胡蝶+劉艷杰

[摘要] 目的 探究肺炎支原體感染后患兒血清免疫球蛋白及T淋巴細(xì)胞亞群的動(dòng)態(tài)變化分析情況。方法 便利選取該院2014年4月—2016年4月期間確診的肺部支原體感染患兒70例為觀察組，選取同時(shí)期于該院體檢的健康小兒45名為對(duì)照組，抽取兩組研究對(duì)象外周血以免疫散射比濁法和流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。比較兩組在IgG、IgM、IgA血清免疫球蛋白與CD3+、CD4+、CD4+/CD8+ T淋巴細(xì)胞亞群的變化情況。結(jié)果 觀察組患兒血清免疫球蛋白檢測(cè)中IgG、IgM及IgA水平均低于對(duì)照組健康小兒。觀察組急性期患兒血清免疫蛋白中IgG（9.12±1.48）g/L、IgM（0.76±0.41）g/L、IgA（1.03±0.19）g/L與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且觀察組急性期IgG、IgM、IgA水平略低于恢復(fù)期（P<0.05）。②觀察組患者各時(shí)期T淋巴細(xì)胞亞群中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均分別低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組各時(shí)期CD8+（34.27±3.48）%均高于對(duì)照組，且觀察組急性期CD3+（59.56±7.34）%、CD4+（40.38±7.23）%、CD4+/CD8+（1.14±0.53）%與恢復(fù)期比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 小兒肺炎支原體感染后，在急性期與恢復(fù)期的血清免疫球蛋白及T淋巴細(xì)胞亞群均出現(xiàn)不同幅度的變化，MP與機(jī)體免疫反應(yīng)存在相關(guān)，可據(jù)此做出相對(duì)應(yīng)的MP診治方案。

[關(guān)鍵詞] 肺炎；支原體感染；血清免疫球蛋白；T淋巴細(xì)胞亞群；動(dòng)態(tài)變化

[中圖分類號(hào)] R4 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2017）04（c）-0030-03

[Abstract] Objective To study the dynamic changes of serum immune globulin and t lymphocyte subsets in children after the mycoplasma pneumoniae infection. Methods 70 cases of children with mycoplasma pneumoniae infection diagnosed in our hospital from April 2014 to April 2016 were conveniently selected as the observation group， and 45 cases of healthy children in our hospital at the same period were selected as the control group， and the peripheral blood was tested by the scattering immunoturbidimetric assay and flow cytometry， and the changes of IgG，IgM，IgA serum immune globulin and CD3+，CD4+，CD4+/CD8+ T lymphocyte subsets were compared between the two groups. Results The IgG， IgM and IgA in the serum immune globulin test in the observation group were respectively （9.12±1.48）g/L， （0.76±0.41）g/L and （1.03±0.19）g/L， which were lower than those in the control group， and the differences between groups were statistically significant（P<0.05）， and the IgG， IgM， IgA levels in the acute phase were slightly lower than those in the recovery phase（P<0.05）， and the CD3+，CD4+，CD4+/CD8+ in the T lymphocyte subsets in various phases in the observation group were respectively lower than those in the control group， and the differences between groups were statistically significant（P<0.05）， and the CD8+（34.27±3.48）% in the observation group was higher than that in the control group， and the difference in the CD3+（59.56±7.34）%，CD4+（40.38±7.23）%，CD4+/CD8+（1.14±0.53）% in the acute phase in the observation group was bigger than that in the recovery stage（P<0.05）. Conclusion The serum immune globulin and t lymphocyte subsets have different degrees of changes in the acute phase and recovery phase after the infection of mycoplasma pneumoniae in children and the MP is correlated with the organ immune reaction， and we can make the corresponding MP diagnosis and treatment plan on the basis of the above.

[Key words] Pneumonia； Mycoplasma infection； Serum immune globulin； T lymphocyte subsets； Dynamic change

小兒肺炎支原體感染（MP）是好發(fā)于5～15歲兒童的感染性疾病，病癥臨床表現(xiàn)為咳嗽、咳痰、咽痛等癥狀，嚴(yán)重時(shí)可引發(fā)心腦血管疾病等諸多并發(fā)癥，威脅到幼兒的身體健康[1]。當(dāng)患兒肺部感染支原體引發(fā)炎癥后，患兒身體免疫機(jī)能受到波及。國(guó)內(nèi)外有關(guān)研究表明肺炎支氣管感染與細(xì)胞免疫及體液免疫存在相關(guān)聯(lián)系[2]。為探究肺部支原體感染與患兒免疫的相關(guān)聯(lián)系，該研究便利選擇2014年4月—2016年4月期間收治的70例肺部支原體感染患兒血液中血清免疫球蛋白（Ig）及T淋巴細(xì)胞亞群的變化進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

