李 強(qiáng)，李 杰，桑 鋒，劉 真，岳靜宇，沈俊嶺，錢潔玉，何書杰，徐立然

450000河南省鄭州市，河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院艾滋病臨床研究中心，河南省病毒性疾病中醫(yī)藥防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

?

·論著·

HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴細(xì)胞活化亞群與病毒載量的相關(guān)性

李 強(qiáng)，李 杰，桑 鋒，劉 真，岳靜宇，沈俊嶺，錢潔玉，何書杰，徐立然

450000河南省鄭州市，河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院艾滋病臨床研究中心，河南省病毒性疾病中醫(yī)藥防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

【摘要】目的探討HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴細(xì)胞活化亞群與病毒載量相關(guān)性。方法2012年6—8月選擇河南省某AIDS高發(fā)地區(qū)HIV感染者322例和AIDS患者87例為研究對(duì)象，分別采用流式細(xì)胞儀和全自動(dòng)病毒載量?jī)x檢測(cè)HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴細(xì)胞及其活化亞群和血漿病毒載量，根據(jù)病毒載量水平將研究對(duì)象分為Ⅰ～Ⅳ組。結(jié)果HIV感染者與AIDS患者T細(xì)胞相對(duì)值比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。HIV感染者淋巴細(xì)胞絕對(duì)值和相對(duì)值T細(xì)胞絕對(duì)值T細(xì)胞絕對(duì)值T細(xì)胞絕對(duì)值和相對(duì)值T細(xì)胞絕對(duì)值均高于AIDS患者，T細(xì)胞相對(duì)值低于AIDS患者，輔助性T細(xì)胞與抑制性T細(xì)胞比值高于AIDS患者，低于AIDS患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。各組淋巴細(xì)胞絕對(duì)值和相對(duì)值T細(xì)胞相對(duì)值T細(xì)胞相對(duì)值T細(xì)胞絕對(duì)值和相對(duì)值及比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義T細(xì)胞相對(duì)值T細(xì)胞相對(duì)值及與病毒載量水平呈正相關(guān)(rs=0.128、0.291、0.409，P<0.05)；T細(xì)胞絕對(duì)值和相對(duì)值與病毒載量水平呈負(fù)相關(guān)(rs=-0.246、-0.318、-0.297、-0.184、-0.204，P<0.05)。結(jié)論HIV感染者和AIDS患者T淋巴細(xì)胞活化過程發(fā)生變化；隨著病毒載量水平變化，HIV感染者和AIDS患者的T淋巴細(xì)胞活化亞群水平也不同。

【關(guān)鍵詞】獲得性免疫缺陷綜合征；HIV；T淋巴細(xì)胞亞群；病毒載量

李強(qiáng)，李杰，桑鋒，等.HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴細(xì)胞活化亞群與病毒載量的相關(guān)性[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2016，19(8)：869-872.[www.chinagp.net]

Li Q，Li J，Sang F，et al.Correlation between peripheral blood tlymphocyte activation subgroup and viral load in HIV/AIDS patients[J].Chinese General Practice，2016，19(8)：869-872.

淋巴細(xì)胞亞群的異常激活改變是反映HIV感染者和AIDS患者機(jī)體免疫狀態(tài)和病情進(jìn)展的最重要指標(biāo)。免疫系統(tǒng)的異?；罨馨图?xì)胞亞群重新分配、細(xì)胞因子表達(dá)混亂、細(xì)胞功能障礙和異常死亡等，其中淋巴細(xì)胞協(xié)同共刺激分子CD28、T淋巴細(xì)胞激活分子CD38的表達(dá)水平可反映HIV感染者和AIDS患者免疫細(xì)胞的異常激活程度，是AIDS疾病進(jìn)展和高效抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療(HAART)效果監(jiān)測(cè)的重要指標(biāo)之一[1-2]。本研究對(duì)河南地區(qū)409例HIV感染者和AIDS患者病毒載量與T淋巴細(xì)胞亞群的相關(guān)性進(jìn)行分析，以對(duì)臨床治療效果評(píng)價(jià)提供指導(dǎo)。

1對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象于2012年6—8月選擇河南省某AIDS高發(fā)地區(qū)HIV感染者322例和AIDS患者87例為研究對(duì)象，其中男283例，女126例；年齡18～65歲；感染途徑為有償獻(xiàn)血246例(60.2%)，輸血17例(4.2%)，性傳播114例(27.9%)，不詳32例(7.7%)。HIV感染者和AIDS患者均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)AIDS診療指南的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。

1.2方法

1.2.1主要儀器與試劑FACS Calibur流式細(xì)胞儀、Trucount管(美國(guó)BD公司)；COBAS AmpliPrep/COBAS Taqman全自動(dòng)病毒載量?jī)x(德國(guó)Roche公司)；抗-FITC-CD3/抗-PE-CD4/抗-PerCP-CD45/抗-APC-CD8混合抗體、FITC-CD8抗體、PerCP-CD28、APC-CD38抗體、FITC-CD4抗體(美國(guó)BD公司)；HIV-Ⅰ型核酸定量檢測(cè)試劑盒(德國(guó)Roche公司)。

