崔紅軍，　徐寶才，，　王　莉，　韓衍青，　羅小虎，　陳正行*（.江南大學食品學院/糧食發(fā)酵工藝與技術(shù)國家工程實驗室，江蘇無錫4；.肉品加工與質(zhì)量控制國家重點實驗室/江蘇雨潤肉類產(chǎn)業(yè)集團有限公司，江蘇南京806）

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脫脂米糠堿溶醇溶物抗氧化活性研究

崔紅軍1，徐寶才1，2，王莉1，韓衍青2，羅小虎1，陳正行*1
（1.江南大學食品學院/糧食發(fā)酵工藝與技術(shù)國家工程實驗室，江蘇無錫214122；2.肉品加工與質(zhì)量控制國家重點實驗室/江蘇雨潤肉類產(chǎn)業(yè)集團有限公司，江蘇南京211806）

摘要：脫脂米糠的堿溶醇溶物具有良好的體外抗氧化活性。從脫脂米糠中提取抗氧化物，采用羥基自由基體系、DPPH自由基體系、超氧陰離子自由基體系、亞油酸體系、純豬油體系、ORAC體系、PC12細胞氧化損傷體系，研究脫脂米糠的堿溶醇溶物清除自由基和脂質(zhì)過氧化物的效果。結(jié)果表明：當樣品質(zhì)量濃度為0.2 g/mL時，其對·OH的清除率超過50%；樣品質(zhì)量濃度為0.6 mg/mL時，酶解產(chǎn)物的DPPH清除率可達90%；樣品質(zhì)量濃度45.0 mg/mL時，O2-清除率約為50%；樣品濃度高于60 μg/mL時，樣品的ORAC值與異VC鈉相當；在亞油酸體系中，500 μg/mL的樣品有明顯的抗氧化效果，500 μg/mL和1 mg/mL的樣品顯著好于相同濃度的異VC鈉；在豬油抗氧化體系中，質(zhì)量分數(shù)5%樣品添加組的豬油達到相同的pov所需的天數(shù)延長；隨著樣品質(zhì)量濃度的增加，PC12細胞存活率呈現(xiàn)依次升高的趨勢，5 mg/mL的樣品的PC12細胞存活率達到82.2%，抗氧化效果好于200 μmol/L的Trolox。

關(guān)鍵詞：脫脂米糠；抗氧化；DPPH；O2-；亞油酸；豬油；ORAC；PC12

目前用于食品抗氧化的物質(zhì)大多為一些人工合成化合物，如BHA（叔丁基羥基茴香醚），BHT （2，6－二叔丁基對甲酚）等，但隨著深入研究，發(fā)現(xiàn)其具有毒性、致癌性等副作用[1]，近年來，消費者食品安全意識的日益提高給食品生產(chǎn)者帶來新的壓力與挑戰(zhàn)，開發(fā)安全天然的抗氧化劑成為亟需解決的問題。

脫脂米糠是米糠制油后的剩余物，含有大量的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)[2]，碳水化合物，維生素礦物質(zhì)，色素，植酸，γ-谷維素[3]等微量生理活性物質(zhì)。據(jù)報道[4]，米糠具有許多生理作用，能夠降低血脂，降低血液總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇含量，增加高密度脂蛋白膽固醇含量，還能調(diào)節(jié)血糖，具有抗癌活性等。米糠的許多生理作用跟所含抗氧化組分有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)米糠中的γ-谷維醇[5]，多糖[6]，抗氧化肽[7]等都有很好的抗氧化能力。資料顯示，米糠的深度開發(fā)利用，尤其是米糠中的提取物制成的功能性食品可使米糠附加值提高60倍，使其產(chǎn)值多倍增長[8]。聯(lián)合國工業(yè)發(fā)展組織把米糠稱為一種未充分利用的原料。就我國米糠的利用而言，少量米糠用作生生產(chǎn)米糠油和菲丁的原料，而大部分米糠主要當作飼料使用，這造成了資源的嚴重的浪費。國內(nèi)外學者對米糠的抗氧化的研究主要集中在對全脂米糠，而對脫脂米糠堿醇提物的研究還較少。

因此，作者從脫脂米糠中提取抗氧化功能因子脫脂米糠堿溶醇溶物，在綜合利用米糠的同時，優(yōu)化提取工藝，并利用幾種體外模型探討其體外抗氧化活性，豐富了米糠抗氧化活性因子方面的內(nèi)容，以期為工業(yè)化生產(chǎn)提供理論依據(jù)，促進在食品工業(yè)中的大規(guī)模商業(yè)化應(yīng)用。

