林榮萬 賴圣明 黃中超

中山大學(xué)附屬第六醫(yī)院檢驗科 廣東廣州 510655

尿蛋白三種檢驗方法比較

林榮萬 賴圣明 黃中超

中山大學(xué)附屬第六醫(yī)院檢驗科 廣東廣州 510655

目的尿蛋白三種檢驗方法比較。方法選取我院2015年3月連續(xù)5d隨機(jī)采集的300例住院病人尿液標(biāo)本為研究對象，采用干化學(xué)法、加熱乙酸法及基水楊酸法檢測尿液標(biāo)本，并比較三種檢驗方法的檢查結(jié)果。結(jié)果干化學(xué)法診斷陽性率31.33%高于加熱乙酸法22.33%與磺基水楊酸法陽性率23.33%，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。加熱乙酸法與磺基水楊酸法陽性率比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。干化學(xué)法靈敏度95.65%、誤診率12.12%高于加熱乙酸法83.82%、4.31%，特異度87.88%%、漏診率4.35%%低于加熱乙酸法95.69%、16.18%，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論尿蛋白陽性結(jié)果在臨床上具有重要意義，三種尿蛋白檢驗方法各有優(yōu)劣，相輔相成，應(yīng)依據(jù)具體情況選擇定性檢查方法，注意質(zhì)量管理，持續(xù)多次驗證，以降低方法學(xué)造成的誤診率與漏診率，提高結(jié)果準(zhǔn)確性。

尿蛋白；干化學(xué)法；加熱乙酸法；磺基水楊酸法

醫(yī)院中最常用的檢驗項目之一即為尿常規(guī)檢查，其可反映身體健康狀況的基本指標(biāo)，可用于泌尿系統(tǒng)疾病的篩檢[1]。在正常生理狀態(tài)下，分子質(zhì)量＜4萬U的低分子蛋白質(zhì)能夠通過濾過膜，但腎小球濾過膜能夠有效阻止分子質(zhì)量＞4萬U的蛋白質(zhì)通過，且通過濾過膜的蛋白質(zhì)可被近曲小管重吸收，因此健康成人每日排出的蛋自質(zhì)含量極少（30-130mg），一般不能用常規(guī)定性方法檢測出來[2]。檢測尿蛋白可早期診斷腎臟及有關(guān)疾病引發(fā)的腎損害，是泌尿系統(tǒng)疾病實驗室檢查的重要內(nèi)容，如尿微量白蛋白是臨床應(yīng)用較多的早期糖尿病腎病診斷指標(biāo)，可提示腎小球早期損害[3]；糖尿病中亦有不同程度的尿微量白蛋白，可提示糖尿病腎病[4]，因此，定性分析尿蛋白在臨床診斷中具有重要意義。本研究主要探討干化學(xué)法、加熱乙酸法及磺基水楊酸法三種檢驗方法比較。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本 收集住院患者送檢的新鮮尿液。

1.2 方法（1）干化學(xué)法。測定尿液pH，調(diào)至pH在5-6之間。檢測時將試帶浸人尿中立即取出，并吸去多余尿液，于1min內(nèi)與標(biāo)準(zhǔn)色板比色。（2）加熱乙酸法。大試管1支，加清晰尿液約5ml或至試管高度2/3處。加熱時斜持試管下端，使用酒精燈加熱尿液上1/3段，煮沸即止。然后將試管輕輕直立，置于黑色背景下，觀察煮沸部分是否有渾濁。加酸后再加熱滴加2 -4滴0.85mmol/L乙酸溶液，煮沸后立即觀察結(jié)果。（3）磺基水楊酸法。留取2 mI離心后上清尿液于小試管中，滴加2滴10%磺柳酸試劑，形成界面，觀察尿液渾濁度變化、有無沉淀生成，并記錄結(jié)果。

1.3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) 無渾濁為陰性（-）；輕微渾濁，黑色背景下隱約可見為弱陽性±；呈白色云霧狀渾濁陽性+；呈顆粒狀白色渾濁為陽性++；呈絮片狀渾濁或沉淀為陽性+++；大量絮片狀并有凝塊沉淀為陽性++++。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 選用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS15.0對研究數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和處理，計數(shù)資料采取率（%）表示，組間對比進(jìn)行x22檢驗，以P＜0.05為有顯著性差異和統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 干化學(xué)法、加熱乙酸法、磺基水楊酸法陽性率比較 干化學(xué)法診斷陽性率高于加熱乙酸法與磺基水楊酸法陽性率，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。加熱乙酸法與磺基水楊酸法陽性率比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 干化學(xué)法、加熱乙酸法、磺基水楊酸法陽性率比較

