，對人及其他動物物具有較低毒性［13］。

試驗(yàn)結(jié)果表明：氰霜唑、咯菌腈、氨基寡糖素、吡唑醚菌酯和烯酰嗎啉對番茄晚疫病菌菌絲生長的抑制中濃度分別是0.21、0.37、0.46、0.65、0.74mg/L，表明氰霜唑、咯菌腈、氨基寡糖素、吡唑醚菌酯和烯酰嗎啉均具有良好的抑制效果。將氰霜唑與其他四種殺菌劑進(jìn)行混配試驗(yàn)，結(jié)果表明,四種混配藥劑中咯菌腈與氰霜唑質(zhì)量比為1∶1時，其增效系數(shù)最高，抑菌效果更好。

農(nóng)藥混配使用是目前生產(chǎn)上普通采用的藥劑混用方式，具有使用方便和靈活、易于操作等優(yōu)點(diǎn)，而且還能夠避免混劑有效成分因相互作用而失效的可能性。對番茄晚疫病的溫室防效試驗(yàn)中咯菌腈和氰霜唑質(zhì)量比為1∶1時，其防效較好，當(dāng)用量為100g.a.i./hm2時，對番茄晚疫病的防效為93.66%，優(yōu)于對照藥劑，為防治番茄晚疫病提供更多的用藥參考，可在日常農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中廣泛使用。

參考文獻(xiàn)

[1]姜莉莉，武玉國.9種殺菌劑對番茄晚疫病菌的室內(nèi)毒力測定[J].世界農(nóng)藥,2015,37（2）：:59-60.

[2]鄭榜高，楊洪.幾種殺菌劑對番茄晚疫病的防治效果[J].植物醫(yī)生，2011，24（5），35-36.

[3]張成玲，張?zhí)锾?，路興濤，等.10種殺菌劑對番茄晚疫病菌的室內(nèi)毒力測定[J].植物保護(hù)，2012，44（6）：97-100.

[4] Shen J.W，YangZ.H，Zhu J.H.Detectiononthesensitivityof Phytophthora infestantoazoxystrobinandmetalaxgl-M[J].Agrochemical，2008，47:457-458.

[5] Wen-qiaoWang,Peng Zhang,Run-jie Meng.Fungitoxicity and synergism of mixtures of fluopicolide and pyraclostrobin against Phytophthora infestans[J]. Crop Protection，2014，57：48－56.

[6]路焱平，鄭服叢．農(nóng)藥學(xué)科群實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].海口：海南出版社，2008.

[7]田琴，楊志輝,，朱杰華.6種殺菌劑對馬鈴薯晚疫病菌的室內(nèi)毒力測定[J].中國馬鈴薯，2012,26（2）：105-107.

[8]陶挺燕，何凡，范鴻雁，等.幾種殺菌劑對荔枝霜霉病的室內(nèi)毒力測定[J].植物保護(hù)，2010,49（1）：72-73.

[9]陳伶俐,馬洪福,李亞娟,等.10種殺菌劑對枸杞根腐病的室內(nèi)毒力測定[J].青海大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2015,33（5）：11-12.

[10]竇君霞，耿忠義，劉存宏，等.苯醚甲環(huán)唑與戊唑醇混配對水稻稻曲病菌聯(lián)合作用的測定[J].中國農(nóng)學(xué)通報，2015,31（4）：185-189.

[11]張胡煥，謝藝賢，蒲金基.常用殺菌劑及其混劑對芒果炭疽病菌的毒力測定[J].農(nóng)藥，2010，49（1）：64-65.

[12]賈利元，田偉，劉新社.6種殺菌劑對設(shè)施番茄灰霉病的防治效果[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，41（9）：103－105．

[13]秦虎強(qiáng)，陳芳穎，付鼎程，等.油菜菌核病對10種殺菌劑的敏感性及不同藥劑田間防效[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然版學(xué)科)，2011,39（7）：117-122.

[14]許誠，丁秀麗，李宗英，等.殺菌劑氰霜唑的合成進(jìn)展[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理，2009,30（10）：40-41.

●園林花卉●

Toxicity Determination and Greenhouse efficacy of several Fungicides to phytophthora infestans ZHANG Xue1,WANG Xiao-mei2,LU Zhong-bin1,WANG Yan1,HOU Zhi-guang1,ZHAO Xiao-feng1,WANG Xin-hong1,ZHANG Hao1

(1.College of Resource and Environmental Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China）（2.College of Agronomy,Jilin Agricultural University, Changchun 130118,China)

Abstract:The study aims to test sixteen effective fungicides and screens out the proportioning ratio for controlling on phytophthora infestans through indoor screening.The results showed that the EC50 value of cyazofamid、fludioxonil、chitosam-oligosacchrins、pyrazole kresoxim、dimethomorph were 0.21、0.37、0.46、0.65、0.74mg/L，had obviously inhibitory activity.The mixture of fludioxonil and cyazofamid is the most obvious synergism at the ratio of 1∶1 with EC50 value of 3.38,exhibiting obvious synergic effect.The greenhouse efficacy of the mixture at 100g.a.i/hm2was best against phytophthora infestans with the method of greenhouse was spraying,which laid a foundation for better controlling phytophthora infestans.

Key words:phytophthora infestans;fungicide;toxicity test

作者簡介：10.16627/j.cnki.cn22-1215/s.2016.05.030

通訊作者：張浩，吉林洮南人，教授，博士，碩士生導(dǎo)師，主要從事農(nóng)藥環(huán)境毒理研究。

基金項(xiàng)目：長春市國際科技合作計劃（13GH06）。