1　材料與方法

1.1材料與儀器

脫脂米糠：益海嘉里黑龍江分公司提供，-4℃保存，耐高溫；1，1-二苯基苦基苯肼（DPPH）、菲啰嗪（Ferrozine）：Sigma公司產(chǎn)品；其余試劑為分析純。

UV-2000型紫外可見分光光度儀：日本日立公司產(chǎn)品；ALPHA 1-2LD PLUS型凍干機：德國Marin christ公司產(chǎn)品；IKA RV 10數(shù)顯型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：德國IKA公司產(chǎn)品；飛鴿牌離心沉淀機：上海安亭科學儀器廠產(chǎn)品；FE20K型pH計：梅特勒-托利多儀器有限公司產(chǎn)品；MB23型水分分析儀：上海奧豪斯實驗儀器有限公司產(chǎn)品；101-1型電熱恒溫鼓風干燥箱：上海錦昱科學儀器有限公司產(chǎn)品；MP-501A超級恒溫水?。荷虾Ｒ缓憧茖W儀器有限公司產(chǎn)品；AB204-N型分析天平：梅特勒-托利多（上海）公司產(chǎn)品；實驗用標準篩：新鄉(xiāng)市康達新機械有限公司產(chǎn)品；IK-82電熱真空干燥箱：上海實驗儀器有限公司產(chǎn)品；Q-250A3多功能粉碎機：上海冰都電器有限公司產(chǎn)品。

1.2方法

1.2.1脫脂米糠堿溶醇溶物的提取工藝取1 kg脫脂米糠（80目，干重），加10 L水，調(diào)pH到11，45℃反應(yīng)3 h，離心（4 200 r/min，15 min）取上清，上清液調(diào)pH到4.5，酸沉0.5 h，離心（8 500 r/min，15 min），沉淀冷凍干燥即是米糠粗蛋白，上清液濃縮，濃縮液加乙醇至體積分數(shù)80%，過夜醇沉，離心（8 500 r/min，15 min），沉淀冷凍干燥即是米糠粗多糖，上清液濃縮至干冷凍干燥即是米糠堿溶醇溶物。

1.2.2羥基自由基清除能力測定鄰二氮菲法[9]：各取l mL 0.75 mmol/L鄰二氮菲無水乙醇溶液于22個試管中，依次加入2 mL 0.2 mol/L pH 7.40磷酸鹽緩沖溶液和l mL蒸餾水，充分混勻后，加入l mL 0.75 mmol/L硫酸亞鐵溶液（FeSO4·7H2O）混勻，再加入l mL體積分數(shù)0.01%雙氧水（H2O2），于37℃水浴60 min，以蒸餾水作參比，在510 nm處測其吸光值，所測得的數(shù)據(jù)為損傷管的吸光值A(chǔ)（損）；以l mL樣品液代替l mL蒸餾水則測得樣品的吸光值A(chǔ)（樣）；用l mL蒸餾水代替l mL雙氧水測得的吸光值為A（未損傷）。重復3次。清除率按下式計算：

1.2.3 DPPH自由基清除能力測定[10-11]吸取樣品液各100 μL，加入100 μL DPPH溶液，混勻。室溫避光反應(yīng)30 min后于517 nm處測定其吸光度；同法吸取100 μL水，加入100 μL DPPH溶液，反應(yīng)作為對照管。并以VC作陽性對照。每份樣品平行測定3次，根據(jù)下述公式計算清除率。結(jié)果通過SPSS統(tǒng)計軟件分析標準差（SD）及Duncan’s新復極差檢驗。DPPH清除率（%）=（1-（A樣+DPPH-A樣）/A對照）×100，式中，A樣+DPPH為樣品與DPPH反應(yīng)后吸光度（即100 μL樣品+100 μL的DPPH的吸光度），A對照為DPPH不加樣品時的吸光度（即100 μL水+100 μL的DPPH的吸光度），A樣為樣品不加DPPH時的吸光度（即100 μL樣品+100 μL無水乙醇的吸光度）。