參照《實(shí)用兒科學(xué)》中關(guān)于小兒肺部支原體感染判定標(biāo)準(zhǔn)[3]，便利選取于該院兒科確診收治的肺部支原體感染患兒70例為研究對(duì)象，將其作為觀察組，其中男性43例，女性27例。年齡在1～13歲，平均年齡（5.9±1.2）歲；病程1～10 d，平均病程（3.9±2.1）年；其中急性期患兒43例，恢復(fù)期患兒27例，且患兒均表現(xiàn)出咳嗽、咳痰、發(fā)熱等肺部炎癥癥狀，經(jīng)影像學(xué)方式檢測(cè)肺部均出現(xiàn)不同程度的陰影，肺部可聞及中小水泡音。選取同時(shí)期于該院體檢的健康小兒45名作為對(duì)照組，其中男性31名，女性14名。年齡在1～11歲，平均年齡（6.2±1.4）歲。兩組研究對(duì)象在年齡、性別等基本資料的對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：觀察組：確診為肺部支原體感染的患兒；年齡在1～15歲；經(jīng)患兒家屬知情并同意參與。排除標(biāo)準(zhǔn)：觀察組：其他原因引起免疫系統(tǒng)損傷；患有心肝腎等器官性疾??；近2周有呼吸道感染；患有其他急、慢性疾病、抽血采樣前經(jīng)過抗肺炎支原體感染相關(guān)治療[4]。

1.3 檢測(cè)方法

分別采集觀察組患兒與對(duì)照組小兒外周靜脈血5 mL，并將其分為兩管，一管2 mL靜脈血注入EDTA-K 2 抗凝管中，室溫保存用于T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)；另一管3 mL靜脈血注入真空采血管，經(jīng)離心后采集血清用于免疫球蛋白檢測(cè)。采用免疫散射比濁法對(duì)比兩組患兒血清中免疫球蛋白IgG、IgM、IgA水平，應(yīng)用SIEMENS BN2特定蛋白分析儀以及配套試劑進(jìn)行檢測(cè)。

將抽取的抗凝血在 24 h內(nèi)采用BD FACSCanto流式細(xì)胞儀對(duì)T淋巴細(xì)胞亞群進(jìn)行檢測(cè)。加入研究對(duì)象抗凝血50 μL，加入六色熒光抗體10 μL，混勻后避光放置于室溫孵育15 min，加1 mL溶血素，避光放置15 min，1 500 r/min離心10 min，棄上清，加入200 μL PBS上機(jī)檢測(cè)，設(shè)門分析各淋巴細(xì)胞亞群。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

該研究采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量數(shù)據(jù)采用（x±s）表示，行t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 比較兩組血清免疫球蛋白水平

觀察組患兒血清免疫球蛋白檢測(cè)中IgG、IgM及IgA水平均低于對(duì)照組健康小兒。觀察組急性期患兒血清免疫蛋白中IgG、IgM、IgA與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且觀察組急性期IgG、IgM、IgA水平略低于恢復(fù)期（P<0.05）。見表1。

2.2 比較兩組T淋巴細(xì)胞亞群變化情況

觀察組患者各時(shí)期T淋巴細(xì)胞亞群中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均分別低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組各時(shí)期CD8+均高于對(duì)照組，且觀察組急性期CD3+、CD4+、CD4+/CD8+與恢復(fù)期比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

肺炎支氣管感染在兒童肺炎中所占比例達(dá)到10%～40%[5]，特別是嬰幼兒，因其免疫功能較差，易受到支原體攻擊與感染。若少兒長(zhǎng)期反復(fù)受到肺炎支原體感染，引起患兒生長(zhǎng)發(fā)育受阻，嚴(yán)重影響患兒的身心健康發(fā)展。因肺部支原體引發(fā)炎癥，機(jī)體炎癥因子水平迅速升高，宿主細(xì)胞受到攻擊后影響整個(gè)機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生變化。因此，對(duì)肺炎支原體及患兒免疫系統(tǒng)的相關(guān)性及影響的研究是診治小兒肺炎支原體感染的關(guān)鍵。