1.2.4血漿病毒載量測(cè)定取2～5 ml EDTAK3抗凝全血，室溫2 000 r/min離心10 min，將血漿分離移至無(wú)菌凍存管中，-76 ℃保存?zhèn)溆?，待樣本收集完全后?7 ℃震蕩助融樣本，使用同批試劑上機(jī)檢測(cè)。取1 100 μl血漿，在全自動(dòng)病毒載量?jī)x上定量檢測(cè)血漿中HIV RNA，其步驟依次為：樣品制備并分離HIV-Ⅰ型RNA，RNA反轉(zhuǎn)錄形成cDNA，靶cDNA擴(kuò)增以及裂解的、靶特異性的、雙標(biāo)記寡核苷酸探針的檢測(cè)。儀器采用Real-time PCR(探針法)擴(kuò)增HIV gag區(qū)，可檢測(cè)HIV-Ⅰ型M組的A-H亞型。實(shí)驗(yàn)設(shè)陰性、弱陽(yáng)性和強(qiáng)陽(yáng)性質(zhì)控品各一個(gè)，使用內(nèi)標(biāo)法對(duì)樣本進(jìn)行定量檢測(cè)，檢測(cè)線性范圍為40～107copies/ml。根據(jù)病毒載量進(jìn)行分組，未檢測(cè)到HIV RNA為Ⅰ組，低于檢測(cè)下限為Ⅱ組，40～103copies/ml為Ⅲ組，>103copies/ml為Ⅳ組。

2結(jié)果

2.2病毒載量AIDS患者病毒載量(lgcopies/ml)為2.71(4.71)，高于HIV感染者的病毒載量1.6(2.5)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-4.862，P<0.01)。

表1　HIV感染者與AIDS患者外周血T淋巴細(xì)胞活化亞群比較

注：a為Z值；H/S=輔助性T細(xì)胞與抑制性T細(xì)胞比值

表2　不同病毒載量水平患者外周血T淋巴細(xì)胞活化亞群比較

注：與Ⅰ組比較，aP<0.05；與Ⅱ組比較，bP<0.05；與Ⅲ組比較，cP<0.05；d為χ2值

3討論

作者貢獻(xiàn)：李強(qiáng)、徐立然進(jìn)行課題設(shè)計(jì)與實(shí)施、資料收集整理、撰寫論文、成文并對(duì)文章負(fù)責(zé)；李杰、桑鋒、劉真、岳靜宇、沈俊嶺、錢潔玉、何書杰進(jìn)行課題實(shí)施、評(píng)估、資料收集；李強(qiáng)、徐立然進(jìn)行質(zhì)量控制及審校。

本文無(wú)利益沖突。

參考文獻(xiàn)

[3]中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)艾滋病學(xué)組.艾滋病診療指南(2011版)[J].中華臨床感染病雜志，2011，4(6):321-330.

[4]張曉梅，周靈玲，趙志鋼，等.艾滋病病毒感染者T淋巴細(xì)胞亞群的改變[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2007，16(23)：3371.

(本文編輯：吳立波)

Correlation Between Peripheral Blood Tlymphocyte Activation Subgroup and Viral Load in HIV/AIDS Patients

LIQiang，LIJie，SANGFeng，etal.

DepartmentofAcquiredImmuneDeficiencySyndromeTreatmentandResearchCenter，theFirstAffiliatedHospitalofHenanUniversityofTCM，Zhengzhou450000，China

【Abstract】ObjectiveTo investigate the correlation between peripheral blood T lymphocyte activation subgroup expression and viral load in HIV/AIDS patients.MethodsFrom June to August in 2012，we selected 322 HIV-infected patients and 87 AIDS patients from an AIDS high-prevalence area in Henan Province.Peripheral blood T lymphocyte and its activation subgroup and plasma viral load of HIV-infected patients and AIDS patients were detected respectively using flow cytometry and full-automatic viral load instrument.According to viral load level，we divided the subjects into Ⅰ-Ⅳ group.ResultsHIV-infected patients and AIDS patients were not significantly different in the relative value of T cell and (P>0.05).HIV-infected patients were higher in the absolute and relative value of lymphocyte，the absolute value of T cell，the absolute value of T cell，the absolute and relative value of T cell and the absolute value of T cell and lower in the relative value of T than AIDS patients (P<0.05);HIV-infected patients were higher in the ratio of helper T cell and suppressor T cell (H/S) and and lower in than AIDS patients (P<0.05).The four groups were significantly different in the absolute value and relative value of lymphocyte，the relative value of T cell，the relative value of T cell，the absolute and relative value of T and (P<0.05).The relative value of T cell ，relative value of T cell and ，were positively correlated with the viral load level (rs=0.128，0.291，0.409；P<0.05).The absolute and relative value of T，and were negative correlated with the viral load level(rs=-0.246，-0.318，-0.297，-0.184，-0.204；P<0.05).ConclusionThere are changes in the activated process of T lymphocyte in HIV-infected and AIDS patients;with the change of viral load level，difference occurs between HIV-infected and AIDS patients in the level of T lymphocyte activation subgroup.

【Key words】Acquired immunodeficiency syndrome ；HIV；T-lymphocyte subsets；Viral load

(收稿日期：2015-05-16；修回日期：2015-12-08)

【中圖分類號(hào)】R 512.91

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

doi：10.3969/j.issn.1007-9572.2016.08.001

通信作者：徐立然，450000河南省鄭州市，河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院艾滋病臨床研究中心，河南省病毒性疾病中醫(yī)藥防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室；E-mail：strongmz@163.com

基金項(xiàng)目：國(guó)家“艾滋病和病毒性肝炎等重大傳染病防治”科技重大專項(xiàng)“十二五”計(jì)劃課題(2012ZX10004905-003-003，2012ZX10005010-001)；國(guó)家中醫(yī)藥管理局臨床科研基地科研專項(xiàng)(JDZX2012023)；河南省高等學(xué)校青年骨干教師資助計(jì)劃(2013GGJS-095)；河南省基礎(chǔ)與前沿計(jì)劃項(xiàng)目(132300413215)

·AIDS抗病毒治療專題研究·