1.2.4超氧陰離子自由基清除能力測定采用鄰苯三酚自氧化法測定樣品對超氧自由基的清除作用。在11個試管中各取9 mL 0.01mol/L磷酸鹽緩沖液（pH 8.2）與l mL樣品液混合，25℃恒溫水浴15 min。取3 mL混合液于5 mL試管中，加入0.l mL 的45 mmol/L鄰苯三酚，搖勻，在第四分鐘加入濃鹽酸1滴終止反應(yīng)，于325 nm處測定樣品吸光值（A1），同時分別測定不加鄰苯三酚的樣品液和磷酸鹽混合液的吸光值（A2）和以l mL溶劑代替樣品液的磷酸鹽和鄰苯三酚混合液的吸光值（A3），重復3次。結(jié)果計算：式中，A1為樣品與鄰苯三酚反應(yīng)后吸光度，A2為不加鄰苯三酚的樣品液和磷酸鹽混合液的吸光值，A3以l mL溶劑代替樣品液的磷酸鹽和鄰苯三酚混合液的吸光值。

1.2.5 ORAC清除能力測定在96孔板各微孔中分別加入待測樣品20 μL后添加緩沖溶液20 μL 及FL 20 μL，震蕩，在37℃下預(yù)置5 min后，用多道移液器迅速在各孔中加入AAPH 140 μL啟動反應(yīng)，并將微孔板置于熒光分析儀中在37℃下以激發(fā)波長485 nm，發(fā)射波長538 nm進行連續(xù)測定，每2 min測定一次各孔熒光強度，測定時間一般設(shè)定在熒光衰減呈基線后為止。ORAC實驗需要設(shè)定兩種對照，即沒有添加自由基的FL熒光自然衰減對照（-AAPH）和沒有抗氧化劑存在時的自由基作用對照（+AAPH）。樣品的抗氧化能力與自由基作用下熒光衰退曲線的延緩部分面積（NetAUC）直接相關(guān)。

1.2.6亞油酸體系清除能力測定采用硫氰酸鐵鹽（FTC）比色法，分別于8個試管中各加入1.0 mL的樣品溶液，2.0 mL 0.05 mol/L pH7.0的磷酸鹽緩沖液，1.0 mL含體積分數(shù)2.5%亞油酸的無水乙醇溶液，1.0 mL蒸餾水，混勻后，將試管密封，并避光，置于40℃恒溫箱中反應(yīng)，同時以乙醇做空白。在4.85 mL體積分數(shù)75%的乙醇中加入50 μL亞油酸乳化液，混勻后加入50 μL質(zhì)量分數(shù)30%的硫氰酸氨，再加入50 μL 0.02 mol/L的氯化亞鐵溶液（含質(zhì)量分數(shù)3.5%鹽酸），3 min后于500 nm下測定反應(yīng)液的吸光度，亞油酸氧化程度以A500 nm表示。t時刻的過氧化值以t-t0表示，其中t0為0時刻的過氧化值，每24 h測定一次。以反應(yīng)240 h時的氧化程度計算各樣品的抗氧化能力，抑制率（%）如下式。

1.2.7純豬油清除能力測定根據(jù)國標GB/ T5009.37-2003，采用烘箱強化氧化法測定油脂的過氧化值（POV）。（1）油脂自氧化：稱取剛煉制冷卻后的新鮮豬油9份（40 g/份）至錐形瓶中，分別按油質(zhì)量的1%、2%、3%、4%、5%添加樣品，混合均勻，置于60℃恒溫烘箱中，每隔24 h攪拌一次，并交換其在烘箱中的位置，48 h取樣一次，連續(xù)取樣2周。（2）測定過氧化值（POV）：稱取2.00～3.00 g混勻的試樣，置于250 mL碘量瓶，加30 mL CHCl3一冰乙酸混合液（2/3，V/V），使試樣完全溶解。加入1.00 mL飽和KI溶液，塞上瓶蓋，并輕輕振搖0.5 min，于暗處放置3 min，取出加100 mL水，搖勻，立即用硫代硫酸鈉標準滴定液（0.002 mol/L）滴定，至淡黃色時，加1 mL淀粉指示液（10 g/L），繼續(xù)滴定至藍色消失為終點。取相同量CHC13-冰乙酸溶液、KI、水，按相同方法作試劑空白試驗。X1（過氧化值g/hg）=（C×V× 0.126 9）/m×100，X2=X1×78.8，C—硫代硫酸鈉溶液濃度（mol/L），V—滴定時消耗的硫代硫酸鈉溶液體積減去空白消耗硫代硫酸鈉溶液體積（mL），m，試樣的質(zhì)量g，0.126 9，與1 mL硫代硫酸鈉標準滴定溶液（濃度：1 mol/l）相當?shù)獾馁|(zhì)量，單位為克（g），78.8，換算因子，計算結(jié)果保留2位有效數(shù)字[12]。