2.2 磺基水楊酸法（設(shè)為參考方法）、干化學(xué)法、加熱乙酸法檢驗結(jié)果比較 干化學(xué)法靈敏度、誤診率高于加熱乙酸法，特異度、漏診率低于加熱乙酸法，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 磺基水楊酸法（設(shè)為參考方法）、干化學(xué)法、加熱乙酸法檢驗結(jié)果比較

3 討論

尿液干化學(xué)法是目前臨床上檢測尿蛋白的方法中開展最廣泛方法，，在實驗室尿液檢查占據(jù)重要地位，方法較為方便快捷，且速度快，成本低[5]，但影響因素較多；如堿性、分泌物、色素、部分鹽類或含有較多細(xì)胞成分時，采用尿液干化學(xué)法檢測可引起假陽性，且因為溴酚藍(lán)只與白蛋白結(jié)合，不與黏蛋白、球蛋白等大分子蛋白發(fā)生作用，從而對結(jié)果準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響；另外，當(dāng)樣本量較高時，若檢測不及時，易產(chǎn)生絮狀物或沉淀，影響測定結(jié)果，故尿液干化學(xué)法只能作為一種過篩試驗，在臨床檢測中有一定局限[6]。加熱乙酸法是是傳統(tǒng)檢測尿蛋白的經(jīng)典方法，加熱煮沸可使蛋白質(zhì)凝固變性，再加酸使尿液pH下降達(dá)蛋白質(zhì)等電點，從而促進(jìn)變性蛋白質(zhì)的沉淀，并可消除尿液中某些磷酸鹽受熱析出結(jié)晶，進(jìn)而避免混濁的干擾，結(jié)果準(zhǔn)確，尿蛋白特異性強(qiáng)，干擾因素少，檢出敏感度低于磺基水楊酸法，可作為蛋白質(zhì)定性實驗的確證實驗，但該法操作繁瑣[7]?；腔畻钏岱ň哂胁僮骱啽?、快速、敏感度高等特點，但干擾因素較多；檢測時易受干擾因素影響，造成假性結(jié)果。

本研究主要探討了尿蛋白三種檢驗方法。干化學(xué)法診斷陽性率高于加熱乙酸法與磺基水楊酸法陽性率，干化學(xué)法靈敏度、誤診率高于加熱乙酸法，特異度、漏診率低于加熱乙酸法，三種尿蛋白檢驗方法各有優(yōu)劣；當(dāng)尿酸鹽含量較高，尿呈酸性反應(yīng)，磺基水楊酸法檢測結(jié)果比實際情況低，易呈假陽性。使用造影劑時，加熱醋酸法、磺基水楊酸法均會假陽性反應(yīng)，需選擇干化學(xué)法檢測；若大量使用青霉素，磺基水楊酸法易呈假陽性反應(yīng)；當(dāng)尿呈強(qiáng)堿性時，加熱醋酸法與磺基水楊酸法呈假陰性反應(yīng)[8。當(dāng)尿蛋自僅為一些特殊蛋白質(zhì)磺基水楊酸法敏感度低。因此，在尿蛋白定性時，應(yīng)綜合分析各種因素，依據(jù)具體情況選擇適宜的方法。王琳[9]等研究三種尿蛋白定性方法的對比評價結(jié)果顯示，干化學(xué)法陽性率最高，為30.8%，且靈敏度較高，但誤診率較高，加熱乙酸法特異度最高，三種方法各有優(yōu)缺點，應(yīng)綜合分析，慎重選擇檢測方法，與本研究結(jié)果相符。

綜上，尿蛋白陽性結(jié)果在臨床上具有重要意義，三種尿蛋白檢驗方法各有優(yōu)劣，相輔相成，檢查時應(yīng)持續(xù)多次驗證，以減少誤診率與漏診率，提高結(jié)果準(zhǔn)確性。

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1672-5018（2016）07-257-02