人體免疫功能狀態(tài)主要通過體液及細(xì)胞免疫反應(yīng)出來(lái)，其中血清免疫球蛋白與T淋巴細(xì)胞亞群是兩項(xiàng)表現(xiàn)敏感的判定指標(biāo)。血清免疫球蛋白能夠高選擇性的與特異性抗原結(jié)合，是機(jī)體免疫系統(tǒng)受到抗原刺激后產(chǎn)生的重要保護(hù)分子，是檢測(cè)體液免疫最為常用的判定指標(biāo)。在肺炎支原體感染后，病原刺激B細(xì)胞產(chǎn)生應(yīng)對(duì)肺炎支原體感染的IgG、IgM抗體，引起宿主細(xì)胞膜抗原結(jié)構(gòu)的變化或存在于MP抗體相似成分，從而使自身抗體發(fā)生病理免疫反應(yīng)[6]。因IgG、IgM、IgA最能代表IG水平變化情況。IgM是最早出現(xiàn)的人體免疫抗體，因此，該文以血清免疫球蛋白與T淋巴細(xì)胞亞群變化進(jìn)行判斷。陳欣等人[5]在有關(guān)報(bào)道提到：IgM及IgA含量在肺炎支原體感染后出現(xiàn)顯著的下降，而IgG通常在2周后出現(xiàn)變動(dòng)。該研究中觀察組急性期IgG、IgM及IgA均略低于對(duì)照組血清免疫球蛋白水平（P<0.05），且觀察組急性組患兒IgG、IgM及IgA均低于恢復(fù)期（P<0.05），急性期血清免疫球蛋白值更低，表明患兒體液免疫功能的下降程度更大，合成抗體數(shù)目減少，從而加劇機(jī)體免疫紊亂，引起機(jī)體組織損傷。因肺炎支原體感染引起IgG、IgM、IgA水平變化作用于B淋巴細(xì)胞，刺激B淋巴細(xì)胞大量繁殖，導(dǎo)致體液免疫亢奮，加重MP免疫損傷。此外，因B淋巴細(xì)胞與T淋巴細(xì)胞存在負(fù)相關(guān)，一定程度上抑制T淋巴細(xì)胞的合成與分泌，進(jìn)一步加劇機(jī)體免疫功能失調(diào)和紊亂。

T淋巴細(xì)胞是在骨髓中多能干細(xì)胞在誘導(dǎo)下發(fā)展成為具有免疫活性的T細(xì)胞。T淋巴細(xì)胞按照表型分類為亞型與亞群。其中CD3+細(xì)胞標(biāo)志為最具代表性的成熟T淋巴細(xì)胞。CD4+標(biāo)志為輔助型T淋巴細(xì)胞，能優(yōu)化T淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞的防御免疫應(yīng)答反應(yīng)。CD8+標(biāo)志為具有表面毒性T細(xì)胞，通過釋放穿孔素、絲氨酸酯酶以及淋巴毒素殺傷靶細(xì)胞，達(dá)到誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。CD4+/CD8+ 表示為機(jī)體細(xì)胞免疫功能相對(duì)情況，是評(píng)估機(jī)體免疫能力的重要指標(biāo)。比值異常變化越大表明機(jī)體免疫功能的紊亂。

該研究結(jié)果中，觀察組各時(shí)期T淋巴細(xì)胞亞群中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平值均低于對(duì)照組（P<0.05），肺炎支原體感染的患兒機(jī)體內(nèi)T淋巴細(xì)胞與正常小兒比較應(yīng)答反應(yīng)更弱，細(xì)胞活性功能下降。觀察組各時(shí)期CD8+水平高于對(duì)照組（P<0.05），觀察組急性期CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+波動(dòng)幅度大于觀察組恢復(fù)期。肺炎支原體感染進(jìn)入血液循環(huán)后刺激血液中T淋巴細(xì)胞亞群，可見T淋巴細(xì)胞亞群變化幅度越大，對(duì)機(jī)體組織及免疫功能的損傷越大，與李政錦相關(guān)研究中提到的T淋巴細(xì)胞亞群中CD3+、CD4+、CD8+失調(diào)比例嚴(yán)重性與肺炎支原體感染呈正相關(guān)的結(jié)論基本一致[7-8]。

綜上所述，肺炎支原體感染后引起IgG、IgM及IgA降低與CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平的變化，表明機(jī)體血清免疫球蛋白與T淋巴細(xì)胞活性受到抑制，患者免疫功能下降?？梢姺窝字гw感染與機(jī)體免疫調(diào)節(jié)紊亂有關(guān)聯(lián)。因此，通過檢測(cè)機(jī)體免疫細(xì)胞及免疫系統(tǒng)可輔助診斷肺炎支氣管感染。

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（收稿日期：2017-01-24）