1.2.8 PC12細胞氧化損傷體系清除能力測定PC12細胞培養(yǎng)采用高糖DMEM培養(yǎng)基（體積分數(shù)10%胎牛血清、100 μg/mL鏈霉素和100 U/mL青霉素）培養(yǎng)，飽和濕度培養(yǎng)箱中37℃、體積分數(shù)5% CO2。單層培養(yǎng)，使用質(zhì)量分數(shù)0.25%胰蛋白酶液消化，進行傳代培養(yǎng)；噻唑藍（MTT）法測定細胞存活率：參考郭旭的方法，將處于對數(shù)生長期的PC12細胞制備成一定密度的細胞懸液，每孔100 μL，接種于96孔板中，置于飽和濕度培養(yǎng)箱中37℃、5% CO2培養(yǎng)24 h，倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)和數(shù)目，拍照（x200），終止培養(yǎng)前移去培養(yǎng)液，再加入H2O2溶液，100 μL/孔，繼續(xù)培養(yǎng)2 h，倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)和數(shù)目，拍照（x200），棄培養(yǎng)液，再向每孔中加入5 mg/mL MTT溶液20 μL，置于飽和濕度培養(yǎng)箱中37℃、5% CO2繼續(xù)培養(yǎng)4 h，移去培養(yǎng)液，向每孔中加入150 μL DMSO溶液，振蕩10 min，用酶標儀測定96孔板各孔A570 nm下的吸光值，細胞存活率，式中：A為實驗組的A570 nm；A0為對照組的A570 nm。

1.2.9數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析結(jié)果均用x±sd表示，運用SPSS 20.0軟件對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析（ANOVA），并用Tukey檢驗進行組件比較，顯著水品為P＜0.05，極顯著水平位P＜0.01。

2　結(jié)果與討論

2.1米糠堿溶醇溶物清除羥基自由基活性

鄰二氮菲-Fe2+氧化法主要用于檢測體外羥自由基的氧化作用，利用H2O2和Fe2+混合發(fā)生Fenton反應(yīng)，生成具有很高反應(yīng)活性的·OH，F(xiàn)e2+是催化劑，鄰二氮菲-Fe2+水溶液被羥基自由基氧化為鄰二氮菲-Fe3+后，使其在510 nm最大吸收峰消失，從而根據(jù)該波長下吸光度變化來判斷提取物清除羥基的能力。以VC作對比，研究不同質(zhì)量濃度（0.1～1 g/ mL）米糠堿溶醇溶物對·OH的清除能力，結(jié)果見圖1。由圖1可知，隨樣品質(zhì)量濃度的增加，米糠堿溶醇溶物對·OH的清除率呈現(xiàn)上升趨勢，并且具有明顯的量效關(guān)系。當質(zhì)量濃度為0.2 g/mL時，其對· OH的清除率超過50%。VC在低質(zhì)量濃度（0.1～ 0.6）g/mL范圍內(nèi)，對·OH的清除率隨濃度增加上升很快，而濃度在（0.6～1.0）g/mL時，清除率變化不大。經(jīng)分析可知：VC的IC50約為0.25 mg/mL，酶解物的IC50約為0.2 g/mL。

圖1　米糠堿溶醇溶物清除羥基自由基活性測定Fig. 1 Hydroxyl radical scavenging activity assay for the alkali and alcohol soluble extracts from　 the defatted rice bran

2.2米糠堿溶醇溶物清除DPPH自由基活性

二苯代苦味?；杂苫―PPH·）在結(jié)構(gòu)上具有苯環(huán)的共扼和位阻及硝基的吸電子作用，是一種穩(wěn)定的自由基，廣泛應(yīng)用于測定純抗氧化劑或植物提取物的體外抗氧化活性。其乙醇溶液呈紫紅色，在517 nm處有一強吸收。當有抗氧化劑存在時，由于與其單電子配對而使其吸收逐漸消失，紫紅色變淡，相應(yīng)在517 nm處的最大吸收峰會減弱，因而可用光化學方法進行測定。結(jié)果如圖2，由圖2可知：在0～1 mg/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，米糠堿溶醇溶物隨濃度升高，清除率先增大后降低，其IC50為0.1 mg/ mL。當質(zhì)量濃度為0.6 mg/mL時，酶解產(chǎn)物的DPPH清除率可達90%。VC在0～10 μg/mL隨質(zhì)量濃度成線性變化，在9.0 μg/mL時即達80%。

圖2　米糠堿溶醇溶物清除DPPH活性測定Fig. 2 DPPH scavenging activity assay for the alkali and alcohol soluble extracts from the defatted rice bran

2.3米糠堿溶醇溶物清除超氧陰離子自由基活性

采用鄰苯三酚自氧化法測定樣品對超氧自由基的清除作用，超氧陰離子自由基O2-·能促進脂肪氧化，促進生物體衰老，誘發(fā)炎癥和腫瘤。鄰苯三酚自氧化法是測定清除O2-·活性的常用方法。在弱堿性介質(zhì)中（pH=8.2）鄰苯三酚會自身氧化分解產(chǎn)生O2-和有色中間產(chǎn)物，該有色中間產(chǎn)物在325 nm處有一特征吸收峰。利用O2-清除劑能使鄰苯三酚自氧化產(chǎn)物在325 nm處的吸收峰受到抑制這一特點，通過測定吸光度可以推斷清除劑對O2-的清除作用。實驗與VC作對比，研究不同質(zhì)量濃度（10～100）mg/mL堿溶醇溶物對O2-·的清除能力，結(jié)果如圖3。由圖3可知，米糠堿溶醇溶物對O2-·清除能力隨著質(zhì)量濃度的增加而增大，呈現(xiàn)量效關(guān)系。在45.00 mg/mL時，O2-清除率約為50%。VC的IC50約為0.35 mg/mL，酶解物的IC50約為45.00 mg/mL。

2.4米糠堿溶醇溶物清除ORAC清除能力測定

Oxygen radical absorbancecapacity（ORAC）方法，是目前抗氧化研究領(lǐng)域中為人們所關(guān)注的一個評價方法。該方法以偶氮類化合物AAPH作為過氧自由基來源。SodiumFluorescein為熒光指示劑，維生素E水溶性類似物Trolox為定量標準，使用熒光酶標儀進行分析。結(jié)果見圖4，由圖4可知，當樣品質(zhì)量濃度低于60 μg/mL時，樣品的ORAC值低于異VC鈉；當樣品質(zhì)量濃度高于60 μg/mL時，樣品的ORAC值與異VC鈉相當。

圖3　米糠堿溶醇溶物清除超氧陰離子活性測定Fig. 3 Superoxide anion scavenging activity assay for the alkali and alcohol soluble extracts from　 the defatted rice bran

圖4　米糠堿溶醇溶物ORAC測定Fig. 4　 ORAC determination for the alkali and alcohol soluble extracts from the defatted rice bran

2.5米糠堿溶醇溶物亞油酸體系清除能力測定

硫氰酸鐵鹽（FTC）比色法是基于在酸性條件下，脂質(zhì)氧化形成的過氧化物可將Fe2+氧化成Fe3+，然后Fe3+與硫氰酸根離子可形成在480～515 nm內(nèi)有最大吸收的紅色絡(luò)合物。通常用500 nm處吸光值的高低表示物質(zhì)抗脂質(zhì)過氧化的能力，吸光值越小，表明物質(zhì)的抗脂質(zhì)過氧化能力越強。結(jié)果見圖5，由圖5可知500 μg/mL的樣品有明顯的抗氧化效果，500 μg/mL和1 mg/mL的樣品顯著好于相同濃度的異VC鈉。

圖5　米糠堿溶醇溶物在亞油酸體系中的抗氧化測定Fig. 5　 Antioxidant activity of the alkali and alcohol soluble extracts from the defatted rice bran in linoleic System

2.6米糠堿溶醇溶物純豬油清除能力測定

測定在純豬油體系中的抗氧化效果，結(jié)果如圖6所示，由圖6可知，添加樣品的豬油的pov小于未添加樣品的豬油的pov，質(zhì)量分數(shù)5%樣品添加組的豬油的pov值明顯小于質(zhì)量分數(shù)1%樣品添加組，豬油達到相同的pov所需的天數(shù)隨著樣品濃度的增加而延長，堿溶醇溶物的抗氧化效果弱于BHA和異VC鈉。

2.7米糠堿溶醇溶物對PC12細胞氧化損傷體系清除能力測定

在倒置顯微鏡下觀察，生長狀態(tài)良好的正常細胞透明度大，呈現(xiàn)特有的細胞狀態(tài)，細胞內(nèi)顆粒少，質(zhì)膜清晰，細胞功能不良或受損時，胞質(zhì)清晰；細胞功能不良或受損時，胞質(zhì)中常出現(xiàn)空泡和其他顆粒狀物，細胞之間空隙加大，細胞表面的特化機構(gòu)消失，細胞形態(tài)可變得不規(guī)則，甚至失去原有特點。

正常培養(yǎng)的PC12細胞為貼壁細胞，呈梭狀，折光度強，成簇生長，細胞間有拉絲，見圖7（a）；H2O2損傷2 h后，PC12細胞數(shù)量明顯減少，梭狀特征逐漸消失，細胞間隙增大，貼壁能力降低，細胞變圓成簇，折光度減弱，見圖7（b）；與模型組相比，200 μmol/L的Trolox保護組的細胞原有形狀有所恢復，細胞數(shù)目增多，見圖7（c）；1 mg/mL樣品保護組的細胞原有形狀恢復更好，細胞數(shù)目增加更多，少量細胞皺縮變圓，受損程度明顯減輕，見圖7（d）。

圖6　米糠堿溶醇溶物清除豬油過氧化值測定Fig. 6　 Determination of peroxide value of lard for the alkali and alcohol soluble extracts from　 the defatted rice bran

圖7　倒置顯微鏡觀察樣品對PC12細胞氧化損傷后細胞形態(tài)的影響Fig. 7　 Inverted microscope observation of PC12 cells morphology from oxidative damage cell

由圖8（a）可知，樣品對正常的PC12細胞有明顯的毒害作用；由圖8（b）可知，PC12細胞經(jīng)樣品保護下受到H2O2氧化損傷2h，細胞存活率有一定程度的改善，隨著樣品濃度的增加，PC12細胞存活率呈現(xiàn)依次升高的趨勢，5 mg/mL的樣品的PC12細胞存活率達到82.2%，5 mg/mL的樣品抗氧化效果好于200 μmol/l的Trolox，這與倒置顯微鏡的觀察一致。

圖8　提取物對H2O2損傷PC12細胞的存活率Fig. 8 PC12 cell viability treated with the extractsl

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Antioxidant Activity of the Alkali and Alcohol Soluble Extracts from the Defatted Rice Bran

CUI Hongjun1，XU Baocai1，2，WANG Li1，HAN Yanqing2，LUO Xiaohu1，CHEN Zhengxing*1
（1. School of Food Science and Technology / National Engineering Laboratory for Cereal Fermentation Technology，Jiangnan University，Wuxi 214122，China；2. State Key Laboratory of Meat Processing and Quality Control / Jiangsu Yurun Meat Group Co，LTD. Nanjing 211806，China）

Abstract：The alkali and alcohol soluble extracts from the defatted rice bran exhibit a good antioxidant activity in vitro. The antioxidant effects of the extracted antioxidants from the defatted rice bran on scavenging free radicals and lipid peroxides aganist oxidative damage system were studied by hydroxyl radical system，DPPH radical system，superoxide anion radical system，linoleic acid system，pure lard system，ORAC system，and PC12 cells，respectively. The scavenging rate of ·OH was over 50% for the extracts of 0.2 g/mL，while the clearance rate of DPPH was as high as 90% for 0.6 mg/mL extracts. The O2-clearance rate is about 50% for the extracts of 45.0 mg/mL andbook=36,ebook=41the ORAC value reached a comparable value with sodium D-isoascorbate when the extracts concentration was larger than 60 μg/mL，In linoleic acid system，a significant antioxidant activity was observed for the extracts of 500 μg/mL. At the meanwhile，the effect was better than sodium D-isoascorbate with same concentration for the extracts of 500 μg/mL and 1 mg/mL. In lard antioxidant studies，a longer duration was required for pov growing to the same level if the lard samples added with 5% extracts. The PC12 cell viability presented a successively increasing trend when the sample concentration increased，for example，the PC12 cell viability reached to 82.2% with 5 mg/mL sample added and the antioxidant effect was better than Trolox of 200 μmol/L.

Keywords：defatted rice bran，antioxidant，DPPH，O2-，linoleic acid，lard，ORAC，PC12

*通信作者：陳正行（1960—），男，江蘇無錫人，工學博士，教授，博士研究生導師，主要從事糧食精深加工研究。E-mail：zxchen2007@126.com

基金項目：國家863計劃項目（2013AA102200）；國家自然科學基金項目（31101383）；江蘇省科技支撐計劃項目（BE2012404）。

收稿日期：2014-11-24

中圖分類號：TS 201.2

文獻標志碼：A

文章編號：1673—1689（2016）01—0035—07